利用HPLC测定艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用HPLC测定艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质的方法，所述方法的分析条件为：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶柱；以甲酸盐缓冲液与第一有机溶剂的混合溶剂作为流动相梯度洗脱。采用该方法可以将艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质在同一色谱条件下进行快速高效的分离，有效控制原料药和制剂的质量。该检测方法专属性强、精密度高、准确性强、操作方便，可有效控制产品质量。

A method for the determination of related substances in fluconazole and its preparations by HPLC

The invention discloses a method for the determination of related substances, raw material drug and preparation of fluconazole by HPLC, analysis condition of the method is: using the eighteen column C18 column with mixed solvent; formate buffer with the first organic solvent as mobile phase gradient elution. The method can be used for rapid and efficient separation of the substances in the fluconazole raw material and the preparation thereof under the same chromatographic condition, and effectively control the quality of the raw material medicine and the preparation. The detection method has the advantages of strong specificity, high precision, good accuracy and convenient operation, and can effectively control the quality of products.

【技术实现步骤摘要】
利用HPLC测定艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质的方法
本专利技术属于药物分析
，具体而言，本专利技术涉及一种利用HPLC(高效液相色谱法)测定艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质的方法。
技术介绍
灰指甲(onychomycosis)是一种发生在人指(趾)甲上的传染性疾病的俗称，是由一大类称做病原真菌的微生物感染引起，致病菌先侵入远端甲下甲床，甲床下角质增生、增厚，甲板可变为白色、棕色至灰褐色，表面凹凸不平，失去光泽，甲板缺失、松脆。该病目前治疗效果不佳，很大程度上是由于现有治疗方法存在一定的局限性。目前，非处方或处方外用药提供的疗效十分有限，在用药的同时往往需要频繁清创，或刮、切割或去除指甲。处方口服药则由于药物相互作用和严重的安全性问题而应用十分有限。现有技术中，治疗灰指甲的最佳疗法是外用疗法，其中尤以局部涂药的方式最为简便。外用抗真菌剂的疗效最直接，其中涂剂对甲板有极佳的渗透力，在病甲板的外侧涂药后可以渗透到甲板内侧，能直接发挥抑菌或杀菌活性。艾氟康唑(Efinaconazole)是一种新型的三唑类抗真菌药物，是由加拿大DOW制药公司研发，于2014年6月6日获得美国FDA批准上市，商品名为Jublia(含艾氟康唑质量分数为10％的外用溶液)。Jublia是首个外用三唑类抗真菌药，可局部涂用，通过一种独特的内置用量控制型指甲刷进行涂敷，该药能很快干燥，无需除去过量的药物，主要用于治疗由红色毛癣菌、石膏样毛癣菌引起的手、足藓(即灰指甲)，同时无需顾虑系统性副作用，如药物相互作用或急性肝损伤，副作用极小。然而，目前分析艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质的方法仍有待改进。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提供一种快速分析分离艾氟康唑降解产物、工艺副反应杂质和中间体的高效液相色谱法，从而实现了艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质在同一色谱条件下的分离测定。艾氟康唑的化学名称为(2R,3R)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(4-亚甲基哌啶-1-基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁醇，其结构式为：艾氟康唑合成采用路线：艾氟康唑原料药及其制剂有关物质有以下三个来源：一为本品合成过程中带入的原料、中间体、降解物；二为合成反应中生成的副产物；三为贮存过程中由于环境的影响产生的降解产物，主要有：杂质1为原料：1-(((2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-甲基环氧乙基-2-基)甲基)-1H-1,2,4-三唑；杂质2为副反应产物、非对映异构体杂质：(2S,3R)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(4-亚甲基哌啶-1-基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁醇；杂质3为副反应产物：E-(3R)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(4-亚甲基哌啶-1-基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-1-丁烯；杂质4为副反应产物：(2R,3R)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(4-亚甲基哌啶-1-基)-1-(4H-1,2,4-三唑-4-基)-2-丁醇；杂质5为副反应产物：(R，E)-3-(2,4-二氟苯基)-4-(1H-1,2,4-三唑-1-基))-2-羟基-3-丁烯；杂质6为副反应产物：1-((6-氟-2-甲基苯并呋喃-3-基)甲基)-1H-1,2,4-三唑；杂质7为副反应产物、降解物：(2R,3R)-2-(2,4-二氟苯基)-3(4-甲基-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁醇。