microRNA分子表达谱用于预测非小细胞肺癌脑转移风险的用途制造技术

本发明专利技术涉及microRNA分子表达谱用于预测非小细胞肺癌脑转移风险的用途。具体地，本发明专利技术涉及一种或多种特异地检测microRNA分子表达谱的引物和/或探针在制备用于预测非小细胞肺癌脑转移风险的试剂中的用途，其中所述microRNA分子表达谱包含选自microRNA-193a-5p、microRNA-210、microRNA-214、microRNA-423-3p、microRNA-423-5p和microRNA-4270中的一个或多个。

Use of microRNA molecular profiling for prediction of brain metastasis risk in non-small cell lung cancer

The present invention relates to the use of microRNA molecular expression profiles for predicting brain metastasis risk in non-small cell lung cancer. Specifically, the present invention relates to specific detection of microRNA molecules expression primers and / or probe in preparation for predicting use of agents for brain metastasis of non-small cell lung cancer risk in one or more of the expression of the microRNA molecule spectrum contains microRNA-210, selected from microRNA-193a-5p, microRNA-214, microRNA-423-3p, microRNA-423-5p and microRNA-4270 in a one or more.

【技术实现步骤摘要】
microRNA分子表达谱用于预测非小细胞肺癌脑转移风险的用途
本专利技术涉及microRNA分子作为分子标记物预后非小细胞肺癌中的用途，具体地，本专利技术涉及microRNA分子作为分子标记物用于预测非小细胞肺癌脑转移风险的用途，其中所述microRNA分子选自microRNA-193a-5p、microRNA-210、microRNA-214、microRNA-423-3p、microRNA-423-5p和microRNA-4270中的一个或多个。
技术介绍
利用分子生物学技术，能够有效地通过分子水平的检测来判断恶性肿瘤患者脑转移的危险性，进而为个体化治疗这些疾病提供便利。世界范围内，肺癌是癌症死亡的首要因素。非小细胞肺癌约占全部肺癌的80％，约25％的非小细胞肺癌患者会发生脑转移。局部晚期非小细胞肺癌约占非小细胞肺癌的40％，并且脑转移是局部晚期非小细胞肺癌综合治疗后最常见的失败之一。早期非小细胞肺癌患者脑转移的风险为10％。然而，局部晚期非小细胞肺癌脑转移的风险要高得多，约30-50％。脑转移严重危害患者的生存和生活质量。手术和放射技术的进步提高了局部晚期非小细胞肺癌的局部控制。系统化疗降低了颅外转移的风险。综合治疗显著延长了生存。近来的研究报道：局部晚期非小细胞肺癌综合治疗后的中位生存为20-43月，3年生存为34-63％。尽管如此，血脑屏障的存在致使化疗对脑转移的作用有限，从而使脑的治疗相对不足。脑转移风险随着生存的提高而上升。研究显示：局部晚期非小细胞肺癌患者的生存和脑转移率呈正相关，脑转移对生存的危害逐渐上升。随着局部和颅外远处控制的改善，降低脑转移风险变得越来越重要。预防性脑照射能够改善小细胞肺癌患者的生存。然而，随机分组研究显示：尽管预防性脑照射降低了非小细胞肺癌的脑转移率，但是不能改善其生存。局部和颅外进展导致的死亡可能掩盖了预防性脑照射带来的可见获益。在综合治疗的现代，RTOG0214的结果又一次提示并非所有的局部晚期非小细胞肺癌患者应该接受预防性脑照射，这促使我们寻找脑转移的高危因素，以辨别最可能获益于预防性脑照射的脑转移高危亚组。MicroRNA是长约19-22个核苷酸的小片段单链非编码RNA。它通过有缺陷的碱基配对绑定其靶基因的3’非翻译区的互补序列来控制基因表达，从而使靶基因在转录或者翻译水平表达下调。近来microRNA成为从生长发育到癌症等很多病理生理过程的重要和革命性的保守调节因素。在不同的恶性肿瘤中，同一microRNA的作用可能不同。一个microRNA可以有很多属于不同通路的靶基因，而一个基因可以被几个microRNA调控。科学家发展技术来识别与肿瘤分期和患者预后相关的特异的基因表达标记，以改善预后和治疗。人们使用全面转录研究来识别以基因表达为基础的预后标识，但是，目前为止无一能应用于临床。与经典的mRNA表达谱相比，microRNA肿瘤表达谱似乎能够更准确地确定肿瘤亚型的分类。越来越多的证据支持实体肿瘤有特异的microRNA标记。与此同时，人们发现越来越多的microRNA的靶基因在肺癌发生中起重要作用，例如let-7、miR-34家族和miR-17-92簇。目前，科学家对microRNA的靶基因的识别仍然有限。在分子框架中，成熟microRNA带电后成为microRNA诱导的沉默复合体(miRISC)。该复合体含有Argonaute家族(一类庞大的蛋白质家族)，与通常位于靶基因3’端非翻译区的互补位点反应。