一种防治猪腹泻生物制剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种防治猪腹泻生物制剂及其制备方法；属于生物制剂领域。本发明专利技术防治猪腹泻生物制剂是将嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌分别依次经过活化，二级种子培养，发酵培养，离心浓缩和喷雾干燥处理后混合。本发明专利技术的防治猪腹泻生物制剂具有特异性强、活菌数高、绿色安全、无毒副作用等优点。防治猪腹泻生物制剂在有效防治仔猪腹泻，减少抗生素使用量的同时，还可提高仔猪头均日增重及饲料转化率。适于在规模化养殖场，尤其是绿色生态养猪小区推广应用，从而实现健康养殖，满足人们对绿色猪的需求。可大幅度推动我国规模化生猪养猪业的迅猛发展，对我国农民养殖户增收和农村经济发展具有重大意义。

Biological preparation for preventing and treating pig diarrhea and preparation method thereof

The invention discloses a biological preparation for preventing and curing pig diarrhea and a preparation method thereof, belonging to the field of biological preparation. The present invention is the prevention of porcine diarrhea biological preparation of Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus, Bacillus subtilis and Bacillus amyloliquefaciens respectively after activation, two seed culture, fermentation, centrifugation and spray drying after mixing. The biological preparation for preventing and controlling pig diarrhea has the advantages of strong specificity, high living bacteria number, green safety, no toxic side effect, etc.. The biological preparation for preventing and controlling pig diarrhea can effectively prevent the diarrhea of piglets and reduce the use of antibiotics, and simultaneously increase the daily average weight and feed conversion rate of piglets. The utility model is suitable for popularization and application in large-scale farms, especially green ecological pig raising areas, so as to realize healthy breeding and satisfy people's demand for green pigs. Can greatly promote the rapid development of large scale pig pig industry in our country, it has great significance for China's peasant farmers' income and rural economic development.

【技术实现步骤摘要】
一种防治猪腹泻生物制剂及其制备方法
本专利技术属于生物制剂领域；具体涉及一种防治猪腹泻生物制剂及其制备方法。
技术介绍
