一种灵芝的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种灵芝的提取方法，取干燥的灵芝子实体，切碎，于‑25℃‑20℃下冷冻后，解冻，用乙醇溶液加热回流提取，滤过，滤渣备用，提取液减压回收乙醇，浓缩液加水，上大孔吸附树脂，加水洗脱，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，得醇提取液，备用；滤渣中加入氢氧化钾水溶液，文火加热至50‑60℃后，保温，加入活性炭，静置，过滤，滤液与上述醇提取液合并，浓缩，即得。本发明专利技术对灵芝的具体提取工艺进行了改进，使得灵芝的有效成分多糖容易测出，且测出的多糖含量高，使得灵芝的药效好。

Method for extracting glossy ganoderma

The invention discloses a method for extracting ganoderma lucidum, dried Ganoderma lucidum, chopped, to 25 DEG C 20 DEG C after freezing and thawing, extraction, ethanol reflux filtration, filter residue reserve, extract vacuum recovery ethanol, concentrated liquid water on macroporous resin, eluting with water then, ethanol elution, collecting the eluent, recycling ethanol to obtain alcohol extract, adding potassium hydroxide aqueous reserve; filter residue, slow heating to 50 DEG C after 60, insulation, adding active carbon, standing, filtering, filtrate and the alcohol extract is concentrated, with. The invention has improved the concrete extraction process of Ganoderma lucidum, so that the effective component polysaccharide of Ganoderma lucidum is easy to be detected, and the content of the polysaccharide is high, so that the efficacy of the Ganoderma lucidum is good.

