一种从桑叶中提取1‑脱氧野尻霉素的方法技术

本发明专利技术公开了一种从桑叶中制备1‑脱氧野尻霉素的方法，包括以下步骤：（1）桑叶预处理：桑叶粉碎粗提得到桑叶提取物；（2）提取：酸性乙醇提取桑叶提取物，过滤得到1‑脱氧野尻霉素提取液；（3）纯化：提取液过碱性氧化铝柱，用稀醇洗脱，收集洗脱液，干燥得到粉末；（4）重结晶：纯化后的粉末溶于丙酮，采用丙酮进行重结晶，得到纯品。本发明专利技术采用的工艺步骤少、操作简单，使用的溶剂均可回收再利用，也可进行工业化生产，能在减少环境污染的同时，制备出纯度大于95%的1‑脱氧野尻霉素。

A method of 1 1-deoxynojirimycin extraction from mulberry leaves

The invention discloses a preparation method of mulberry leaves from 1 deoxynojirimycin, which comprises the following steps: (1) the mulberry leaf pretreatment: mulberry leaf crude extract from mulberry leaves are crushed; (2) extract of mulberry leaves extract acid ethanol, filtering to obtain 1 deoxynojirimycin extract; (3): purification of alkaline aluminum oxide column eluted with dilute ethanol extract, and the eluate was dried to obtain powder; (4) recrystallization: the purified powder dissolved in acetone, acetone was recrystallized to obtain pure product. The process steps of the invention is simple, the solvent can be recycled for reuse, can also be used in industrial production, can reduce environmental pollution at the same time, prepared more than 95% purity of 1 deoxynojirimycin.

