禽白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法，通过测定混合感染病毒的TCID50进行终点稀释，采用稀释后的病毒液接种DF‑1细胞，收集上清与细胞培养物并用分型鉴定引物与IFA的对其进行鉴定，从而获得单一亚型的禽白血病病毒。该法对实验条件要求简单，具有很高的实际应用价值。实验结果证明，本发明专利技术可以成功的对不同亚型混合感染的ALV进行纯化，可为禽白血病病毒分子生物学特征及其致病性的研究提供技术支持。

【技术实现步骤摘要】
禽白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法
本专利技术属于病毒纯化
，尤其涉及一种禽白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法。
技术介绍
禽白血病病毒(avianleukosisvirus，ALV)是反转录病毒科、白血病/肉瘤病毒群。1868年Roloff报道了一例“淋巴肉瘤”，这是第一篇关于禽白血病的报道。随后，ALV在各地均有相关报道，宿主范围逐渐扩大，从肉鸡传播到蛋鸡以及地方品种鸡，临床肿瘤表现也愈专利技术显，给养禽业造成了较大的经济损失。ALV分为A、B、C、D、E、J、K共7个亚群，其中A、B、J亚群在临床易分离到，K亚群为近期发现的新亚群。ALV可引起机体免疫抑制，降低疫苗免疫的成功率，严重影响生产性能。近年来，ALV混合感染有增多趋势，大多存在两个亚群甚至三个亚群的混合感染。这就需要对禽白血病病毒的流行趋势和遗传变化机制进行研究，而获得单一亚型病毒是研究的基础与前提。临床中，鸡群会出现不同亚群的ALV混合感染的情况，因此病毒的纯化是亟待解决的问题。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种禽白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法，以便于从禽白血病病毒混合感染中获本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种禽白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法，其特征在于通过测定混合感染病毒的TCID50进行终点稀释，采用稀释后的病毒液接种DF‑1细胞，收集上清与细胞培养物并用分型鉴定引物与IFA的对其进行鉴定，从而获得单一亚型的禽白血病病毒。

【技术特征摘要】
1.一种禽白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法，其特征在于通过测定混合感染病毒的TCID50进行终点稀释，采用稀释后的病毒液接种DF-1细胞，收集上清与细胞培养物并用分型鉴定引物与IFA的对其进行鉴定，从而获得单一亚型的禽白血病病毒。2.根据权利要求1所述的禽白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法，其特征在于：所述分型鉴定引物包括ALV-A引物对、ALV-B引物对、ALV-J引物对，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.6的碱基序列。3.根据权利要求2所述的禽白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法，其特征在于按以下步骤操作进行：(1)获得混合感染病毒在DF-1增殖3代，第3代通过接种DF-1细胞，随后通过检测ALV-p27抗原并按照Reed-Muench方法测得病毒TCID50；(...

【专利技术属性】
技术研发人员：王培坤，林璐璐，杨永立，李海娟，磨美兰，韦天超，黄腾，韦平，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：广西,45