小苍兰花叶病毒RT‑LAMP检测引物及其检测方法技术

技术编号:15818325 阅读:54 留言:0更新日期:2017-07-15 01:28
本发明专利技术提供了一种小苍兰花叶病毒RT‑LAMP检测引物及检测方法,针对FreMV的CP基因为靶基因设计针对6个区域的4条特异性引物,应用DNA链置换聚合酶,在恒温条件下快速对靶基因进行RT‑LAMP扩增。本发明专利技术能特异性扩增FreMV,与其他4种病毒不发生反应,灵敏度为RT‑PCR的10倍,具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点,不需要特殊仪器等优点,在基层和现场检测中有很好的应用前景。

Freesia mosaic virus RT primers for LAMP detection and its detection method

The invention provides a Freesia mosaic virus RT primers for LAMP detection and detection method for CP FreMV gene as the target gene for 4 specific primers of 6 regions, the application of DNA strand displacement polymerase, under constant temperature condition of the RT LAMP amplification of target gene. The invention can FreMV specific amplification, and the other 4 viruses do not react, the sensitivity is 10 times RT PCR, has the characteristics of strong specificity, high sensitivity, simple and quick, do not need special equipment and other advantages, has a good application prospect in the detection of primary and field.

【技术实现步骤摘要】
小苍兰花叶病毒RT-LAMP检测引物及其检测方法
本专利技术涉及一种小苍兰花叶病毒RT-LAMP检测引物及其检测方法。
技术介绍
小苍兰花叶病毒(Freesiamosaicvirus,FreMV)是危害小苍兰最严重最常见的病毒之一。小苍兰花叶病毒侵染小苍兰,会影响小苍兰观赏和利用价值,造成花色杂,花朵数量骤减,植物生长不良,严重影响其观赏价值,发病严重时,甚至造成种球的退化,失去再利用的价值,已经成为小苍兰大规模生产的主要限制因素。目前,小苍兰病毒尚无特别有效的化学防治方法,培育和栽培无病毒苗成为防治小苍兰病毒的根本措施,在无毒苗培育过程中,经常需要对母本及脱毒苗进行病毒检测,建立快速、灵敏的检测技术显得尤为重要。目前,病毒检测主要有电镜观察法,酶联免疫法、PCR检测法等几种方法。传统的电镜法费时费力,需要有经验的专业人员才能鉴定,酶联免疫法是目前较常用的一种方法,但也存在灵敏度不高的缺陷,灵敏度更高的PCR技术已成为常规检测手段,但由于实验设备要求高,不利于向基层检验检疫部门推广。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题之一,在于提供一种小苍兰花叶病毒RT-LAMP检测引物。本专利技本文档来自技高网...
<a href="http://www.xjishu.com/zhuanli/27/201710167613.html" title="小苍兰花叶病毒RT‑LAMP检测引物及其检测方法原文来自X技术">小苍兰花叶病毒RT‑LAMP检测引物及其检测方法</a>

【技术保护点】
一种小苍兰花叶病毒RT‑LAMP检测引物,其特征在于:包括以下两引物对:外引物F3:5'‑GACGAGGTGCGATACCAAGC‑3',外引物B3:5'‑CCTTCAATTTTGCCAACCTTGG‑3';内引物FIP:5'‑CACTCCTTGCTTTTCGCCTTCGCGAATTCAGCAACTTGACGCTGGGGCT‑3';内引物BIP:5'‑GAGCGCGAAATTGCAAAGAATAGCGGAATTCTTGCTCGTGAACCCACATCCAC‑3'。

【技术特征摘要】
1.一种小苍兰花叶病毒RT-LAMP检测引物,其特征在于:包括以下两引物对:外引物F3:5'-GACGAGGTGCGATACCAAGC-3',外引物B3:5'-CCTTCAATTTTGCCAACCTTGG-3';内引物FIP:5'-CACTCCTTGCTTTTCGCCTTCGCGAATTCAGCAACTTGACGCTGGGGCT-3';内引物BIP:5'-GAGCGCGAAATTGCAAAGAATAGCGGAATTCTTGCTCGTGAACCCACATCCAC-3'。2.一种小苍兰花叶病毒RT-LAMP检测方法,其特征在于:利用权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员:樊荣辉黄敏玲钟淮钦叶秀仙罗远华
申请(专利权)人:福建省农业科学院作物研究所
类型:发明
国别省市:福建,35

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