A treatment of alcoholic liver disease disclosed the targeted antibody complement capsule preparation and preparation method and application thereof. The preparation method is to contain antibodies to complement protein gene cloning in China hamster cells (CHO, Chinese Hamster Ovary Cell) expression vector pEE14.1 in high expression of target protein and then transfected into CHO cells. After subculture, screened the expression of complement antibody protein in high yield cell lines by rotary cell culture technology to expand production and purification, antibody complement protein CR2 obtained Crry, then the complement antibody protein into complement antibody liposome microcapsule, finally by membrane filtration, sterilization and packing. That is for the treatment of alcoholic liver disease targeted complement antibody capsules, for patients with alcoholic liver disease taking, complement antibody microcapsules complement antibody dose: 2.0g / day, two times. Use. The invention has the advantages of strong targeting, high efficiency, safety and no influence on the host's systemic immunity function.
【技术实现步骤摘要】
一种治疗酒精性肝病的靶向性补体抗体微囊制剂及其制备方法与应用
本专利技术涉及治疗酒精性肝病新药的开发,特别是一种治疗酒精性肝病的靶向性补体抗体微囊制剂及其制备方法与应用。
技术介绍
酒精性肝病(Alcohol-inducedliverdisease,ALD)是由于长期大量饮酒所导致的肝脏疾病,包括脂肪肝、酒精性肝炎、肝纤维化和肝硬化等。酒精中毒是仅次于肝炎病毒导致肝损害的第二大病因。近年来ALD在中国的发病率呈上升趋势,已成为严重威胁人类健康的多发病和常见病。乙醇80%~90%在肝脏代谢,经过乙醇脱氢酶的催化,氧化为乙醛,再经乙醛脱氢酶催化转成乙酸,最终形成二氧化碳。在乙醇氧化过程中脱下大量的氢离子与辅酶Ⅰ(NicotinamideAdenineDinucleotide,NAD)结合,NAD被还原成为还原型辅酶Ⅰ(NADH),即NAD++H++2e-=NADH,使NADH/NAD上升,从而使细胞的氧化、还原反应发生变化,造成依赖于NADH/NAD的物质代谢发生障碍,而成为代谢紊乱和致病的基础。一方面乙醇促进体内活性氧簇(reactiveoxygenspecies,ROS)与活性氮自由基(reactivenitrogenspecies,RNS)产生过多,超出机体抗氧化物的清除能力,另一方面受多因素影响体内还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)等抗氧化成分减少,最终导致氧化与抗氧化系统的动态平衡失衡,从而促发氧化应激。该过程生成的自由基可引起生物膜脂质过氧化、细胞内蛋白酶变性、DNA氧 ...
【技术保护点】
一种治疗酒精性肝病的靶向性补体抗体胶囊制剂,其特征是:将含有补体抗体蛋白基因克隆到能够在中国仓鼠细胞(CHO, Chinese Hamster Ovary Cell)中高表达目的蛋白的表达载体pEE14.1中,然后转染至CHO细胞中,经传代培养、筛选出高产量的补体抗体蛋白表达细胞系,经细胞旋转培养技术扩大生产纯化,得到补体抗体蛋白CR2‑Crry,再将补体抗体蛋白制成补体抗体脂质体微囊,最后经膜过滤、除菌、分装,即为可治疗酒精性肝病的靶向性补体抗体胶囊制剂。
【技术特征摘要】
1.一种治疗酒精性肝病的靶向性补体抗体胶囊制剂,其特征是:将含有补体抗体蛋白基因克隆到能够在中国仓鼠细胞(CHO,ChineseHamsterOvaryCell)中高表达目的蛋白的表达载体pEE14.1中,然后转染至CHO细胞中,经传代培养、筛选出高产量的补体抗体蛋白表达细胞系,经细胞旋转培养技术扩大生产纯化,得到补体抗体蛋白CR2-Crry,再将补体抗体蛋白制成补体抗体脂质体微囊,最后经膜过滤、除菌、分装,即为可治疗酒精性肝病的靶向性补体抗体胶囊制剂。2.一种治疗酒精性肝病的靶向性补体抗体制剂的制备方法,其特征是:包括如下步骤:(1)补体抗体蛋白基因的表达载体pEE14.1构建:将补体抗体蛋白基因序列克隆扩张后通过HindIII和EcoRI这两个核酸内切酶插入的表达载体pEE14.1中,经测序验证后抽提纯化,备用;(2)高产量的补体抗体蛋白表达细胞系构建:将上一步骤中构建好的补体抗体蛋白基因的表达载体转染至CHO细胞中,经过细胞传代培养、筛选后鉴定补体抗体蛋白的表达量,挑选产量比较高的细胞系用液氮冷冻保存,备用;(3)补体抗体蛋白扩大生产、纯化...
【专利技术属性】
技术研发人员:何松青,袁观斗,徐庆,唐博,钟伏弟,
申请(专利权)人:广西医科大学,
类型:发明
国别省市:广西,45
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