近年来，我国养猪业得到了迅速的发展，规模化和集约化猪场日益增多，生猪养殖数量增大的同时，诸多疾病引发危害不断受到人们的关注。仔猪腹泻是引起仔猪生长性能下降及死亡的重要病因之一，给养猪业造成了重大经济损失，目前，抗生素大量应用于临床防治仔猪腹泻，导致抗生素及药物残问题，造成了诸多食品安全隐患。此外，腹泻仔猪粪便中含有大量病原微生物，会造成土壤、水体等环境污染，导致一系列公共卫生安全问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种特异性强、活菌数高、绿色安全、无毒副作用的防治猪腹泻生物制剂及其制备方法。本专利技术的一种防治猪腹泻生物制剂是将嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酪酸梭菌菌株分别依次经过活化，二级种子培养，发酵培养，离心浓缩和喷雾干燥处理后混合制成的；具体是按下述步骤进行的：步骤a、将嗜酸乳杆菌活化，分别进行一级、二级液体培养用种子液制备，再将制备好的二级种子液分别接种于发酵罐，进行液体深层培养，待活菌数达1.0×109CFU/mL时，收集发酵液，再经离心浓缩、喷雾干燥，得到粉状制剂a；步骤b、植物乳杆菌活化分别进行一级、二级液体培养用种子液制备，再将制备好的二级种子液分别接种于发酵罐，进行液体深层培养，待活菌数达1.0×109CFU/mL时，收集发酵液，再经离心浓缩、喷雾干燥，得到粉状制剂b；步骤c、枯草芽孢杆菌活化，分别进行一级、二级液体培养用种子液制备，再将制备好的二级种子液分别接种于发酵罐，进行液体深层培养，待活菌数达1.0×109CFU/mL时，收集发酵液，再经离心浓缩、喷雾干燥，得到粉状制剂c；步骤d、解淀粉芽孢杆菌活化，分别进行一级、二级液体培养用种子液制备，再将制备好的二级种子液分别接种于发酵罐，进行液体深层培养，待活菌数达1.0×109CFU/mL时，收集发酵液，再经离心浓缩、喷雾干燥，得到粉状制剂d；步骤e、然后将粉状制剂a、粉状制剂b、粉状制剂c、粉状制剂d混合；即得到防治猪腹泻生物制剂。步骤a所述嗜酸乳杆菌二级生产种子制备：将嗜酸乳杆菌SY1菌种接种MRS液体培养基中，置于35-37℃厌氧培养36-48h，完成活化，然后划线接种于MRSA平板上，选取5个以上典型菌落，接种于MRSA斜面若干支，置于35-37℃培养36-48h，作为一级种子，取一级种子接种于MRS液体培养基中，置于35-37℃培养36-48h，即为二级种子。步骤b所述植物乳酸杆菌二级生产种子制备：将植物乳酸杆菌SY4菌种接种MRS液体培养基中，置于37℃厌氧培养36-48h，完成活化，然后划线接种于MRSA平板上，选取5个以上典型菌落，接种于MRSA斜面若干支，置于35-37℃培养36-48h，作为一级种子，取一级种子接种于MRS液体培养基中，置于35-37℃培养36-48h，即为二级种子。步骤c所述枯草芽孢杆菌二级生产种子制备：将枯草芽孢杆菌SY6菌种接种营养肉汤中，置于35-37℃培养24-36h，完成活化，然后划线接种于营养琼脂平板上，选取5个以上典型菌落，接种于营养琼脂斜面若干支，置于35-37℃培养24-36h，作为一级种子，取一级种子接种于营养肉汤中，置于35-37℃培养24-36h，即为二级种子。步骤d所述解淀粉芽孢杆菌二级生产种子制备：将解淀粉芽孢杆菌SSYB菌种接种营养肉汤中，置于35-37℃培养24-36h，完成活化，然后划线接种于营养琼脂平板上，选取5个以上典型菌落，接种于营养琼脂斜面若干支，置于35-37℃培养24-36h，作为一级种子，取一级种子接种于营养肉汤中，置于35-37℃培养24-36h，即为二级种子。步骤a所述嗜酸乳杆菌的发酵是：将嗜酸乳杆菌二级种子接种到发酵罐中，进行液体深层培养，液体培养基为MRS，接种量为2％～5％，装液量70％-80％，35-37℃和pH值6.0～7.0条件下静置培养。步骤b所述植物乳杆菌的发酵是：将植物乳杆菌二级种子接种到发酵罐中，进行液体深层培养，液体培养基为MRS，接种量为2％～5％，装液量70％-80％，35-37℃和pH值6.0～7.0条件下静置培养。步骤c所述枯草芽孢杆菌的发酵是：将枯草芽孢杆菌二级种子接种到发酵罐中，进行液体深层培养，液体培养基为营养肉汤，接种量为1％～3％，装液量60％-80％，在120～190rpm/min、33～35℃和pH值6.0～7.0条件下培养。步骤d所述解淀粉芽孢杆菌的发酵是：将解淀粉芽孢杆菌二级种子接种到发酵罐中，进行液体深层培养，液体培养基为营养肉汤，接种量为1％～3％，装液量60％-80％，在120～190rpm/min、33～35℃和pH值6.0～7.0条件下培养。