一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法技术

本发明专利技术公开了一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，包括外植体处理、初始芽诱导培养、继代芽增殖培养、育苗基质准备、继代芽移植和移植后管理；选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，对枝条进行修剪成茎段作为外植体，对外植体灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中后得到组培继代芽，单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽移植于育苗基质中，经过移植后管理得到泡桐苗木。本发明专利技术方法简单可行，简化了流程，缩短了育苗周期，从初始芽诱导至苗木移植后成活最短45天即可实现，加快了苗木培育的速度，提高了生产效率，节约了成本，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。

Paulownia tissue culture rapid propagation method combined with bottle top rooting Technology

The invention discloses a combination of rooting out technology of Paulownia micropropagation methods, including explant, bud induction culture, subculture, bud proliferation, substrate preparation, bud subculture and transplanted management; selection of robust growth without diseases and insect pests of Paulownia semi lignified branches to prune branches stems were used as explants, disinfection and sterilization treatment outside the plant body after vaccination in bud induction culture medium to obtain the initial bud, the bud inoculated on subculture medium after subculture of tissue culture shoots, robust growth of single cut, height more than 2.5cm subculture buds transplanted to nursery matrix, after management of Paulownia Seedlings after transplantation. The method is simple and feasible, simplify the process, shorten the breeding cycle, from initial bud induction to transplant seedlings survived after the shortest 45 days can be realized, accelerate the speed of seedling cultivation, improve production efficiency, saves the cost and has better economic benefits, social benefits and ecological benefits.

