一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法技术

本发明专利技术涉及一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法。该方法是：将新鲜桑叶洗净，干燥，碾碎，碾碎后桑叶粒径达到0.1-1cm；然后将碾碎的桑叶与提取溶剂按一定比例混合均匀，放入超微粉碎机的料槽里粉碎，使粉碎和提取同时进行；提取完成后，料液经离心，取上清液脱水干燥得到粉末。本发明专利技术提高了提取率简化了加工工艺，而且减少了如絮凝剂等物质的引入，更加有利于后续的纯化分离工作。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然植物有效成分提取领域，具体涉及到。
技术介绍
桑叶被用来治疗消渴之症(即糖尿病)已在中医领域长期应用。现代药理研究表明，桑叶含有一种多羟基生物碱1-脱氧野尻霉素(DNJ)，是小肠中的多种α-糖苷酶的抑制剂，能竞争性地抑制麦芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶等活性，阻止二糖分解为单糖，从而防止血糖浓度升高，有效延缓糖尿病及其并发症的发作和恶化。现有专利中，从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法已有不少。多数是根据1-脱氧野尻霉素的化学性质，选用适宜的溶剂和提取技术将1-脱氧野尻霉素从桑叶中提取出来。 这些方法虽然技术简单，易于操作，但是提取时间长达l-2h，提取溶剂使用量大，造成提取液中的杂质增多，给后期的分离纯化带来了困难，因此提高了成本，浪费了资源。如专利号为CN1579445A的专利技术专利是用10-20倍的水提取Ih后，得到水提液，然后加絮凝剂，在经醇沉后获得DNJ提取物；CN101020655A不用絮凝剂，但是要酸化提取液，提取池，再经浓缩、 分离得到1-脱氧野尻霉素。而针对粉碎方法的改进和物理、化学结合法提取桑叶中1-脱氧野尻霉素的工艺还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于缩短提取时间，减少提取液中杂质种类，提供了一种更为高效便捷的从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素(DNJ)的方法。本专利技术从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法包括以下步骤(1)将新鲜桑叶洗净，干燥，碾碎，粒径达到0.I-Icm ；(2)将碾碎的桑叶与提取溶剂按一定比例混合均勻，放入超微粉碎机的料槽里粉碎，使粉碎和提取同时进行；(3)提取完成之后，料液经离心，取上清液脱水干燥得到粉末。本专利技术方法步骤(1)中，将新鲜桑叶洗净后，可先将桑叶在50-95°C下热风干燥， 桑叶含水量降低至2-5%再碾碎。本专利技术方法步骤(2)中，将桑叶与提取溶剂按料液比为l:4-l:16g/mL的比例混合均勻，再放入超微粉碎机的料槽里，粉碎2-40min，使粉碎和提取同时进行。上述方法中所述提取溶剂为去离子水、0.05M的盐酸或硫酸溶液、体积浓度为 10-50%的甲醇溶液、体积浓度为50%的乙醇溶液和体积浓度为10%的乙腈溶液中的一种。 所述超微粉碎机包括高频振动式超微粉碎机、旋转球(棒)磨式超微粉机、冲击式超微粉碎机、胶体磨和均质机粉碎。经本专利技术方法得到的粉末，用HPLC法测定1-脱氧野尻霉素的含量可达3%左右。本专利技术的优点体现在1、采用超微粉碎法，能使桑叶在较短的时间内粉碎成粒径达10-25μπι的微粉，很大程度上增加了桑叶粉末的比表面积；2、在机械(高频振动)和化学 (相似相溶)的共同作用下，桑叶的细胞壁能全部破碎，同时，能打破桑叶粉末的凝集体，使 1-脱氧野尻霉素与提取溶剂充分接触，更容易扩散到溶剂中，从而提高了提取率；3、结合粉碎和提取两个过程，不仅能将提取时间缩短3-6倍，简化了加工工艺，而且减少了如絮凝剂等物质的引入，更加有利于后续的纯化分离工作。附图说明图1为ι-脱氧野尻霉素标准样色谱图。图2为实施例1中测定·fe叶粉末1-脱氧野尻·I素含量的色谱图。图3为实施例2中测定·fe叶粉末1-脱氧野尻·I素含量的色谱图。图4为实施例3中测定·fe叶粉末1-脱氧野尻·I素含量的色谱图。图5为实施例4中测定·fe叶粉末1-脱氧野尻·I素含量的色谱图。图6为实施例5中测定·fe叶粉末1-脱氧野尻·I素含量的色谱图。图7为实施例6中测定·fe叶粉末1-脱氧野尻·I素含量的色谱图。