黄曲霉毒素B1适配体亲和毛细管整体柱的制备及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种黄曲霉毒素B1适配体亲和毛细管整体柱的制备及应用，将氨基修饰的黄曲霉毒素B1适配体通过戊二醛偶联接枝修饰于有机‑无机杂化的氨基毛细管整体柱，通过适配体与黄曲霉毒素B1特异性亲和作用，有机‑无机杂化整体柱高的柱渗透性和大的比表面积，可以高灵敏、高选择性地分离、富集复杂食品样品中痕量、超痕量黄曲霉毒素B1，与检测仪器联用可实现黄曲霉毒素B1简便、灵敏、快速检测。

【技术实现步骤摘要】
黄曲霉毒素B1适配体亲和毛细管整体柱的制备及应用
本专利技术涉及黄曲霉毒素B1的分离富集方法，具体涉及一种黄曲霉毒素B1适配体亲和毛细管整体柱的制备方法及应用。
技术介绍
黄曲霉毒素B1（AFB1）是主要由黄曲霉和寄生曲霉等产生的一种有毒代谢产物，已被国际癌症研究机构(IARC)定为一级致癌物。黄曲霉毒素B1广泛分布于各类农产品和食品中，其中最易受到污染的主要有花生、玉米、稻谷、小麦、花生油等粮油食品。鉴于AFB1的严重危害性，国内外相关组织对其制定了严格的限量标准。目前黄曲霉毒素B1的检测方法主要有薄层色谱法（TLC）、高效液相色谱法（HPLC）、液质联用法（LC-MS）、免疫分析法（IA）等。在众多的方法中，HPLC由于操作简单，准确可靠，重复性好，已成为实验室内黄曲霉毒素B1的主要检测方法。但是由于农产品和食品样品基体复杂，在采用HPLC检测黄曲霉毒素B1时，需要对提取液有一个分离纯化的过程。由于相对高的亲和力和特异性，免疫亲和柱在分离纯化和检测分析中得到了广泛的应用。然而，在亲和色谱中，免疫抗体存在一些明显的局限性，（1）抗体在固定相上的固定化仍然具有一定的挑战性，固定的抗体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黄曲霉毒素B1适配体亲和毛细管整体柱的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）毛细管活化：分别用1.0mol/L氢氧化钠溶液冲洗毛细管4h，去离子水冲洗30min，1.0mol/L盐酸溶液冲洗4h，然后再以去离子水洗至中性，在160℃下用氮气吹干；（2）整体柱的原位合成：首先将10~30mg CTAB溶于150~350μL无水乙醇和50~150μL去离子水的混合溶液中；然后将100~200μL TEOS和50~100μL APTES快速加入上述混合溶液中，室温涡旋0.5~5min，然后放置在‑5~5℃的水浴中超声0.5~5min后，将混合溶液灌入上述活化处理过的毛细管中；最后，毛细管两端...

【技术特征摘要】
1.一种黄曲霉毒素B1适配体亲和毛细管整体柱的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）毛细管活化：分别用1.0mol/L氢氧化钠溶液冲洗毛细管4h，去离子水冲洗30min，1.0mol/L盐酸溶液冲洗4h，然后再以去离子水洗至中性，在160℃下用氮气吹干；（2）整体柱的原位合成：首先将10~30mgCTAB溶于150~350μL无水乙醇和50~150μL去离子水的混合溶液中；然后将100~200μLTEOS和50~100μLAPTES快速加入上述混合溶液中，室温涡旋0.5~5min，然后放置在-5~5℃的水浴中超声0.5~5min后，将混合溶液灌入上述活化处理过的毛细管中；最后，毛细管两端以硅橡胶封口，放置于30~60℃烘箱中反应10~30h；（3）整体柱的清洗：反应完成后，以甲醇和水充分清洗毛细管；（4）戊二醛衍生：将含有5~20%戊二醛的磷酸缓冲溶液以5~20μL/min速率通入毛细管整体柱中，连续反应12h，然后用磷酸缓冲溶液冲洗掉残留的戊二醛；（5）修饰适配体：将黄曲霉毒素B1适配体制成浓度为4~8nmol/L的磷酸缓冲溶液，注入毛细管整体柱中反应8~12h，重复三次，用磷酸缓冲溶液冲洗掉未反应的适配体；最后用3~8mg/ml氰...

【专利技术属性】
技术研发人员：李彭，方勇，裴斐，姚远航，刘琴，
申请(专利权)人：南京财经大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32