【技术实现步骤摘要】
一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法
本专利技术属于植物组织培养
，涉及一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法。
技术介绍
泡桐为玄参科(Scrophulariaceae)泡桐属(Paulownia)物种的统称落叶乔木，适生范围甚广，我国23个省、市、自治区都有栽植，是我国人工栽培历史最悠久的树种之一。泡桐木材具有质轻、耐火性强、不易劈裂、不易变形、以及隔潮、耐腐、易干燥和声学性能好等特点，是重要的速生用材树种；成树开花多、花冠大、树冠优美，抗污染和空气净化能力较强，是城市和近郊重要的绿化和美化树种；泡桐叶、花、木材有消炎、止咳、利尿、降压等药用功效，具有较高的生态、社会和经济效益。上世纪七、八十年代，泡桐常用繁殖方式是实生繁育，收集种子播种育苗，但种子萌芽率低，而且实生繁殖由于个体间分化严重，易造成林分品种混杂，低产株比例大，株间差异大等现象；后来，泡桐主要繁育方式为根插育苗，但这种繁殖方法根段不易采集，根萌芽时间不一致，苗木生长参差不齐，繁殖系数较低，且苗木易携带病毒，难以进行规模化生产；因此，为保证优树性状能稳定遗传，采用组织培养方式进行无性繁殖，可以在短时间内获得大量优良脱毒苗木，但传统的组培快繁技术要经过初始芽诱导、继代增殖、瓶内生根、炼苗和移栽等诸多工序，过程复杂，成本较高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对传统组培快繁技术中过程复杂，周期长，成本高等不足，提供一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，建立一种高效的组培快繁体系，从而提高苗木繁殖速度，降低泡桐组培苗的培育成本。为了实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，包括外植体处理、初始芽诱导培养、继代芽增殖培养、育苗基质准备、继代芽移植和移植后管理；选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，对枝条进行修剪成茎段作为外植体，对外植体灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中后得到组培继代芽，单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽移植于育苗基质中，经过移植后管理得到泡桐苗木；主要操作步骤如下：（1）外植体处理：选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，用常规的消毒液对枝条进行表面消毒，然后修剪成茎段作为外植体，软纱布轻轻擦洗茎段表面，置于质量浓度为1%洗衣粉溶液浸泡5min，用流水冲洗5min；然后置于超净工作台上，用体积浓度为75%的乙醇溶液对外植体浸泡30s，用无菌水清洗5~6遍；再用体积浓度为0.1%氯化汞溶液浸泡外植体5~10min进行消毒，用无菌水清洗5~6遍；在每一次浸泡期间不断进行搅动；（2）初始芽诱导培养：将步骤（1）处理后的外植体两端分别剪除1~2mm，接种到诱导培养基上诱导初始芽；（3）继代芽增殖培养：将步骤（2）获得的初始芽接种于继代培养基上进行增殖培养，得到组培继代芽；（4）育苗基质准备：将配制好的育苗基质经过杀菌处理后装入规格8cm×8cm无纺纸育苗容器中；（5）继代芽移植：单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽，用清水洗去培养基，将单芽的切端蘸于生根剂后，移植于育苗容器中，压紧，清水淋透育苗基质；（6）移植后管理：在摆有育苗容器的育苗床上方用塑料薄膜搭建小拱棚，再盖上遮荫度为75～85%的遮阴网，每3天淋施一次激素溶液，直至完全生根为止；移植10～15天后选阴天拆除小拱棚；每周用喷雾器补充水分3～5次，使育苗床湿度保持75%以上；移植18～21天后每半月喷洒一次600～800倍的50%退菌特；移植25天后每3周喷一次FA旱地龙500倍液的叶面肥；移植后管理期间光照强度1500～2500lx，光照12～14h/d。以上步骤（1）中所述的茎段长3.0～5.0cm，至少带有一个腋芽。以上步骤（2）中所述的诱导培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS+6-BA2.0~4.0mg/L+IBA1.0~2.0mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂3000mg/L。以上步骤（3）中所述的继代培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS+6-BA4.5~6.5mg/L+IBA0.5~1.0mg/L+IAA0.5~1.0mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂3500mg/L。以上所述的改良MS培养基的组成为：KNO31600mg/L；NH4NO31500mg/L；CaCl2·2H2O220mg/L；MgSO4·7H2O370mg/L；KH2PO3100mg/L；Ca(NO3)2450mg/L；MnSO4·4H2O25mg/L；ZnSO4·7H2O10mg/L；CuSO4·5H2O0.025mg/L；H3BO36.2mg/L；Na2MoO4·2H2O0.025mg/L；维生素B10.2mg/L；维生素B60.2mg/L；烟酸0.5mg/L；甘氨酸2.0mg/L；肌醇100mg/L。以上步骤（2）、（3）的培养条件均为：温度28℃，光照1500～2000lx，光照12～14h/d。以上步骤（4）所述的育苗基质是泥炭和珍珠岩按体积比为1∶1混合，并在其混合物中加入质量分数为0.5%的辛硫酸颗粒剂和质量分数为0.5%硫酸亚铁，混匀。以上步骤（4）对育苗基质的杀菌处理方法是将体积分数为50%多菌灵600～800倍溶液与育苗基质拌匀，湿度成团却不滴水。以上步骤（5）所述的生根剂为200～400mg/LABT6#溶液与滑石粉混合而成的匀浆。以上步骤（6）所述的激素溶液为200～400mg/LABT6#溶液。相当于现有技术，本专利技术具有的优点及有益效果如下：（1）本专利技术以改良MS作为基本培养基，辅以不同浓度的激素溶液对泡桐进行诱导和增殖培养，组培各阶段的培养基配方合理，更适应泡桐的生长，诱导率高达85%以上，增殖系数8~10。（2）本专利技术在育苗基质中加入辛硫酸颗粒剂和硫酸亚铁对土壤进行消毒，能够更有效地防治地下病虫害，避免由于育苗基质携带病毒导致泡桐感染病毒，提高成活率。（3）本专利技术以无纺纸作为育苗容器，既透气透水透根，又便于运输，且苗木造林时可直接连容器栽植，避免了根系损伤，造林成活率高。（4）本专利技术在移植后瓶外生根阶段淋施ABT6#激素溶液，能够促进泡桐快速生根，且使苗木更加健壮，移植15~20天生根，根系数量可达5~10条，生根成活率高达98%以上。（5）本专利技术是移栽后进行生根，避免了传统组培快繁技术中移栽时对瓶内生根苗根系的损伤，提高了成活率。（6）本专利技术省去传统瓶内生根和炼苗等程序，方法简单可行，简化了流程，缩短了育苗周期，从初始芽诱导至苗木移植后成活最短45天即可实现，加快了苗木培育的速度，提高了生产效率，节约了成本，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。具体实施方式下面的实施例可以使本领域技术人员更全面地理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。实施例1：选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，用常规的消毒液对枝条进行表面消毒，然后修剪成长3.0cm，至少带有一个腋芽的茎段作为外植体，软纱布轻轻擦洗茎段表面，置于质量浓度为1%洗衣粉溶液浸泡5min，用流水冲洗5min；然后置于超净工作台上，用体积浓度为75%的乙醇溶液对外植体浸泡30s，用无菌水清洗5~6遍；再用体积浓度为0.1%氯化汞溶液浸泡外植体5~10min进行消毒，用无菌水清洗5~6遍；在每一次浸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，其特征在于：包括外植体处理、初始芽诱导培养、继代芽增殖培养、育苗基质准备、继代芽移植和移植后管理；选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，对枝条进行修剪成茎段作为外植体，对外植体灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中后得到组培继代芽，单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽移植于育苗基质中，经过移植后管理得到泡桐苗木；主要操作步骤如下：（1）外植体处理：选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，用常规的消毒液对枝条进行表面消毒，然后修剪成茎段作为外植体，软纱布轻轻擦洗茎段表面，置于质量浓度为1%洗衣粉溶液浸泡5min，用流水冲洗5min；然后置于超净工作台上，用体积浓度为75%的乙醇溶液对外植体浸泡30s，用无菌水清洗5~6遍；再用体积浓度为0.1%氯化汞溶液浸泡外植体5~10min进行消毒，用无菌水清洗5~6遍；在每一次浸泡期间不断进行搅动；（2）初始芽诱导培养：将步骤（1）处理后的外植体两端分别剪除1~2mm，接种到诱导培养基上诱导初始芽；（3）继代芽增殖培养：将步骤（2）获得的初始芽接种于继代培养基上进行增殖培养，得到组培继代芽；（4）育苗基质准备：将配制好的育苗基质经过杀菌处理后装入规格8 cm×8 cm无纺纸育苗容器中；（5）继代芽移植：单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽，用清水洗去培养基，将单芽的切端蘸于生根剂后，移植于育苗容器中，压紧，清水淋透育苗基质；（6）移植后管理：在摆有育苗容器的育苗床上方用塑料薄膜搭建小拱棚，再盖上遮荫度为75～85%的遮阴网，每3天淋施一次激素溶液，直至完全生根为止；移植10～15天后选阴天拆除小拱棚；每周用喷雾器补充水分3～5次，使育苗床湿度保持75%以上；移植18～21天后每半月喷洒一次600～800倍的50%退菌特；移植25天后每3周喷一次FA旱地龙500倍液的叶面肥；移植后管理期间光照强度1500～2500 lx，光照12～14h/d。...

