一种生鲜乳是否合格的快速检测方法技术

本发明专利技术属于生鲜乳中主要病原菌快速检测方法技术领域，具体公开了一种生鲜乳是否合格的快速检测方法。本发明专利技术采用一种新型安全的色原试剂——TMB，与生鲜乳中污染细菌所产生的过氧化氢酶反应，生成可溶性淡蓝色的末端产物，该反应可以用2M H2SO4终止 (产生黄色沉淀)，通过在450nm处读取反应OD值，间接反应出生鲜乳中细菌所产生的过氧化氢酶浓度，最终达到测定生鲜乳中细菌污染的程度的目的。该方法能在15min内准确、快速、简便地检测生鲜乳中细菌的含量，可多个样品同时测定，有效解决长期困扰生鲜乳中主要病原菌检测的技术难题。

A rapid method for detecting the quality of fresh milk

The invention belongs to the technical field of the rapid detection method of the main pathogenic bacteria in fresh milk, and specifically discloses a rapid detection method of whether the fresh milk is qualified. The invention adopts a new safe chromogen reagent, TMB and catalase reaction produced by bacteria in raw milk, the end product of soluble light blue, the reaction can be terminated by 2M H2SO4 (yellow precipitate), should read through the anti od at 450nm, the indirect reaction of catalase concentration was born produced by the bacteria in milk, ultimately achieve the determination of bacterial contamination in raw milk to the extent. The method can detect the content of bacteria in fresh milk accurately, quickly and simply in 15min. Multiple samples can be determined simultaneously, so as to effectively solve the technical problems of long-term detection of the main pathogens in fresh milk.

【技术实现步骤摘要】
一种生鲜乳是否合格的快速检测方法
本专利技术属于病原菌检测
，涉及一种生鲜乳是否合格的快速检测方法。
技术介绍
乳制品是老少皆宜的营养品，生鲜乳是乳制品质量好坏的源头和关键。近年来，乳品安全事件频繁发生。其中大部分是由于污染致病菌引起的大规模乳品中毒事件，这些事件再次使乳品安全问题成为社会各界关注的焦点。在我国，由于饲养管理不合理，生鲜乳生产流通环节易污染，造成菌落总数超标，给消费者健康带来了潜在威胁，严重影响消费者的身心健康。生鲜乳中微生物的含量是评价原奶品质的一个重要指标，而对其的快速检测一直是相关研究的热点。目前，生鲜乳微生物菌落总数检测手段有微生物法、理化法和免疫法、PCR技术、基因芯片以及流式细胞技术等，但这些技术的检测存在时间较长，费用花费较高，技术操作复杂等问题，在生鲜乳检测中难以广泛推广应用。因而提高生鲜乳中微生物快速检测技术显得尤其重要，开发快速、简单、准确、价格低廉的生鲜乳中污染微生物的检测技术，是解决我国当前乳和乳制品行业面临的关键性难题。
技术实现思路
针对现有技术中存在的不足，本专利技术的目的在于提供了一种准确、快速及简便的生鲜乳是否合格的快速检测方法。为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生鲜乳是否合格的快速检测方法，其特征在于：所述生鲜乳是否合格的快速检测方法包括以下步骤：1）取生鲜乳样品于离心管中，在6000r/min的条件下离心20min，去除大颗粒及脂肪球后得到待测乳液；2）将20µL的待测乳液置于酶标反应试管中，加入TMB工作液100µL，置于37℃避光孵育15min，然后加入2 M H2SO4 溶液50µL，获取450nm处的OD450值；所述TMB工作液包括底物缓冲液以及TMB使用液；所述底物缓冲液与TMB使用液的体积比是1：1；所述TMB使用液中各组分用量分别为：2mg/mL的TMB无水乙醇溶液0.5mL、底物缓冲液10ml以及30% H2O2 32μL；所...

【技术特征摘要】
1.一种生鲜乳是否合格的快速检测方法，其特征在于：所述生鲜乳是否合格的快速检测方法包括以下步骤：1）取生鲜乳样品于离心管中，在6000r/min的条件下离心20min，去除大颗粒及脂肪球后得到待测乳液；2）将20µL的待测乳液置于酶标反应试管中，加入TMB工作液100µL，置于37℃避光孵育15min，然后加入2MH2SO4溶液50µL，获取450nm处的OD450值；所述TMB工作液包括底物缓冲液以及TMB使用液；所述底物缓冲液与TMB使用液的体积比是1：1；所述TMB使用液中各组分用量分别为：2mg/mL的TMB无水乙醇溶液0.5mL、底物缓冲液10ml以及30%H2O232μL；所述底物缓冲液中各组分用量分...

【专利技术属性】
技术研发人员：何斌，陈洁，邵志勇，姚艳丰，杨文海，陈夏冰，刘武，金尔光，童伟文，席凤琴，陶弼菲，
申请(专利权)人：武汉市农业科学技术研究院畜牧兽医科学研究所，
类型：发明
国别省市：湖北,42