用于免疫荧光检测的SETD3抗体的制备方法技术
Method for preparing SETD3 antibody for immunofluorescence detection
The invention discloses a method for preparing SETD3 immunofluorescence detection, which comprises the following steps: to immunize rabbit expressed with full-length SETD3 N 6xHis label and extract serum immune rabbit serum; purification rabbit with Affi coupled Gel GST tag of the full-length SETD3 protein. The SETD3 antibodies of the present invention can be used for many purposes, such as Western blot (WB), immunofluorescence (IF), immunohistochemistry (IHC), and immunoprecipitation (IP), with high potency and specificity.
【技术实现步骤摘要】
用于免疫荧光检测的SETD3抗体的制备方法
本专利技术涉及免疫学
，特别是涉及一种用于免疫荧光检测的SETD3抗体的制备方法。
技术介绍
SETD3是一个具有经典SET保守结构(Su(var)3-9,Enhancer-of-zeste以及Trithorax)的一个甲基化转移酶。SETD3自身还包含有一个称为Rubis-subs-bind的结构域。SETD3首次被发现是因为其转录本水平在喂食过程中被调控。研究发现，斑马鱼中的SETD3具有对组蛋白H3K36位残基的单、双、三甲基化功能以及通过诱导caspase-3的激活进而抑制细胞生存能力的功能。最近的研究显示，鼠源的SETD3可以通过结合在肌生因子myogenin的启动子处来诱导肌肉细胞的分化过程，因此鼠源的SETD3在此处扮演了转录因子的角色，相对应的，鼠源的SETD3被证明具有组蛋白H3K4和H3K36位的甲基化转移酶活性。人源的SETD3蛋白被发现可以跟很多蛋白质发生相互作用，其中可以甲基化转录因子FoxM1。两者的结合可以抑制VEGF的转录。鉴于SETD3蛋白的多种功能，研究该蛋白的重要工具——抗体的...
【技术保护点】
一种用于免疫荧光检测的SETD3抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a)用N端6xHis标签的全长SETD3表达的蛋白免疫兔子并提取被免疫兔子的血清；b)用Affi‑Gel偶联的GST标签的全长SETD3蛋白纯化兔子的血清。
【技术特征摘要】
1.一种用于免疫荧光检测的SETD3抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a)用N端6xHis标签的全长SETD3表达的蛋白免疫兔子并提取被免疫兔子的血清；b)用Affi-Gel偶联的GST标签的全长SETD3蛋白纯化兔子的血清。2.根据权利要求1所述用于免疫荧光检测的SETD3抗体的制备方法，其特征在于，用N端6xHis标签的全长SETD3表达的蛋白免疫兔子时间为：主注射、主注射后的第28天、主注射后的第42天、主注射后的第60天、主注射后的第78天。3.根据权利要求2所述用于免疫荧光检测的SETD3抗体的制备方法，其特征在于，免疫主注射后的第102天提取被免疫兔子的血清。4.根据权利要求2所述用于免疫荧光检测的SETD3抗体的制备方法，其特征在于，主注射0.5mg抗原、主注射后的第28天注射0.6mg抗原、主注射后的第42天注射0.6mg抗原、主注射后的第60天注射0.4mg抗原、主注射后的第78天注射0.4mg抗原。5.根据权利要求2所述用于免疫荧光检测的SETD3抗体的制备方法，其特征在于，N端6xHis标签的全长SETD3表达的蛋白为经镍柱树脂纯化后蛋白。6.根据权利要求1所述用于免疫荧光检测的SETD3抗体的制备方法，其特征在于，用Affi-Gel偶联GST标签的全长SETD3蛋白步骤包括：c)用谷胱甘肽树脂纯化GST标签的全长SETD3蛋白；d)将...
【专利技术属性】
技术研发人员：杜海宁，程晓庆，赵梦洁，
申请(专利权)人：武汉大学深圳研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44
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