一种从香柚籽中提取柠檬苦素的工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种从香柚籽中提取柠檬苦素的工艺，其工艺包括下述步骤：柚籽预处理、抽提、纯化、浓缩复溶、结晶、干操，得最终产品。本发明专利技术的有益效果是：利用热回流提取、吸附树脂分离杂质等过程，从香柚籽中提出了含量90％以上的柠檬苦素。本方法提取纯度高，操作简单，试剂消耗少，污染少。

A process for extracting limonin from pomelo seeds.

The invention discloses a process for extracting limonin from pomelo seeds, the process comprises the following steps: seed pretreatment, extraction, purification, concentration, crystallization, drying, rehydration, final product. The beneficial effect of the invention is: extraction, adsorption resin separation process by impurities such as hot reflux, the content above 90% limonoids from pomelo seeds. The method has the advantages of high purity, simple operation, less reagent consumption and less pollution.

【技术实现步骤摘要】
一种从香柚籽中提取柠檬苦素的工艺
本专利技术属于生物
，具体涉及的是一种从香柚籽中提取柠檬苦素的工艺。
技术介绍
柚子，味道酸甜，略带苦味，含有丰富的VC及大量其他营养素，是医学界公认的食疗水果。江永香柚，明代引种，栽种面积大、产量高，国家农业部更将永州江永县命名为“中国香柚之乡”。柠檬苦素是从芸香科植物柑枝叶、柚子类果核中提取的结晶体物质，其具有多种生理功能，除用作药用外，柠檬苦素还可以作为保健品和食品添加剂广泛应用于保健品和食品加工工业，以及作为动物饲料添加剂应用于畜养行业。目前，国内外对柚子的研究主要集中于柚子果肉和柚子皮的开发，对柚子籽中柠檬苦素的研究未见报道。大量柚子籽在工业生产中被丢弃，不但造成浪费，而且污染环境。本文通过对永州江永县香柚籽中柠檬苦素提取及分离纯化工艺的研究，可提高柚子的综合利用价值、增加柚子的附加值。柠檬苦素类化合物(Limonoids)是一类高度氧化的四环三菇类次生代谢产物,主要存在于芸香科(Rutaceae)和楝科(Meliaceae)的多种植物组织中,这些植物有芸香科的脐橙、酸橘、香橙、八朔柑、柚、枸椽等,楝科植物楝树、大叶桃花心木、川楝等,迄今己从这些植物中分离大约300多种柠檬苦素类化合物。芸香科柑橘属植物是柠檬苦素类化合物的主要来源,以柠檬苦素(Lirnonin)和诺米林（Nomilin)含量为最多,它们也是引起柑橘汁苦味的主要原因之一。由于这类化合物具有抗癌、抑菌以及高效除虫等诸多生物学活性,越来越受到学者们的重视。目前,柠檬苦素类化合物高效提取!分离纯化和鉴定体系的建立,单体的药理研究己经成为研究的热点。柠檬苦素(limonin)即黄柏内酯，又称吴茱萸苦素、白藓内酯，是一种三萜类植物次生代谢产物，主要存在于芸香科和楝科植物中。科属芸香科的柚子果实中含有柠檬苦素，以柚籽中含量最大。柠檬苦素具有抗癌、镇痛、除虫和杀虫、调节体内胆固醇水平，防止动脉粥样化等功效。因此分离纯化柠檬苦素引起了生化科研工作者的重视，文献中已有相关分离纯化柠檬苦素工艺的报道。中国专利CN1279242A中提供了一种从芸香科果实中提取柠檬苦素的工艺。该工艺先将芸香科果核烘干粉碎，再用石油醚彻底脱脂三次，然后用丙酮抽提柠檬苦素，提取液蒸发浓缩至干后，用二氯甲烷和异丙醇的混合液溶解浓缩物，过滤后，置于低温下，进行结晶，产品用二氯甲烷和异丙醇混合液重结晶两次，得到柠檬苦素产品。该工艺在脱脂过程中，需消耗大量溶剂、电能，成本高，操作繁琐且工艺不易放大。施英等应用大孔吸附树脂对柠檬苦素类似物进行了分离纯化(施英，徐玉娟，吴娱明等.桔核中柠檬苦素类物质纯化工艺的研究[J].广东农业科学，2006，11：70～72)。该工艺用桔核提取的浓缩水溶液，经大孔吸附树脂吸附分离，用乙醇水溶液洗涤，收集洗涤液后，冷冻干燥，得到柠檬苦素类似物。该技术能够将柠檬苦素类似物分离出来，但含量不高，且不能分离出柠檬苦素单体。综上所述，现有技术工艺复杂，成本高，多为实验室采用，不能大规模生产。
技术实现思路
