一种香樟茎段的组培繁殖方法技术

本发明专利技术涉及一种香樟组织培养繁殖方法，首次采用改进DCR培养基和MS培养相结合，通过改进DCR培养基元素含量、调节植物激素水平、增加活性炭、调控温度光照、增加壮苗培养等措施，发明专利技术了一种芽诱导率高达98％以上，增殖系数平均为4.8，褐化率小于3.2％、壮苗率(高3cm以上)81％以上，并且移栽成活率达到87％以上的香樟组培体系，满足市场对香樟的大量需求。

Tissue culture propagation method for Cinnamomum camphora stem segments

The invention relates to a camphor tissue culture method for breeding, for the first time by the improved DCR culture medium and MS culture combination, through improved DCR medium element content, the regulation of plant hormone levels, increase of activated carbon, the regulation of temperature light, increase seedling cultivation measures, invented a bud induction rate is as high as 98%, proliferation the average coefficient is 4.8, the browning rate is less than 3.2% and the seedling rate (higher than 3cm) more than 81%, and the transplanting survival rate reached more than 87% camphor tissue culture system, to meet the great demand of market of camphortree.

【技术实现步骤摘要】
一种香樟茎段的组培繁殖方法
本专利技术涉及一种香樟组织培养繁殖方法，属于林木组培繁育

技术介绍
香樟(Cinnamomumcamphora(L.)Presl)为亚洲东部亚热带常绿阔叶林的代表树种，主要分布在我国台湾省和长江以南数省，为我国南方地区珍贵的多用途乡土经济树种，是国家二级重点保护野生植物。香樟枝干圆浑，冠大荫浓，叶色丰富，在美化环境的同时，还有绿化、香化环境的功能，具备隔音、驱虫、净化空气等诸多生态功能，自古以来就是南方村庄、宅院、道路、水边最好的风水林和风景林树种，也是现代庭园观赏、城市绿化不可缺少的树种，市场前景广泛，推广价值极高。目前，香樟主要采用三种方式育苗。一是实生育苗，这是当前香樟苗木培育的主要方式。但实生育苗存在季节性强、难以保留优良性状等缺点。二是扦插育苗，但需要较多采穗母株，同时扦插受环境条件的影响较大，生根效果难稳定。三是组培技术。组培技术最适用于母本材料有限时进行快速扩繁的技术。然而，由于香樟植物的自身特点，在常规组培过程中仍存在芽诱导率低下、继代增殖培养中茎段容易褐化、组培苗瘦弱、移栽成活率低等困难，这些都是香樟产业化推广应用难度较大的重要原因。本专利技术针对上述研究中存在的困难，首次采用经专利技术人改进的DCR培养基和MS培养相结合，通过改进DCR培养基元素含量、调节植物激素水平、增加活性炭、调控温度光照、增加壮苗培养等措施，专利技术了一种芽诱导率高达98％以上，增殖系数平均为4.8，褐化率小于3.2％、壮苗率(高3cm以上)81％以上，并且移栽成活率达到87％以上的香樟组培体系，满足市场对香樟的大量需求。专利
技术实现思路
本专利技术提供一种香樟茎段的组培繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：1)外植体材料的消毒：取当年生嫩枝梢10-15cm消毒；2)芽的诱导：将消毒好的材料剪段，每段带有1-2个腋芽，接种到初始培养基MS中，经过10-20天培养，腋芽萌动并长出新芽；3)芽的分化：将长出的小芽接种在分化培养基上，培养20天左右；4)芽的增殖：待芽苗形成丛生芽后，将新芽分割成单株接种到增殖培养基中继代培养，至芽的增殖系数平均为4.8；褐化率小于3.2％；5)壮苗培养：将得到的不定芽置于壮苗培养基中培养10-20天，至高3cm以上的壮苗比率为81％以上；6)生根诱导：将所述壮苗接种到生根培养基中，培养10天左右，生根率高达98％以上，待根长2cm、叶片3-5枚进行炼苗与移栽；7)炼苗与移栽：将组培苗置于70％遮荫的大棚中炼苗7-10天，移栽至基质中；其中所述步骤3)中所述分化培养基是以改进DCR培养基为基础，添加植物激素6-BA1.0mg/L、NAA0.1mg/L；所述改进DCR培养基的组成及其含量为：NH4NO3：400mg/L、KNO3：340mg/L、Ca(NO3)2·4H2O：278mg/L、KH2PO4：170mg/L、MgSO4·7H2O：370mg/L、CaCl2·2H2O：42.5mg/L、H3BO4：6.2mg/L、MnSO4·4H2O：22.3mg/L、ZnSO4·7H2O：8.6mg/L、CuSO4·5H2O：0.25mg/L、KI：0.83mg/L、CoCl2·6H2O：0.025mg/L、NiCl2：0.025mg/L、Na2MoO4·2H2O：0.25mg/L、FeSO4·7H2O：27.8mg/L、Na2-EDTA：37.3mg/L、VB1：1.0mg/L、VB6：0.5mg/L、VB3：0.5mg/L、甘氨酸：2.0mg/L、肌醇：200mg/L、蔗糖：30g/L、琼脂：6g/L。