【技术实现步骤摘要】
一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法
本专利技术涉及天然物提取
，特别涉及一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法。
技术介绍
桑叶味苦、甘、性寒，具有滋阴补血，疏风散热，益肝通气，降压利尿的功效。目前大部分地区将桑作为饲用栽培，每年入冬后随着冬蚕饲养减少，大量桑叶都被废弃。桑叶味苦甘，性寒，归肺、肝经，具有疏风清热、平肝明目的功效；在药理上具有抗炎、降血糖、降血脂、利尿等作用，这些药理活性归功于桑叶中的1-脱氧野尻霉素(DNJ)、白黎芦醇等成分，因而研究桑叶中的这两种成分的提取技术具有重要意义。1-脱氧野尻霉素是人体小肠绒毛上的一种ɑ-糖苷酶抑制剂，能阻止淀粉分解成为葡萄糖，竞争性地阻断小肠粘膜刷状缘内的麦芽糖酶和蔗糖酶等双糖水解酶，使摄食的多糖、寡糖和双糖消化成葡萄糖、果糖等单糖的吸收过程受到阻碍，继而降低血糖浓度，对治疗糖尿病及其并发症具有一定作用。此外，1-脱氧野尻霉素还能预防癌细胞生成，提高人体免疫力，具有抗病毒、抑制肿瘤等功能。目前，1-脱氧野尻霉素的市场价格昂贵(98％纯度1-脱氧野尻霉素约20万元/克)，如果其生产成本降低，其应用领域还将进一步扩大。现有的桑叶1-脱氧野尻霉素提取方法如CN102190618A的方法是将桑叶粉碎，在40-60℃温度下，通过酶解酶解得到酶解原料50%-80%的碱性亲水溶剂加热回流提取1-3次，每次110-130min，冷却过滤，之后进行低压浓缩，静置8-12小时，收集沉淀，加入酸溶液，搅拌，使其充分溶解后，过滤，将滤液通过超滤膜，将超滤液通过阳离子树脂后，用氨醇溶液进行洗脱，收集并浓缩洗脱液，然后通过大孔吸附树脂，用醇液洗脱，收集洗脱液；在进行使用甲醇-饱和氨水混合溶剂结晶与重结晶。此方法工艺较长，操作较为繁琐，溶剂耗损较大，效率较低工业化生产成本较高。通过本专利技术的研究，从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的制备工艺步骤少、操作简单，使用的溶剂均可回收再利用，也可进行工业化生产，能在减少环境污染的同时，最大程度上制备出纯度较高的1-脱氧野尻霉素。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种更为简单合理地从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法，能在减少环境污染的同时，最大程度上制备出纯度较高的1-脱氧野尻霉素。本专利技术的提取物制备方法包括以下步骤实现：(1)原料处理：取桑叶，去除杂质后，洗净，沥干，粉碎；(2)提取：桑叶质量8-12倍量的酸性乙醇提取桑叶加热提取2~3次，提取的温度在50~100℃，过滤得到1-脱氧野尻霉素提取液；(3)纯化：将步骤（2）得到的提取液浓缩至原提取液体积的1/5-1/10,然后通过碱性氧化铝柱，用4-8倍柱体积的稀醇洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得到粉末；(4)重结晶：将步骤（3）得到的粉末重量的8-10倍溶于丙酮，采用丙酮进行重结晶，得到纯品。步骤(1)中，将桑叶粉碎至150～250目。步骤(2)中，酸性乙醇用盐酸或冰醋酸溶解在乙醇中，pH值在1~3。步骤(3)中，稀醇的乙醇浓度为10%~30%，最优浓度为20%；氧化铝采用100~200目；氧化铝在130℃活化12h。步骤(4)中，析晶温度-5℃-10℃，析晶次数为2-3次。本专利技术制备出纯度较高的1-脱氧野尻霉素具有如下优点:(1)在提取过程中进行酸化处理，后冷却除去杂质的步骤具有重要作用，由于不需要加入絮凝剂，在降低成本、提高含量的同时保证了后处理过程中没有外源性的物质带入。(2)使用的溶剂均可以通过回收再利用，极大地降低了资源的损耗，对环境污染极小，且最大程度上制备出纯度较高的1-脱氧野尻霉素。(3)本专利技术方法设计合理，工艺步骤少，操作简便，无需特殊设备，非常适合工业化生产。具体实施方式用高效液相法检测DNJ含量，检测设备为Agilent1100高效液相色谱仪色谱柱为HypersilODS(250mm×4.6mm，5μ)，DNJ经衍生试剂进行衍生后的液相色谱检测条件：流动相为乙腈与0.1％醋酸体积比11：16、检测波长为254nm、流速为1ml/min、进样量为20μL。下面结合具体实施例对本专利技术进一步描述，但本专利技术要求保护的范围绝不局限于下列实施方式。实施例1（1）原料前处理：将300g干燥桑叶粉碎，80%以上过200目；（2）提取：pH为2的酸性乙醇3000ml提取桑叶加热提取3次，提取的温度在75℃，过滤得到1-脱氧野尻霉素提取液；（3）纯化：将步骤(2)得到的提取液浓缩至原提取液体积的1/10,然后通过碱性氧化铝柱，用8倍柱体积的20%稀醇洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得到粉末；（4）重结晶：将步骤(3)取20ml丙酮使粉末溶解其中，降温至0℃，结晶后低温过滤，反复析晶三次,得到纯度92.6%的1-脱氧野尻霉素。实施例2（1）原料前处理：将300g干燥桑叶粉碎，80%以上过200目；（2）提取：pH为2的酸性乙醇3000ml提取桑叶加热提取3次，提取的温度在75℃，过滤得到1-脱氧野尻霉素提取液；（3）纯化：将步骤(2)得到的提取液浓缩至原提取液体积的1/10,然后通过碱性氧化铝柱，用8倍柱体积的20%稀醇洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得到粉末；（4）重结晶：将步骤（3）取20ml丙酮使粉末溶解其中，降温至5℃，结晶后低温过滤，反复析晶三次,得到纯度87.2%的1-脱氧野尻霉素。实施例3（1）原料前处理：将300g干燥桑叶粉碎，80%以上过200目；（2）提取：pH为2的酸性乙醇3000ml提取桑叶加热提取3次，提取的温度在100℃，过滤得到1-脱氧野尻霉素提取液；（3）纯化：将步骤（2）得到的提取液浓缩至原提取液体积的1/10,然后通过碱性氧化铝柱，用8倍柱体积的20%稀醇洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得到粉末；（4）重结晶：将步骤（3）取20ml丙酮使粉末溶解其中，降温至0℃，结晶后低温过滤，反复析晶三次,得到纯度87.8%的1-脱氧野尻霉素。实施例4（1）原料前处理：将300g干燥桑叶粉碎，80%以上过200目；（2）提取：pH为3的酸性乙醇提取桑叶加热提取3次，提取的温度在75℃，过滤得到1-脱氧野尻霉素提取液；（3）纯化：将步骤（2）得到的提取液浓缩至原提取液体积的1/10,然后通过碱性氧化铝柱，用8倍柱体积的10%稀醇洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得到粉末；（4）重结晶：将步骤（3）取20ml丙酮使粉末溶解其中，降温至10℃，结晶后低温过滤，反复析晶三次，得到纯度84.8%的1-脱氧野尻霉素。。实施例5（1）原料前处理：将300g干燥桑叶粉碎，80%以上过200目；（2）提取：pH为2的酸性乙醇提取桑叶加热提取3次，提取的温度在100℃，过滤得到1-脱氧野尻霉素提取液；（3）纯化：将步骤（2）得到的提取液浓缩至原提取液体积的1/10,然后通过碱性氧化铝柱，用10倍柱体积的20%稀醇洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得到粉末；（4）重结晶：将步骤（3）取20ml丙酮使粉末溶解其中，降温至0℃，结晶后低温过滤，反复析晶三次，得到纯度87.1%的1-脱氧野尻霉素。实施例6（1）原料前处理：将300g干燥桑叶粉碎，80%以上过200目；（2）提取：pH为2的酸性乙醇4L提取桑叶加热提取3次，提取的温度在75℃，过滤得到1-脱氧野尻霉素提取液；（3）纯化：将步骤（2）得到的提取液浓缩至原提取液体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从桑叶中提取1‑脱氧野尻霉素的方法，其特征包括以下制备步骤：(1)原料处理：取桑叶，去除杂质后，洗净，沥干，粉碎；(2)提取：桑叶质量8‑12倍量的酸性乙醇提取桑叶加热提取2~3次，提取的温度在50~100℃，过滤得到1‑脱氧野尻霉素提取液；(3)纯化：提取液浓缩至原提取液体积的1/5‑1/10,然后通过碱性氧化铝柱，用4‑8倍柱体积的稀醇洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得到粉末；(4)重结晶：步骤(3)纯化后的粉末重量的8‑10倍溶于丙酮，采用丙酮进行重结晶，得到纯品。

【技术特征摘要】
1.一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法，其特征包括以下制备步骤：(1)原料处理：取桑叶，去除杂质后，洗净，沥干，粉碎；(2)提取：桑叶质量8-12倍量的酸性乙醇提取桑叶加热提取2~3次，提取的温度在50~100℃，过滤得到1-脱氧野尻霉素提取液；(3)纯化：提取液浓缩至原提取液体积的1/5-1/10,然后通过碱性氧化铝柱，用4-8倍柱体积的稀醇洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得到粉末；(4)重结晶：步骤(3)纯化后的粉末重量的8-10倍溶于丙酮，采用丙酮进行重结晶，得到纯品。2.根据权利要求1所述的从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏元刚，葛玲，杨永安，钟慧，金显友，王蓉，
申请(专利权)人：江苏耐雀生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32