The invention discloses a cell separation integrated device and dyeing production of circulating tumor cells capture method, the chip comprises a substrate and extends in the substrate channel communication ends respectively form a sample entrance channel and sample outlet, arranged in row n micro column array, n = 2, each row of micro column array includes a plurality of spaced micro column, micro column is formed between adjacent capture gap and meet: (a), from the sample to the sample entrance exit direction, clearance clearance, the capture capture row x micropillar array x+1 rows of micro column array, 1 < x < n; (b), capture the n row gap micro column array is smaller than the outer diameter of circulating tumor cells. The method of the invention has the advantages of small sample consumption, high resolution precision and sensitivity, easy integration and miniaturization, etc.. In addition, the capture of circulating tumor cells does not depend on the expression of EpCAM antibodies based on the characteristics of circulating tumor cells with different sizes of blood cells.
【技术实现步骤摘要】
细胞分离制片染色一体装置和循环肿瘤细胞捕获方法
本申请属于体外诊断和微流控
,特别是涉及一种细胞分离制片染色一体装置和循环肿瘤细胞捕获方法。
技术介绍
循环肿瘤细胞(circulatingtumorcells,CTCs)是指从原发肿瘤扩散进入外周循环血液系统中的肿瘤细胞,它的出现标志着肿瘤细胞已经开始从病灶组织向四周扩散,从而可能导致更多器官组织产生病变。循环肿瘤细胞可在肿瘤发生的早期出现,且研究表明约90%的癌症死亡案例与CTCs扩散有关,因此,CTCs检测在重大疾病的早期预防、治疗效果评估、药物敏感性测试及肿瘤复发监测等医学应用方面具有十分重要的意义。循环肿瘤细胞检测的最大难题在于其数量极少:通常在临床上,人们研究的对象是一个非齐性总体,其中包含了大量的细胞信息,而CTCs对人体正常血细胞的比例仅约为1:109,或在1mL血液中仅有1~100个CTCs,因此在检测前必须对其进行分选富集,以去除血液中的大部分红细胞和白细胞。理想的CTCs分选应能达到以下三点要求:首先要能将尽量多的非目标细胞分离出去,其次要在特定的出口收集到尽量多的目标细胞;最后要考虑到CTCs数量稀少导致需要处理的样本量较大以及细胞活性等因素,要求能在短时间内处理大量的样品。传统的细胞分选多在宏观尺度下进行,如离心分选、化学溶解、基于荧光或磁珠技术的抗体标记分选等,这些方法虽然成熟可靠,但系统复杂、操作繁琐、需要样品量大,在细胞转移、容器更换及样品化学处理等环节极易造成目标细胞的损失,难以满足上述三点分选要求。目前唯一通过美国食品药品监督管理局认证的用于血液中CTCs分选、计数的 ...
【技术保护点】
一种细胞分离制片染色一体装置,其特征在于,包括基材以及沿第一方向延伸于基材内的沟道,所述沟道位于第一方向的两端分别形成有样品入口和样品出口,所述沟道内并列设置有n排微柱阵列,n≥2,每排所述微柱阵列沿第二方向延伸,所述第二方向垂直于所述第一方向,每排所述微柱阵列分别包括间隔设置的多个微柱,相邻所述微柱之间形成有捕捉间隙,并满足:(a)、自样品入口至样品出口方向,第x排微柱阵列的捕捉间隙>第x+1排微柱阵列的捕捉间隙,1≤x<n;(b)、第n排微柱阵列的捕捉间隙小于循环肿瘤细胞的外径。
【技术特征摘要】
1.一种细胞分离制片染色一体装置,其特征在于,包括基材以及沿第一方向延伸于基材内的沟道,所述沟道位于第一方向的两端分别形成有样品入口和样品出口,所述沟道内并列设置有n排微柱阵列,n≥2,每排所述微柱阵列沿第二方向延伸,所述第二方向垂直于所述第一方向,每排所述微柱阵列分别包括间隔设置的多个微柱,相邻所述微柱之间形成有捕捉间隙,并满足:(a)、自样品入口至样品出口方向,第x排微柱阵列的捕捉间隙>第x+1排微柱阵列的捕捉间隙,1≤x<n;(b)、第n排微柱阵列的捕捉间隙小于循环肿瘤细胞的外径。2.根据权利要求1所述的细胞分离制片染色一体装置,其特征在于:所述基材包括上下叠加设置的聚二甲基硅氧烷和标准载玻片,所述沟道形成于聚二甲基硅氧烷和标准载玻片之间。3.基于权利要求1或2所述的细胞分离制片染色一体装置的循环肿瘤细胞捕获方法,其特征在于,包括步骤:(1)、采用红细胞裂解液裂解肿瘤病人血样中的红细胞,离心吸取上清液,用细胞缓冲液重悬剩余细胞;(2)、将获得的细胞悬液从样品入口通入微流控芯片中,完成循环肿瘤细胞的捕获。4.根据权利要求3所述的循环肿瘤细胞捕获方法,其特征在于,步骤(1)...
【专利技术属性】
技术研发人员:冯澄宇,
申请(专利权)人:苏州汶颢微流控技术股份有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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