一种促进白腐真菌挂膜的培养基制造技术

技术编号:15876398 阅读:157 留言:0更新日期:2017-07-25 14:15
本发明专利技术公开了一种促进白腐真菌挂膜的培养基,属于废水生物处理领域。本发明专利技术所述培养基中:葡萄糖8~12 g/L,红薯淀粉8‑15 g/L,维生素0.008‑0.010 g/L,0.5~1.2 mL/L吐温80,65~75 mL/L微量元素。本发明专利技术根据白腐真菌的固定化培养基,使得白腐真菌菌丝更好附着在载体上生长。本发明专利技术所述培养基可以使白腐真菌菌丝均匀的附着在载体上,菌丝向外延伸,完成挂膜,避免了菌丝在载体上造成不均匀挂膜。

Medium for promoting white rot fungus hanging film

The invention discloses a culture medium for promoting white rot fungus hanging film, belonging to the biological treatment field of wastewater. The invention of the medium: glucose 8~12 g/L, 8 g/L 15 sweet potato starch, vitamin 0.008 0.010 g/L, 0.5~1.2 mL/L Twain 80, the trace elements of 65~75 mL/L. According to the immobilized medium of white rot fungi, the white rot fungus hypha is better attached to the carrier. The culture medium of the invention can make the white rot fungus hypha adhere uniformly to the carrier, and the mycelium extends outwards to complete the hanging film, thus avoiding the uneven hanging film of the mycelium on the carrier.