对于合成、生产、贮存艾氟康唑原料药及制备、贮存艾氟康唑制剂的过程中都可能产生的以上杂质，均需进行严格控制，以保证产品质量。因此，实现艾氟康唑及其制剂中有关物质的快速分离和分析在合成和制剂过程的质量控制方面都具有重要的现实意义。艾氟康唑有关物质检测方法尚未见报道，其检测方法的难度在于其合成过程中可能会产生各种工艺副产物杂质、非对映异构体杂质、降解物等，精制后仍无法去除的杂质与主药的色谱行为比较相似，不易完全分离。在本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种利用HPLC测定艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质的方法。所述方法的色谱条件为：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相为甲酸盐缓冲液和第一有机溶剂的混合溶剂。由此，可以将艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质在同一色谱条件下进行快速高效的分离，可有效控制原料药和制剂的质量。该检测方法灵敏度高、专属性强、精密度高、准确性强、操作方便，可有效控制产品的质量。根据本专利技术的一些实施例的利用HPLC测定艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质的方法，还可以具有以下附加技术特征：根据本专利技术的一些实施例，梯度洗脱的条件为：0－3分钟时，所述甲酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为(65-55)％：(35-45)％；6-25分钟时，所述甲酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为45％:55％；30－35分钟时，所述甲酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为20％:80％；所述甲酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为(20-65)％：(80-35)％。由此得到的分离效果最佳，峰形最好。根据本专利技术的一个实施例，所述梯度洗脱的条件为：时间/min甲酸盐缓冲液/％第一有机溶剂/％065353653564555254555302080352080366535426535根据本专利技术的一些实施例，所述色谱柱的粒径为3μm～5μm，优选为3μm。由此，可以进一步提高分离度。根据本专利技术的一些实施例，所述甲酸盐缓冲液为甲酸铵缓冲液。由此，可以进一步改善峰形。根据本专利技术的一些实施例，采用甲酸或氨水调节所述甲酸盐缓冲液的pH值至5.6-6.0，优选为5.8。由此，可以进一步改善相邻色谱峰之间的分离度。根据本专利技术的实施例，所述甲酸盐缓冲液中甲酸盐的浓度为0.001mol/L～0.10mol/L，优选0.005mol/L～0.05mol/L，最优选为0.01mol/L。由此，可以在保证分离效果的情况下将对仪器和色谱柱的损害减小至最低。根据本专利技术的实施例，所述第一有机溶剂为甲醇和/或乙腈，优选为乙腈。由此，可以进一步提高分离效率。根据本专利技术的实施例，本专利技术的分析方法进一步包括：采用第二有机溶剂和水的混合液将待检测样品配制成样品溶液，将样品溶液注入高效液相色谱仪，完成艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质的测定。根据本专利技术的实施例，所述第二有机溶剂为甲醇和/或乙腈，优选为乙腈。根据本专利技术的实施例，所述第二有机溶剂和水的混合液中水和第二有机溶剂的体积比为(0％:100％)～(60％:40％)，优选为50％:50％。根据本专利技术的一些实施例，注入所述高效液相色谱仪的样品溶液的体积为2μL～20μL，优选为10μL。根据本专利技术的一些实施例，高效液相色谱仪的检测波长为254nm～262nm，优选为260nm。由此，可以显著提高检测灵敏度。根据本专利技术的实施例，所述流动相的流速为0.8mL/min～1.2mL/min，优选为1.0mL/min。由此，可以进一步提高分离度。根据本专利技术的一些实施例，所述色谱柱的柱温为25℃～40℃，优选为35℃。由此，可以显著改善相邻色谱峰之间的分离度。根据本专利技术的具体实施例，测定艾氟康唑及其制剂中有关物质的方法，可以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用HPLC测定艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质的方法，其特征在于，色谱条件为：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相为甲酸盐缓冲液和第一有机溶剂的混合溶剂。

【技术特征摘要】
1.一种利用HPLC测定艾氟康唑原料药及其制剂中有关物质的方法，其特征在于，色谱条件为：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相为甲酸盐缓冲液和第一有机溶剂的混合溶剂。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，梯度洗脱的条件为：0－3分钟时，所述甲酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为(65-55)％：(35-45)％；6-25分钟时，所述甲酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为45％:55％；30－35分钟时，所述甲酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为20％:80％；36－42分钟时，所述甲酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为(20-65)％：(80-35)％；任选地，所述梯度洗脱的条件为：时间/min甲酸盐缓冲液/％第一有机溶剂/％0653536535645552545553020803520803665354265353.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的粒径为3μm～5μm，优选为3μm。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲酸盐缓冲液为甲酸铵缓冲液。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，采用甲酸或氨水调节所述甲酸盐缓冲液的pH值至5.6-6.0，优选为5.8...

【专利技术属性】
技术研发人员：付美玲，熊丽，钱丽娜，胡名龙，项斌，
申请(专利权)人：中美华世通生物医药科技武汉有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42