鸡贫血病毒LAMP‑LFD检测试剂盒及其检测方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种鸡贫血病毒快速检测试剂盒及其检测方法。本发明专利技术所述的试剂盒可用于鸡贫血病毒型的检测。其特征是：试剂盒中含有LAMP特异性引物组SEQ ID NO：1‑4和1个特异性探针SEQ ID NO：5，该技术将环介导等温扩增技术与横向流胶体金试纸条检测技术相结合，能够肉眼直观的判定检测结果。该技术具有准确、快速、方便、高效、特异、灵敏的特点，适用于动物疫病现场检测，对于保障畜牧业的健康发展具有重要意义。

Chicken anemia virus LAMP LFD detection kit and detection method and Application

The invention relates to a rapid detection kit for chicken anemia virus and a detection method thereof. The kit of the invention can be used for detecting chicken anemia virus type. Its characteristic is: the kit contains LAMP specific primer set SEQ ID NO:1 4 and 1 specific probe SEQ ID NO:5, the loop mediated isothermal amplification and lateral flow dipstick colloidal gold detection technology, can determine the naked eye visual testing result. The technique is accurate, fast, convenient, efficient, specific and sensitive. It is suitable for field detection of animal diseases and has important significance for ensuring the healthy development of animal husbandry.

【技术实现步骤摘要】
鸡贫血病毒LAMP-LFD检测试剂盒及其检测方法与应用
本专利技术属于动物疫病检测
，涉及一种用于检测鸡贫血病毒的LAMP-LFD试剂盒及其检测方法与应用。
技术介绍
鸡贫血病毒（Chickenanemiavirus，CAV）感染引起的鸡传染性贫血，主要发生在2~3周龄的雏鸡，病鸡的造血器官和淋巴组织受损，出现再生障碍性贫血、全身淋巴组织萎缩和免疫抑制。该病毒对养鸡业危害严重，所造成的经济损失巨大。自1979年Yuasa等首次在日本分离到该病毒后，英国、德国、澳大利亚、美国等许多国家相继报道了该病的发生。1992年崔现兰等报道首次在我国分离到CAV，近年来各地又陆续报道有本病的发生，证实了国内鸡群中CAV感染较为普遍。对于突发性传染病，快速检测和鉴定病原体是控制疫情的关键。目前该病毒的实验室诊断主要采用病毒分离鉴定和PCR或实时定量荧光PCR技术，但这些方法存在操作繁琐、耗时长、必须配备昂贵的仪器设备、需专门的操作人员等缺点。环介导等温扩增技术是Notomi等于2000年建立的，该技术通过针对目的基因的6个区域设计4条特异性引物，利用一种链置换DNA聚合酶（BstDNApoly本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测鸡贫血病毒的LAMP特异性引物组，其特征在于它是由下述引物组成：CAV‑F3   AGAATGTGCCGGACTTGAG                       SEQ ID NO：1CAV‑B3   ACCGTCCTCTTCTGAAGGAG                      SEQ ID NO：2CAV‑FIP  ACCCTGTACTCGGAGGGGTCGACCGATCAACCCAAGCC    SEQ ID NO：3CAV‑BIP  TTACCACTACTCCCAGCCGACCGTCTGCGAGCTCGTCTTG  SEQ ID NO：4所述的CAV‑F3 为0.5...

【技术特征摘要】
1.一种用于检测鸡贫血病毒的LAMP特异性引物组，其特征在于它是由下述引物组成：CAV-F3AGAATGTGCCGGACTTGAGSEQIDNO：1CAV-B3ACCGTCCTCTTCTGAAGGAGSEQIDNO：2CAV-FIPACCCTGTACTCGGAGGGGTCGACCGATCAACCCAAGCCSEQIDNO：3CAV-BIPTTACCACTACTCCCAGCCGACCGTCTGCGAGCTCGTCTTGSEQIDNO：4所述的CAV-F3为0.5μL；CAV-B3为0.5μL；CAV-FIP为0.5μL；CAV-BIP为0.5μL；其中CAV-FIP的5’端标记生物素。2.一种用于检测鸡贫血病毒的LAMP扩增产物的特异性探针，其特征在于它是由下述基因组成：CAV-HPCCAGCGATACCAATCCGGATCTCTCSEQIDNO：5所述的CAV-HP为20pmol，CAV-HP的5’端标记有异硫氰酸荧光素。3.一种含有权利要求1、2所述用于检测鸡贫血病毒LAMP-LFD特异性引物组和1个特异性探针的检测试剂盒，其特征在于它的组成如下：（1）LAMP反应液：LAMP反应液中含有：2×Buffer（含Mg2+）2.5μL；CAV-F30.5μL；CAV-B30.5μL；CAV-FIP0.5μL；CAV-BIP0.5μL；dNTPs4μL超纯水Bst酶（8U/μL）（4）CAV-HP探针20pmol（5）横向流动试纸条（6）用于检测鸡贫血病毒的LAMP特异性引物和1个特异性探针；其中的引物和探针指的是：CAV-F3AGAATGTGCCGGACTTGAGSEQIDNO：1CAV-B3ACC...

【专利技术属性】
技术研发人员：李秀梅，郭恋，李颖，梁智选，石瑜，朱雅宁，袁雪涛，杨颖，王健春，杨爱华，尹春博，王虹，赵静，
申请(专利权)人：天津市动物疫病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：天津,12