本专利技术的目的是：提供一种简单实用、产品纯度高，成本低，适于进行大规模生产柠檬苦素制品的工艺。为达到上述目的，采用的技术方案是：一种从香柚籽中提取柠檬苦素的工艺，其特征在于，包括下述步骤：(1)柚籽预处理：柚籽经水洗涤、干燥后，粉碎至20～40目；(2)抽提：所述步骤(1)制得的柚籽粉末料，以60％～80％乙醇水溶液作为溶剂，65℃～75℃热回流抽提1.5h～2.5h，收集抽提液；(3)纯化：所述步骤(2)抽提液稀释至乙醇浓度为40％～60％，pH为3.0～5.0，以非极性大孔吸附树脂吸附14-20h，以30％～50％乙醇水溶液洗涤，洗涤液弃去；再以60％～80％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；(4)浓缩、溶解：所述步骤(3)洗脱液减压浓缩至干，用二氯甲烷溶解后过滤；(5)结晶：所述步骤(4)得到的二氯甲烷过滤液中，加入2倍体积异丙醇，冷却至4℃，缓慢搅拌结晶；(6)过滤和干操：所述步骤(5)得到晶体物过滤，50℃～70℃真空干燥。步骤(2)中所述柚籽粉与乙醇溶液的料液比（g/ml）为1∶25-30，连续抽提2～3次。步骤(3)中所述非极性大孔吸附树脂为AB-8型。本专利技术的有益效果是：利用热回流提取、吸附树脂分离杂质等过程，从柚籽中提出了纯度大于90％的柠檬苦素。工艺简单，洗涤剂可回收循环利用，成本低，适合大规模生产应用。具体实施方式以下通过对本专利技术具体实施方式的描述说明但不限制本专利技术。实施例1将经水洗涤后的柚籽，置于烘干箱中65℃烘干，粉碎至20目得粉料；称量柚籽粉料60克，用滤纸包裹后，置于索氏提取仪中，用60％乙醇水溶液1800ml在65℃温度下，连续抽提3次，收集抽提液；将抽提液稀释至乙醇浓度为40％，提取液pH＝3.0，加入50mlAB-8树脂慢速搅拌吸附20h；先用30％乙醇水溶液200ml洗涤，洗涤液弃去，再用60％乙醇水溶液300ml洗脱，收集洗脱液；洗脱液减压蒸馏(0.8bar，80℃)，浓缩至干，用20ml的二氯甲烷溶解，过滤后，加入40ml的异丙醇，置于冰箱4℃中，缓慢搅拌结晶；将结晶液过滤，得到无色晶体，60℃真空干燥，得纯度92.6％的柠檬苦素成品。实施例2将经水洗涤后的柚籽，置于烘干箱中65℃烘干，粉碎至40目得粉料；称量柚籽粉料60克，用滤纸包裹后，置于索氏提取仪中，用80％乙醇水溶液1500ml在75℃温度下，连续抽提2次，收集抽提液；将抽提液稀释至乙醇浓度为60％，提取液pH＝5.0，加入50mlAB-8树脂慢速搅拌吸附14h；先用50％乙醇水溶液200ml洗涤，洗涤液弃去，再用80％乙醇水溶液300ml洗脱，收集洗脱液；洗脱液减压蒸馏(0.8bar，80℃)，浓缩至干，用20ml的二氯甲烷溶解，过滤后，加入40ml的异丙醇，置于冰箱4℃中，缓慢搅拌结晶；将结晶液过滤，得到无色晶体，60℃真空干燥，得纯度92.8％的柠檬苦素成品。实施例3将经水洗涤后的柚籽，置于烘干箱中65℃烘干，粉碎至30目得粉料；称量柚籽粉料60克，用滤纸包裹后，置于索氏提取仪中，用70％乙醇水溶液1650ml在70℃温度下，连续抽提2次，收集抽提液；将抽提液稀释至乙醇浓度为40％，提取液pH＝4.0，加入50mlAB-8树脂慢速搅拌吸附17h；先用40％乙醇水溶液200ml洗涤，洗涤液弃去，再用70％乙醇水溶液300ml洗脱，收集洗脱液；洗脱液减压蒸馏(0.8bar，80℃)，浓缩至干，用20ml的二氯甲烷溶解，过滤后，加入40ml的异丙醇，置于冰箱4℃中，缓慢搅拌结晶；将结晶液过滤，得到无色晶体，60℃真空干燥，得纯度95.6％的柠檬苦素成品。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从香柚籽中提取柠檬苦素的工艺，其特征在于，包括下述步骤：(1) 柚籽预处理：柚籽经水洗涤、干燥后，粉碎至20～40 目；(2) 抽提：所述步骤(1) 制得的柚籽粉末料，以60％～ 80％乙醇水溶液作为溶剂， 65℃～75℃热回流抽提1.5h～2.5h，收集抽提液；(3) 纯化：所述步骤(2) 抽提液稀释至乙醇浓度为40％～ 60％，pH 为3.0～5.0，以非极性大孔吸附树脂吸附14‑20h，以30％～ 50％乙醇水溶液洗涤，洗涤液弃去；再以60％～80％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；(4) 浓缩、溶解：所述步骤(3)洗脱液减压浓缩至干，用二氯甲烷溶解后过滤；(5) 结晶：所述步骤(4) 得到的二氯甲烷过滤液中，加入2 倍体积异丙醇，冷却至4℃，缓慢搅拌结晶；(6) 过滤和干操：所述步骤(5) 得到晶体物过滤，50℃～ 70℃真空干燥。

【技术特征摘要】
1.一种从香柚籽中提取柠檬苦素的工艺，其特征在于，包括下述步骤：(1)柚籽预处理：柚籽经水洗涤、干燥后，粉碎至20～40目；(2)抽提：所述步骤(1)制得的柚籽粉末料，以60％～80％乙醇水溶液作为溶剂，65℃～75℃热回流抽提1.5h～2.5h，收集抽提液；(3)纯化：所述步骤(2)抽提液稀释至乙醇浓度为40％～60％，pH为3.0～5.0，以非极性大孔吸附树脂吸附14-20h，以30％～50％乙醇水溶液洗涤，洗涤液弃去；再以60％～80％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；(4)浓缩、溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：李华群，陈春林，
申请(专利权)人：重庆都好生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50