一种脂质体介导的细胞转染方法技术

本发明专利技术涉及一种脂质体介导的细胞转染方法，其包括以下步骤：S1：将包含细胞的液体培养基接种于转染容器中，所述包含细胞的液体培养基中包含0.5‑2μg/mL的纤粘蛋白；S2：向所述转染容器中添加转染DNA和脂质体转染试剂的混合液进行转染。通过在处理过程中使用纤粘蛋白可使细胞快速贴壁，从而无需将对细胞进行培养24个小时以达到要求的汇合度，因此，该方法减少了操作时间，简化了操作程序，降低了操作难度，同时降低了细胞被污染的风险。

Liposome mediated cell transfection method

The invention relates to a liposome mediated transfection method, which comprises the following steps: S1: containing cells in liquid culture medium inoculated with transfected vessel, the cell containing liquid medium containing 0.5 2 g/mL Fibronecin; S2: the mixture added DNA and liposome transfection transfection reagent to the transfection container were transfected. Through the use of fibronectin in the process of the rapid cell wall, which does not need to be cultured for 24 hours in order to achieve the required degree of confluence of cells, therefore, the method can reduce operation time, simplify the operation procedures, reduce the operation difficulty, while reducing the risk of contamination of cells.

【技术实现步骤摘要】
一种脂质体介导的细胞转染方法
本专利技术涉及细胞生物学领域，更特别地，涉及一种脂质体介导的细胞转染方法。
技术介绍
转染是将外源遗传物质转入到真核细胞内的一种专门技术，随着基因与蛋白功能研究的深入，转染已成为现代分子生物学研究中经常涉及的基本方法，它解决了外源遗传物质导入细胞的难题，为在细胞水平上进行基因功能研究奠定了基础。随着近年来基因工程技术的不断发展，出现了多种多样的转染技术，按外源遗传物质是否与基因组整合来分，转染技术分为瞬时转染和稳定转染两大类；按转染实施手段来分，转染技术分为物理介导、化学介导和生物介导三大类。常见的转染方法有显微注射、电穿孔、基因枪、光学转染、DEAE-葡聚糖法、磷酸钙法、人工脂质体法等。转染技术的选择会影响细胞转染效率，进而影响到整个实验结果。因此在进行细胞转染前，需对转染过程中涉及的因素进行综合分析，以便筛选出针对特定细胞转染的最适方法和条件。阳离子脂质体转染法具有操作简单，转染成功率高，对细胞类型的应用面广，可以转染DNA、RNA、寡核苷酸以及蛋白质、病毒等多种类型，可以负载大片段DNA等优点，既可用于瞬时转染，也可用于永久表达系的建立；既可用于细本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脂质体介导的细胞转染方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将包含细胞的液体培养基接种于转染容器中，所述包含细胞的液体培养基中包含0.5‑2μg/mL的纤粘蛋白；S2：向所述转染容器中添加转染DNA和脂质体转染试剂的混合液进行转染。

【技术特征摘要】
1.一种脂质体介导的细胞转染方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将包含细胞的液体培养基接种于转染容器中，所述包含细胞的液体培养基中包含0.5-2μg/mL的纤粘蛋白；S2：向所述转染容器中添加转染DNA和脂质体转染试剂的混合液进行转染。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S1中细胞的接种浓度为1-2×106个/mL。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述液体培养基为含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，S2具...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚萍，杨永平，杨宇，叶胜强，王丽霞，邓兵，凌明湖，刘武，钱运国，周华，
申请(专利权)人：武汉市农业科学技术研究院畜牧兽医科学研究所，
类型：发明
国别省市：湖北,42