【技术特征摘要】
1.一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，其特征在于：包括外植体处理、初始芽诱导培养、继代芽增殖培养、育苗基质准备、继代芽移植和移植后管理；选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，对枝条进行修剪成茎段作为外植体，对外植体灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中后得到组培继代芽，单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽移植于育苗基质中，经过移植后管理得到泡桐苗木；主要操作步骤如下：（1）外植体处理：选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，用常规的消毒液对枝条进行表面消毒，然后修剪成茎段作为外植体，软纱布轻轻擦洗茎段表面，置于质量浓度为1%洗衣粉溶液浸泡5min，用流水冲洗5min；然后置于超净工作台上，用体积浓度为75%的乙醇溶液对外植体浸泡30s，用无菌水清洗5~6遍；再用体积浓度为0.1%氯化汞溶液浸泡外植体5~10min进行消毒，用无菌水清洗5~6遍；在每一次浸泡期间不断进行搅动；（2）初始芽诱导培养：将步骤（1）处理后的外植体两端分别剪除1~2mm，接种到诱导培养基上诱导初始芽；（3）继代芽增殖培养：将步骤（2）获得的初始芽接种于继代培养基上进行增殖培养，得到组培继代芽；（4）育苗基质准备：将配制好的育苗基质经过杀菌处理后装入规格8cm×8cm无纺纸育苗容器中；（5）继代芽移植：单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽，用清水洗去培养基，将单芽的切端蘸于生根剂后，移植于育苗容器中，压紧，清水淋透育苗基质；（6）移植后管理：在摆有育苗容器的育苗床上方用塑料薄膜搭建小拱棚，再盖上遮荫度为75～85%的遮阴网，每3天淋施一次激素溶液，直至完全生根为止；移植10～15天后选阴天拆除小拱棚；每周用喷雾器补充水分3～5次，使育苗床湿度保持75%以上；移植18～21天后每半月喷洒一次600～800倍的50%退菌特；移植25天后每3周喷一次FA旱地龙500倍液的叶面肥；移植后管理期间光照强度1500～2500lx，光照12～14h/d。2.根据权利要求1所述的一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，其特征在于：步骤（1）中所述的茎段长3.0～5.0cm，至少带有一个腋芽。3.根据权利要求1所述的一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，其特征在于：步骤（2...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹明洋，陈政璋，
申请(专利权)人：广西绿树农林科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广西,45