【技术实现步骤摘要】
一种促进白腐真菌挂膜的培养基
本专利技术公开了一种促进白腐真菌挂膜的培养基,属于废水生物处理领域。
技术介绍
在微生物的培养中人们常常采用固定化的培养方式,这是因为固定化培养能够促进微生物的生长和代谢。白腐真菌的固定化培养有利于其活性的维持。Saucedo等人(1988)在对Gibberellafujikuroi菌丝的固定化研究中发现:固定化培养可以提高真菌生长的稳定性,延长其活性维持的时间;Bottcher等(1988)和Komel等(1985)的固定化真菌研究得出类似的结果。固定的白腐真菌还可以促进其对代谢酶等的合成,Rogalski等(2006)将Nematolomafrowardii固定于聚氨酯泡沫载体(polyurethanefoam)上获得2304nkat/l的MnP,比自由悬浮培养的MnP高出1.4倍。Nakamura等(1999)的研究结果表明:采用聚氨酯泡沫载体的固定化培养获得高产的木质素降解酶(LiP:300U/mL,MnP:250U/mL,andLac:50U/mL)远远高于非固定化培养的酶活(LiP:22U/mL,MnP:8U/mL,andLac:1.8U/mL)。但是,固定化的微生物常常遇到一些问题,如:生物膜脱落的问题,即随着生物膜的加厚,生物膜内部获得的营养物质和氧气逐步减少,造成生物膜的脱落。为了解决此问题,实验室前期专利技术了一种新型载体——脉管载体和生物转盘装置(专利号:ZL201420249212.9)以期解决生物膜脱落的问题。但是脉管载体的挂膜难以实现,常规的挂膜常常出现菌丝在载体上造成不均匀挂膜。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决脉管载体的挂膜问题,提供一种促进白腐真菌挂膜的培养基,所述培养基的成分及含量为:葡萄糖8~12g/L,红薯淀粉8-15g/L,维生素0.008-0.010g/L,吐温800.5~1.2mL/L,微量元素65~75mL/L,去离子水。优选的,使用时先将红薯淀粉溶解在80~100℃的水中,避免淀粉糊化。本专利技术所述的培养基用于脉管载体的挂膜。本专利技术的有益效果为:与PDA培养基相比,白腐真菌的PDA培养基使菌丝在载体上成片状式生长,菌丝生长不够均匀,而本专利技术的生物膜是向外延伸,实现了脉管载体的均匀挂膜。附图说明图1为两种培养基的培养结果示意图。图2为单一碳源培养基的培养结果示意图。具体实施方式下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步详细说明,但本专利技术的保护范围并不限于所述内容。本专利技术实施例1~3中挂膜均在大试管(外直径:3cm;长:20cm)中完成,在实际操作过程中,试管是根据载体选择,也可以选择其他规格的试管进行实验。实施例1(1)培养基的配制固定化培养白腐真菌的培养基,由葡萄糖10g/L,红薯淀粉15g/L,维生素0.008g/L,1mL/L吐温80,70mL/L微量元素和去离子水组成。首先将15g红薯淀粉放到1L的锥形瓶中,加入500mL的去离子水,放到电炉上先进行热溶,在此过程中进行搅拌,使得淀粉尽量避免糊化;等待其冷却到室温,加入葡萄糖10g,维生素0.008g,1mL的吐温80,70mL的微量元素,加入去离子水定容至1L。(2)脉管载体的挂膜挂膜是在大试管(外直径:3cm;长:20cm)中完成,当培养基中的淀粉为红薯淀粉时,在大试管中加入上述液体培养基70mL,并投加一个脉管载体,在121℃的条件下灭菌30min后接种黄孢原毛平革菌(P.chrysosporium),每毫升接种104个孢子,然后放置于摇床上,在37℃,120rpm的条件下,培养3-4天后进行观察,载体上的菌丝向外延伸,载体自上而下菌丝长势均匀,如图1(b)所示。使用PDA培养基培养4天的结果如图1(a)所示由图可以看出菌丝在载体上成片状式生长,菌丝生长不够均匀;使用单一碳源(淀粉或葡萄糖)培养基的培养结果如图2所示,图2(a)为淀粉培养基培养4天结果,图2(b)为葡萄糖培养基培养4天结果,由图可以看出使用单一碳源(淀粉或葡萄糖)培养基,菌丝生长不够均匀,且较为稀少。脉管载体的挂膜(对比例)挂膜是在大试管(外直径:3cm;长:20cm)中完成,当培养基中的淀粉换为玉米淀粉时,在大试管中加入此液体培养基70mL,并投加一个脉管载体,在121℃的条件下灭菌30min后接种黄孢原毛平革菌(P.chrysosporium),每毫升接种104个孢子,然后放置于摇床上,在37℃,120rpm的条件下。培养3-4天后进行观察,载体上的菌丝长势不均匀,且菌丝稀少。脉管载体的挂膜(对比例)挂膜是在大试管(外直径:3cm;长:20cm)中完成,当培养基中的淀粉换为小麦淀粉时,在大试管中加入PDA液体培养基70mL,并投加一个脉管载体,在121℃的条件下灭菌30min后接种黄孢原毛平革菌(P.chrysosporium),每毫升接种104个孢子,然后放置于摇床上,在37℃,120rpm的条件下。培养3-4天后进行观察,载体上的菌丝长势不均匀,且菌丝稀少。脉管载体的挂膜(对比例)挂膜是在大试管(外直径:3cm;长:20cm)中完成,当培养基中无淀粉时,在大试管中加入PDA液体培养基70mL,并投加一个脉管载体,在121℃的条件下灭菌30min后接种黄孢原毛平革菌(P.chrysosporium),每毫升接种104个孢子,然后放置于摇床上,在37℃,120rpm的条件下,培养3-4天后进行观察,载体上的菌丝成片状生长,长势不均匀。实施例2(1)培养基的配制固定化培养白腐真菌的培养基,由葡萄糖8g/L,红薯淀粉10g/L,维生素0.009g/L,0.5mL/L吐温80,65mL/L微量元素和去离子水组成。首先将10g红薯淀粉放到1L的锥形瓶中,加入500mL的去离子水,放到电炉上先进行热溶,在此过程中进行搅拌,使得淀粉尽量避免糊化;等待其冷却到室温,加入葡萄糖8g,维生素0.009g,0.5mL的吐温80,65mL的微量元素,加入去离子水定容至1L。(2)脉管载体的挂膜挂膜是在大试管(外直径:3cm;长:20cm)中完成,当培养基中的淀粉为红薯淀粉时,在大试管中加入上述液体培养基70mL,并投加一个脉管载体,在121℃的条件下灭菌30min后接种黄孢原毛平革菌(P.chrysosporium),每毫升接种104个孢子,然后放置于摇床上,在37℃,120rpm的条件下,培养3-4天后进行观察,载体上的菌丝向外延伸,载体自上而下菌丝长势均匀。实施例3(1)培养基的配制固定化培养白腐真菌的培养基,由葡萄糖12g/L,红薯淀粉8g/L,维生素0.01g/L,1.2mL/L吐温80,75mL/L微量元素和去离子水组成。首先将12g红薯淀粉放到1L的锥形瓶中,加入500mL的去离子水,放到电炉上先进行热溶,在此过程中进行搅拌,使得淀粉尽量避免糊化;等待其冷却到室温,加入葡萄糖12g,维生素0.01g,1.2mL的吐温80,75mL的微量元素,加入去离子水定容至1L。(2)脉管载体的挂膜挂膜是在大试管(外直径:3cm;长:20cm)中完成,当培养基中的淀粉为红薯淀粉时,在大试管中加入上述液体培养基70mL,并投加一个脉管载体,在121℃的条件下灭菌30min后接种黄孢原毛平革菌(P.chrysospor本文档来自技高网...
一种促进白腐真菌挂膜的培养基

【技术保护点】
一种促进白腐真菌挂膜的培养基,其特征在于:所述培养基的成分及含量为:葡萄糖8~12 g/L,红薯淀粉8‑15 g/L,维生素0.008 ‑0.010 g/L,吐温80 0.5~1.2 mL/L,微量元素65~75 mL/L,去离子水。

【技术特征摘要】
1.一种促进白腐真菌挂膜的培养基,其特征在于:所述培养基的成分及含量为:葡萄糖8~12g/L,红薯淀粉8-15g/L,维生素0.008-0.010g/L,吐温800.5~1.2mL/L,微量元素65~75mL/L,去离...

【专利技术属性】
技术研发人员:周成郑宇雷张明郭仕禹杨道丽
申请(专利权)人:昆明理工大学
类型:发明
国别省市:云南,53

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