图8为实施例7中测定·fe叶粉末1-脱氧野尻·I素含量的色谱图。具体实施例以下通过具体实施例来说明本专利技术，但本专利技术并不仅限于这些实施例。实施例1将采摘的新鲜桑叶洗去表面的虫卵、尘土，自然晾干桑叶表面的水分，然后将桑叶通过 50°C烘干，使桑叶含水量降低至5%。将干燥后的桑叶碾碎，使粒径达0. 1-lcm，与去离子水按料液比为l:4g/mL的比例混合均勻后，放入高频振动式超微粉碎机的料槽里，粉碎2min， 使粉碎和提取同时进行。提取完成之后，从粉碎槽里倒出料液混合物之后，离心，取上清液脱水干燥得到粉末。HPLC法(色谱条件hertsil ODS-SP C18(4. 6 mmX250 mm, 5 μ m)，流动相乙腈-0. 1%冰乙酸(50:50)，分析时间25min，柱温25°C，荧光检测器激发波长254nm， 发射波长322 nm，进样量10yL，外标法分析计算。)测定1-脱氧野尻霉素的含量可达2. 14% (图2)，1-脱氧野尻霉素标准样色谱图见图1。实施例2将采摘的新鲜桑叶洗去表面的虫卵、尘土，自然晾干桑叶表面的水分，然后将桑叶通过 95°C烘干，使桑叶含水量降低至洲左右。将干燥后的桑叶碾碎，使粒径达0. 1-lcm,与0. 05M 盐酸按料液比为1 16g/mL的比例混合均勻后，放入胶体磨的料槽里，粉碎40min，使粉碎和提取同时进行。提取完成之后，从粉碎槽里倒出料液混合物之后，离心，取上清液脱水干燥得到粉末，HPLC法测定1-脱氧野尻霉素的含量可达3. 57% (图3)。实施例3将采摘的新鲜桑叶洗净，自然晾干桑叶表面的水分，然后在80°C下烘干，使桑叶含水量降低至5%左右。将干燥后的桑叶碾碎，使粒径达0. 1-lcm,与体积浓度为10%甲醇溶液按料液比1 10g/mL混合均勻，放入高频振动式超微粉碎机的料槽里，粉碎30min，使粉碎和提取同时进行。提取完成后，从粉碎槽里倒出料液混合物，离心，取上清液脱水干燥得到粉末， HPLC法测定1-脱氧野尻霉素的含量可达2. 36% (图4)。实施例4将采摘的新鲜桑叶洗净，自然晾干桑叶表面的水分，然后在80°C下烘干，使桑叶含水量降低至5%左右。将干燥后的桑叶碾碎，使粒径达0. I-Icm,与体积浓度为30%甲醇溶液按料液比1 10g/mL混合均勻，放入高频振动式超微粉碎机的料槽里，粉碎30min，使粉碎和提取同时进行。提取完成后，从粉碎槽里倒出料液混合物，离心，取上清液脱水干燥得到粉末， HPLC法测定1-脱氧野尻霉素的含量可达3. 28% (图5)。实施例5将采摘的新鲜桑叶洗净，自然晾干桑叶表面的水分，然后在80°C下烘干，使桑叶含水量降低至5%左右。将干燥后的桑叶碾碎，使粒径达0. I-Icm,与体积浓度为50%甲醇溶液按料液比1 10g/mL混合均勻，放入高频振动式超微粉碎机的料槽里，粉碎30min，使粉碎和提取同时进行。提取完成后，从粉碎槽里倒出料液混合物，离心，取上清液脱水干燥得到粉末， HPLC法测定1-脱氧野尻霉素的含量可达3. 47% (图6)。实施例6将采摘的新鲜桑叶洗净，自然晾干桑叶表面的水分，然后在80°C下烘干，使桑叶含水量降低至5%左右。将干燥后的桑叶碾碎，使粒径达0. I-Icm,与体积浓度为50%乙醇溶液按料液比1 16g/mL混合均勻，放入高频振动式超微粉碎机的料槽里，粉碎30min，使粉碎和提取同时进行。提取完成后，从粉碎槽里倒出料液混合物，离心，取上清液脱水干燥得到粉末， HPLC法测定1-脱氧野尻霉素的含量可达3. 59% (图7)。实施例7将采摘的新鲜桑叶洗净，自然晾干桑叶表面的水分，然后在80°C下烘干，使桑叶含水量降低至5%左右。将干燥后的桑叶碾碎，使粒径达0. I-Icm本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法，其特征是包括以下步骤 将新鲜桑叶洗净，干燥，碾碎，碾碎后桑叶粒径达到0. I-Icm ；将碾碎的桑叶与提取溶剂按一定比例混合均勻，放入超微粉碎机的料槽里粉碎，使粉碎和提取同时进行；提取完成后，料液经离心，取上清液脱水干燥得到粉末。2.根据权利要求1所述从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法，其特征是步骤(1)中桑叶洗净后于50-95°C下热风干燥，使...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐鑫，刘国艳，魏晓蕊，叶群，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：