【技术实现步骤摘要】
一种灵芝的提取方法
本专利技术涉及一种灵芝的提取方法，特别是一种灵芝多糖含量高的灵芝的提取方法。
技术介绍
灵芝为多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体。灵芝是一种珍贵的药用真菌，属于担子菌纲多孔菌科灵芝属，在我国有两千多年的药用史。灵芝首载于《神农本草经》，历代医家都认为灵芝能治疗多种疾病，是滋补强壮扶正固本的珍贵药物。灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一，存在于灵芝的子实体、孢子粉和菌丝体中，具有抑制肿瘤、增强机体对自由基清除的能力，故能减少自由基对机体的损伤、有延缓衰老之功效，还可以提高免疫力、抗炎症、降血脂、降血糖等作用。灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一，存在于灵芝的子实体、孢子粉和菌丝体中，具有抑制肿瘤、增强机体对自由基清除的能力，故能减少自由基对机体的损伤、有延缓衰老之功效，还可以提高免疫力、抗炎症、降血脂、降血糖等作用。如果将灵芝进行加工，更能有利于灵芝药效的发挥，现有技术中对灵芝进行加工时，通常是直接将灵芝粉碎成粉，但是专利技术人在研究过程中发现，采用现有技术对灵芝进行加工时，灵芝的有效成分多糖不易测出，使得灵芝的的药效还不够理想。
技术实现思路
本专利技术的目的，是提供一种灵芝的提取方法。本专利技术对灵芝的具体提取工艺进行了改进，使得灵芝的有效成分多糖容易测出，且测出的多糖含量高，使得灵芝的药效好。本专利技术是这样实现的。一种灵芝的提取方法，取干燥的灵芝子实体，切碎，于-25℃-20℃下冷冻后，解冻，用乙醇溶液加热回流提取，滤过，滤渣备用，提取液减压回收乙醇，浓缩液加水，上大孔吸附树脂，加水洗脱，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，得醇提取液，备用；滤渣中加入氢氧化钾水溶液，文火加热至50-60℃后，保温，加入活性炭，静置，过滤，滤液与上述醇提取液合并，浓缩，即得。前述的灵芝的提取方法，具体包括以下步骤：（1）取干燥的灵芝子实体，切碎，于-25℃-20℃下冷冻10-12h，得A品；（2）A品常温下解冻后，用10-12倍量的浓度为70-80%的乙醇溶液加热回流提取2-3次，每次1-2小时，滤过，滤渣备用，提取液减压回收乙醇，得浓缩液，即B品；（3）B品加水至体积每毫升与药材量每克之比为1-3：3-1，上大孔吸附树脂，加水洗脱4-10倍柱体积，再用浓度为30-70%乙醇洗脱4-10倍柱体积，收集洗脱液，回收乙醇，得醇提取液，即C品；（4）滤渣中加入15-25倍量的浓度为0.5-1%的氢氧化钾水溶液，文火加热至50-60℃后，保温20-30min，加入活性炭，静置3-5h后，过滤，收集滤液，得D品；（5）D品与C品合并，浓缩至50-60℃下相对密度为1.1-1.2的浸膏，即得。前述的灵芝的提取方法中，所述步骤（1）中，冷冻时间为11h。前述的灵芝的提取方法中，所述步骤（2）中，A品常温下解冻后，用11倍量的浓度为75%的乙醇溶液加热回流提取2次，每次1.5小时，滤过，滤渣备用，提取液减压回收乙醇，得浓缩液，即B品。前述的灵芝的提取方法中，所述步骤（3）中，B品加水至体积每毫升与药材量每克之比为1：1.5，上大孔吸附树脂，加水洗脱7倍柱体积，再用50%乙醇洗脱7倍柱体积，收集洗脱液，回收乙醇，得醇提取液，即C品。前述的灵芝的提取方法中，所述步骤（4）中，滤渣中加入20倍量的浓度为0.8%的氢氧化钾水溶液，文火加热至50-60℃后，保温25min，加入活性炭，静置4h后，过滤，收集滤液，得D品。前述的灵芝的提取方法中，所述活性炭的加入量为滤渣重量的0.4-0.6倍。前述的灵芝的提取方法中，所述活性炭的加入量为滤渣重量的0.5倍。申请人对灵芝的提取方法进行了大量的研究，部分如下：实验例多糖含量测定1测定项目：1.1灵芝1：按实施例1加工得到的灵芝浸膏，干燥，粉碎，得到灵芝粉。灵芝2：将灵芝烘干后，直接粉碎得到的灵芝粉。方法2.1苯酚溶液的配制精确称量分析纯苯酚晶体5g于250mL，加入蒸馏水60mL，放入50℃水浴中使其溶解，再于100mL容量瓶中定容，即得5%苯酚溶液。苯酚可以被空气氧化，所以苯酚溶液现配现用。样品溶液的制备2.2.1灵芝1样品溶液：取灵芝1，0.5g于500mL烧杯中，加入15mL95％乙醇，于60℃恒温水浴槽中加热30分钟，过滤。重复以上操作两次，以除去单糖、双糖以及低聚糖等干扰性成分。经过滤后的样品于100℃沸水中提取一段时间，过滤后取滤液加蒸馏水定容至500mL。灵芝2样品溶液：取灵芝3，0.5g于500mL烧杯中，加入15mL95％乙醇，于60℃恒温水浴槽中加热30分钟，过滤。重复以上操作两次，以除去单糖、双糖以及低聚糖等干扰性成分。经过滤后的样品于100℃沸水中提取一段时间，过滤后取滤液加蒸馏水定容至500mL。分光光度法测定多糖含量2.3.1标准曲线的绘制。精确称量充分干燥过的分析纯葡萄糖50mg，加水定容至500mL容量瓶中，得到0.1mg/mL葡萄糖标准溶液。取50mL洗净的容量瓶6只。分别用移液管准确加入葡萄糖标准溶液5mL、10mL、15mL、20mL、25mL、30mL，加入蒸馏水定容，即得到浓度分别为0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.03mg/mL、0.04mg/mL、0.05mg/mL、0.06mg/mL的葡萄糖标准溶液。测定时取1mL各浓度葡萄糖标准溶液加入到20mL具塞比色管中，迅速入5％苯酚溶液以及98％浓硫酸适量，摇匀后放置于室温下显色20min。另取lmL蒸馏水，同上加入苯酚溶液和浓硫酸，做空白参比溶液。在指定波长处测定吸光度值，绘制标准曲线，计算标准曲线方程和相关系数R。灵芝1多糖含量测定：取lmL灵芝1样品溶液加入到20mL具塞比色管中，采用与标准液显色相同方法依次加入苯酚溶液和浓硫酸，于特定波长处测定吸光度，将吸光度带入标准曲线方程，计算得出样品液浓度C。按下式计算出所取多糖含量，多糖含量(%)=CV/m，C为样品液浓度，V为样品液体积，m为取样的质量。灵芝2多糖含量测定：取lmL灵芝2样品溶液加入到20mL具塞比色管中，采用与标准液显色相同方法依次加入苯酚溶液和浓硫酸，于特定波长处测定吸光度，将吸光度带入标准曲线方程，计算得出样品液浓度C。按下式计算出所取多糖含量，多糖含量(%)=CV/m，C为样品液浓度，V为样品液体积，m为取样的质量。结果3.1最大吸收波长的确定取lmL0.05mg/mL葡萄糖标准溶液，加入苯酚溶液和浓硫酸后反应一段时间后。在450-520nm波长区间进行光谱扫描，确定其最大吸收波长，发现在488nm波长处，所得吸光度值最大，无其他杂峰，则最佳测定波长选用488nm。苯酚溶液用量的确定取相同浓度的葡萄糖标准液1mL于6支20mL具塞比色管中，分别加入0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL、1.4mL的5％苯酚溶液，再依次加入5mL98％浓硫酸，混合摇匀。放置于20℃温度下显色30分钟，在488nm波长处测定吸光度值。当加入苯酚溶液1.0mL时，吸光度值最大，加入苯酚溶液过多反而会引起吸光度降低，所以实验中5%苯酚溶液的最佳加入量应当为1mL。浓硫酸用量的确定取相同浓度的葡萄糖标准溶液lmL加入到五支编号的具塞比色管中，各加入5％苯酚溶液lmL，依次滴加浓硫酸4.0mL、4.5mL、5.0mL、5.5m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种灵芝的提取方法，其特征在于：取干燥的灵芝子实体，切碎，于‑25℃‑20℃下冷冻后，解冻，用乙醇溶液加热回流提取，滤过，滤渣备用，提取液减压回收乙醇，浓缩液加水，上大孔吸附树脂，加水洗脱，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，得醇提取液，备用；滤渣中加入氢氧化钾水溶液，文火加热至50‑60℃后，保温，加入活性炭，静置，过滤，滤液与上述醇提取液合并，浓缩，即得。