在一个实施方案中，还包括以下步骤，8)移栽后置于小型塑料薄膜拱棚，并盖实，7天后逐渐打开，半个月后全部打开，待长出新叶后进行正常水肥管理在一个优选实施方案中，在步骤2)中，培养温度为24-26℃，光照强度为1800-2000lx，光照为每天14-16h。在一个优选实施方案中，在步骤3)中，培养温度为24-26℃，光照强度为1800-2000lx，光照为每天12-14h。在一个优选实施方案中，在步骤4)中，所用增殖培养基为改进DCR培养基为基础添加6-BA1.5-2.5mg/L、NAA0.1-0.5mg/L、活性炭0.5g/L。在一个优选实施方案中，在步骤5)中，所用壮苗培养基为MS培养基为基础，添加6-BA1.5-2.5mg/L、IAA0.1mg/L、活性炭1g/L。在一个优选实施方案中，在步骤6)中，生根培养基为1/2MS培养基为基础，添加NAA0.25-0.35mg/L、活性炭2g/L；。在一个优选实施方案中，在步骤6)中，培养温度为24-26℃，光照强度为2000-2200lx，光照为每天10-12h。在一个优选实施方案中，在步骤7)中，所述基质由混合比1：1：3得细河沙：泥炭土：黄心土构成。本专利技术所用的MS培养基的组成及其含量为：NH4NO3：1650mg/L、KNO3：1900mg/L、CaCl2·2H2O：440mg/L、MgSO4·7H2O：370mg/L、KH2PO4：170mg/L、KI：0.83mg/L、H3BO3：6.2mg/L、MnSO4·4H2O：22.3mg/L、ZnSO4·7H2O：8.6mg/L、Na2MoO4·2H2O：0.25mg/L、CuSO4·5H2O：0.025mg/L、CoCl2·6H2O：0.025mg/L、FeSO4·7H2O：27.85mg/L、Na2-EDTA·2H2O：37.25mg/L、肌醇：100mg/L、烟酸：0.5mg/L、VB6：0.5mg/L、VB1：0.1mg/L、甘氨酸：2.0mg/L、蔗糖：30g/L、琼脂：7g/L。有益效果本项组培快繁方法，是首次采用改进DCR培养基和MS培养相结合的香樟组培技术，能提供一种芽诱导率高、增殖系数高、壮苗率高、移栽成活率高的香樟组培快繁体系，有效解决香樟的快速规模化育苗问题，满足市场对香樟的大量需求。具体实施方式根据下述实例实施，可以更好的理解本专利技术。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例仅用于说明本专利技术，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本专利技术。实施例按照以下步骤进行育苗：1.外植体材料的消毒：取香樟当年生嫩枝梢10-15cm，自来水清洗后去掉叶片，用洗衣粉液浸泡5-10min后，用自来水冲洗干净；将清洗干净的材料在无菌操净台上用70％酒精浸泡30s，无菌水洗3遍；再用0.1％升汞消毒8-10min，无菌水冲洗3-5次。2.芽的诱导：将消毒好的材料剪段，每段带有1-2个腋芽，接种到初始培养基MS中；经过10-20d的培养，腋芽萌动并长出新芽，芽的诱导率高达98％以上；培养温度为24-26℃，光照强度为1800-2000lx，光照为每天14-16h。3.芽的分化：将长出的小芽接种在分化培养基上，培养20d左右芽苗分化率达95％；分化培养基以改进DCR培养基为基础，添加植物激素6-BA1.0mg/L、NAA0.1mg/L；培养温度为24-26℃，光照强度为1800-2000lx，光照为每天12-14h。4.芽的增殖：待芽苗形成丛生芽后，将新芽分割成单株接种到增殖培养基中继代培养，芽的增殖系数平均为4.8，最高可达到6以上；褐化率小于3.2％；所用增殖培养基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种香樟茎段的组培繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：1)外植体材料的消毒：取当年生嫩枝梢10‑15cm消毒；2)芽的诱导：将消毒好的材料剪段，每段带有1‑2个腋芽，接种到初始培养基MS中，经过10‑20天培养，腋芽萌动并长出新芽；3)芽的分化：将长出的小芽接种在分化培养基上，培养20天左右；4)芽的增殖：待芽苗形成丛生芽后，将新芽分割成单株接种到增殖培养基中继代培养，至芽的增殖系数平均为4.8；褐化率小于3.2％；5)壮苗培养：将得到的不定芽置于壮苗培养基中培养10‑20天，至高3cm以上的壮苗比率为81％以上；6)生根诱导：将所述壮苗接种到生根培养基中，培养10天左右，生根率高达98％以上，待根长2cm、叶片3‑5枚进行炼苗与移栽；7)炼苗与移栽：将组培苗置于70％遮荫的大棚中炼苗7‑10天，移栽至基质中；其中所述步骤3)中所述分化培养基是以改进DCR培养基为基础，添加植物激素6‑BA 1.0mg/L、NAA 0.1mg/L；所述改进DCR培养基的组成及其含量为：NH