步骤a所述喷雾是:将嗜酸乳杆菌培养液体100mL，5000-8000rpm离心10-15min，100mL无菌生理盐水重悬菌泥，脱脂乳保护剂添加量15-18w/v％，制备料液。设定喷雾干燥机各项喷雾干燥条件参数：出口温度70-80℃、入口温度120-140℃、入料速度1000-1200mL/h，进行喷雾干燥。步骤b所述喷雾是:将植物乳杆菌培养液体100mL，5000-8000rpm离心10-15min，100mL无菌生理盐水重悬菌泥，脱脂乳保护剂添加量15-18w/v％，制备料液。设定喷雾干燥机各项喷雾干燥条件参数：出口温度70-80℃、入口温度120-140℃、入料速度1000-1200mL/h，进行喷雾干燥。步骤c所述喷雾是:将枯草芽孢杆菌培养液体100mL，5000-8000rpm离心10-15min，100mL无菌生理盐水重悬菌泥，脱脂乳保护剂添加量17-20％w/v％，制备料液。设定喷雾干燥机各项喷雾干燥条件参数：出口温度80-85℃、入口温度140-150℃、入料速度1300-1500mL/h，进行喷雾干燥。步骤d所述喷雾是:将解淀粉芽孢杆菌培养液体100mL，5000-8000rpm离心10-15min，100mL无菌生理盐水重悬菌泥，脱脂乳保护剂添加量17-20％w/v％，制备料液。设定喷雾干燥机各项喷雾干燥条件参数：出口温度80-85℃、入口温度140-150℃、入料速度1300-1500mL/h，进行喷雾干燥。防治猪腹泻生物制剂的预防剂量为1.0×108CFU/d/头，治疗剂量为1.0×109CFU/d/头一日3次，一般2周一疗程。本专利技术的防治猪腹泻生物制剂具有特异性强、活菌数高、绿色安全、无毒副作用等优点。临床应用证实，防治猪腹泻生物制剂在有效防治仔猪腹泻，减少抗生素使用量的同时，还可提高仔猪头均日增重及饲料转化率。适于在规模化养殖场，尤其是绿色生态养猪小区推广应用，从而实现健康养殖，满足人们对绿色猪的需求。本专利技术产品提高仔猪日增重，降低料重比，从而提高生长性能5-8％，此外，降低仔猪腹泻发病率10-15％，降低仔猪死亡率1-2％，提高了生猪养殖经济效益，按平均每头猪可增加创收20元计算，推广应用2万头仔猪，可提高经济效益20元×20000头＝40万元。本专利技术所述的生物制剂可减少临床上治疗仔猪腹泻抗生素的使用量。在一定程度上降低抗生素残留问题对人类生产生活的影响，满足人们对绿色猪的需求，可大幅度本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种防治猪腹泻生物制剂，其特征在于所述防治猪腹泻生物制剂是将嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌分别依次经过活化，二级种子培养，发酵培养，离心浓缩和喷雾干燥处理后混合制成的。

【技术特征摘要】
1.一种防治猪腹泻生物制剂，其特征在于所述防治猪腹泻生物制剂是将嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌分别依次经过活化，二级种子培养，发酵培养，离心浓缩和喷雾干燥处理后混合制成的。2.根据权利要求1所述一种防治猪腹泻生物制剂，其特征在于所述嗜酸乳杆菌为SY1-嗜酸乳杆菌。3.根据权利要求1所述一种防治猪腹泻生物制剂，其特征在于所述植物乳杆菌为SY4-植物乳杆菌。4.根据权利要求1所述一种防治猪腹泻生物制剂，其特征在于所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌SY6。5.根据权利要求1所述一种防治猪腹泻生物制剂，其特征在于所述解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌SSYB菌株。6.如权利要求1所述的一种防治猪腹泻生物制剂的制备方法，其特征在于该腹泻生物制剂是按下述步骤进行的：步骤a、将嗜酸乳杆菌活化，分别进行一级、二级液体培养用种子液制备，再将制备好的二级种子液分别接种于发酵罐，进行液体深层培养，待活菌数达1.0×109CFU/mL时，收集发酵液，再经离心浓缩、喷雾干燥，得到粉状制剂a；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李阳，王爽，刘宇，张鹏宇，陈亮，刘海瑞，刘洪贵，石跃，李丹，刘梦迪，兰世捷，苗艳，吴宪，金振华，
申请(专利权)人：黑龙江省兽医科学研究所，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23