【技术特征摘要】
1.一种灵芝的提取方法，其特征在于：取干燥的灵芝子实体，切碎，于-25℃-20℃下冷冻后，解冻，用乙醇溶液加热回流提取，滤过，滤渣备用，提取液减压回收乙醇，浓缩液加水，上大孔吸附树脂，加水洗脱，再用乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，得醇提取液，备用；滤渣中加入氢氧化钾水溶液，文火加热至50-60℃后，保温，加入活性炭，静置，过滤，滤液与上述醇提取液合并，浓缩，即得。2.如权利要求1中所述的灵芝的提取方法，其特征在于：具体包括以下步骤：取干燥的灵芝子实体，切碎，于-25℃-20℃下冷冻10-12h，得A品；A品常温下解冻后，用10-12倍量的浓度为70-80%的乙醇溶液加热回流提取2-3次，每次1-2小时，滤过，滤渣备用，提取液减压回收乙醇，得浓缩液，即B品；B品加水至体积每毫升与药材量每克之比为1-3：3-1，上大孔吸附树脂，加水洗脱4-10倍柱体积，再用浓度为30-70%乙醇洗脱4-10倍柱体积，收集洗脱液，回收乙醇，得醇提取液，即C品；滤渣中加入15-25倍量的浓度为0.5-1%的氢氧化钾水溶液，文火加热至50-60℃后，保温20-30min，加入活性炭，静置3-5h后，过滤，收集滤液，...

【专利技术属性】
技术研发人员：龙泗成，
申请(专利权)人：贵州黔芝灵绿色农业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州,52