目前的模型认为microRNA和其靶基因的反应起源于位于microRNA的5’端的一段被称为“种子序列”的6至8个核苷酸短片段。MicroRNA诱导的沉默复合体能够将靶基因再配置成特别间隔，在其中处理翻译阻滞和mRNA衰变。许多研究证实了microRNA诱导的mRNA失稳。联合计算预测，mRNA表达谱的测量代表了识别功能microRNA-靶关系的有效方法。在非小细胞肺癌中，许多不同的microRNA调节异常，可能有致癌或抑癌作用，并预测预后。识别能够预测肺癌患者预后的microRNA是一项重要发现，这表明microRNA可能在肿瘤进展中起重要作用。现行的临床病理分期在预测患者脑转移上有其局限性。具有相似临床病理特点或者相同分期的肺癌患者的脑转移预后可能明显不同。分子标记物可以帮助医生鉴别高危患者，以便给予患者个体化治疗，从而改善生存。恶性肿瘤转移的自然进程包括：肿瘤细胞从原发灶脱落、对趋化因子的应答、侵入并降解胞外基质、血管再生、最终在靶器官内成功生长。尽管近年来随着分子生物学技术的进展，更加深入了解恶性肿瘤转移机制成为可能，但与其他器官转移相比，我们对介导肺癌脑转移的分子机制还不十分清楚，这主要因为脑组织具有一些不同于其他组织器官的特性，包括：存在血脑屏障、自我血流调节、缺乏淋巴引流及受损神经元无法再生等。转移至脑的肿瘤细胞必须先黏附至微血管内皮细胞，穿过血脑屏障，进入脑实质，生成血管。肺癌，特别是腺癌，是脑转移的主要来源，部分原因是肺癌细胞很容易通过由肺至脑的动脉循环到达脑。脑转移是肺腺癌治疗失败的重要原因。目前仅有3项研究涉及到非小细胞肺癌脑转移的microRNA表达差异，然而，这些研究的样本量太少，并且缺乏完整的机制研究。目前为止，没有较成熟的分子标记物可以或预期可能应用于临床来预测非小细胞肺癌脑转移高危亚群。
技术实现思路
我们的前期研究聚焦于217名完全切除术后病理ⅢA-N2期非小细胞肺癌患者，评价该组人群的脑转移的临床危险因素。在多因素分析中，非鳞状细胞癌(RR:4.13,95％CI:1.86—9.19和P＝0.001)和淋巴结比率≥30％(RR:3.33,95％CI:1.79—6.18和P＝0.000)与脑转移风险升高显著相关。腺鳞癌、腺癌、大细胞癌和鳞状细胞癌的脑转移率分别为41.7％(5/12)、35.7％(40/112)、16.7(1/16)和8.0％(7/87)。所以，我们选择了其中腺癌/腺鳞癌的患者的福尔马林固定石蜡包埋的手术肿瘤标本，采用高通量microRNA表达谱芯片技术研究脑转移的microRNA标记，为将来深入研究microRNA在肺腺癌脑转移的调控机制和临床应用筛选可能获益于预防性脑照射的脑转移高危亚组打下良好的基础。本专利技术人运用microRNA基因芯片及qRT-PCR技术对我国非小细胞肺癌进行了研究，出人意料的发现，microRNA-193a-5p,microRNA-210,microRNA-214,microRNA-423-3p,microRNA-423-5p在脑转移组表达明显上调，而microRNA-4270在脑转移组表达明显下调。这6个microRNA的表达水平和脑转移风险显著相关，它们组成的microRNA标记是脑转移的独立预测因素。本专利技术涉及一组标志基因microRNA-193a-5p,microRNA-210,microRNA-214,microRNA-423-3p,microRNA-423-5p,microRNA-4270在用于预测非小细胞肺癌脑转移的风险中的用途。具体的，基因microRNA-193a-5p,microRNA-210,microRNA-214,microRNA-423-3p,mi本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种或多种特异地检测microRNA分子表达谱的引物和/或探针在制备用于预测非小细胞肺癌脑转移风险的试剂中的用途，其中所述microRNA分子表达谱包含选自microRNA‑193a‑5p、microRNA‑210、microRNA‑214、microRNA‑423‑3p、microRNA‑423‑5p和microRNA‑4270中的一个或多个。

【技术特征摘要】
1.一种或多种特异地检测microRNA分子表达谱的引物和/或探针在制备用于预测非小细胞肺癌脑转移风险的试剂中的用途，其中所述microRNA分子表达谱包含选自microRNA-193a-5p、microRNA-210、microRNA-214、microRNA-423-3p、microRNA-423-5p和microRNA-4270中的一个或多个。2.一种或多种特异地检测microRNA分子表达谱的引物和/或探针在制备用于预测非小细胞肺癌脑转移风险的试剂中的用途，其中所述microRNA分子表达谱由microRNA-193a-5p、microRNA-210、microRNA-214、microRNA-423-3p、microRNA-423-5p和microRNA-4270组成。3.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述的非小细胞肺癌选自腺鳞癌、腺癌、大细胞癌和鳞状细胞癌。4.一种或多种特异地检测microRNA分子表达谱的引物和/或探针在制备用于预后非小细胞肺癌的试剂中的用途，其中所述microRNA分子表达谱包含选自microRNA-193a-5p、micro...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹启敏，王绿化，宋咏梅，毕楠，孙国贵，
申请(专利权)人：中国医学科学院肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：北京,11