【技术特征摘要】
1.一种香樟茎段的组培繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：1)外植体材料的消毒：取当年生嫩枝梢10-15cm消毒；2)芽的诱导：将消毒好的材料剪段，每段带有1-2个腋芽，接种到初始培养基MS中，经过10-20天培养，腋芽萌动并长出新芽；3)芽的分化：将长出的小芽接种在分化培养基上，培养20天左右；4)芽的增殖：待芽苗形成丛生芽后，将新芽分割成单株接种到增殖培养基中继代培养，至芽的增殖系数平均为4.8；褐化率小于3.2％；5)壮苗培养：将得到的不定芽置于壮苗培养基中培养10-20天，至高3cm以上的壮苗比率为81％以上；6)生根诱导：将所述壮苗接种到生根培养基中，培养10天左右，生根率高达98％以上，待根长2cm、叶片3-5枚进行炼苗与移栽；7)炼苗与移栽：将组培苗置于70％遮荫的大棚中炼苗7-10天，移栽至基质中；其中所述步骤3)中所述分化培养基是以改进DCR培养基为基础，添加植物激素6-BA1.0mg/L、NAA0.1mg/L；所述改进DCR培养基的组成及其含量为：NH4NO3：400mg/L、KNO3：340mg/L、Ca(NO3)2·4H2O：278mg/L、KH2PO4：170mg/L、MgSO4·7H2O：370mg/L、CaCl2·2H2O：42.5mg/L、H3BO4：6.2mg/L、MnSO4·4H2O：22.3mg/L、ZnSO4·7H2O：8.6mg/L、CuSO4·5H2O：0.25mg/L、KI：0.83mg/L、CoCl2·6H2O：0.025mg/L、NiCl2：0.025mg/L、Na2MoO4·2H2O：0.25mg/L、FeSO4·7H2O：27.8mg/L、Na2-EDTA：37.3mg/L、VB1：1.0mg/L、VB6：0.5mg/L、VB3：0.5mg/L、甘氨酸：2.0mg/L、肌醇：200mg/L、蔗糖：30g/L、琼脂：6g/L。2.根据权利要求1所述的方法，还包括以下步骤，8)移栽后置于小型塑料薄膜拱棚，并盖实，7天后逐渐打开，半个月后全部打开，待...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟永达，王碧琴，余发新，肖亮，李彦强，刘立盘，
申请(专利权)人：江西省科学院生物资源研究所，
类型：发明
国别省市：江西,36