一种从柚核中提取柠檬苦素的工艺制造技术

一种从柚核中提取柠檬苦素的工艺，其特征在于依次包括下述步骤：（１）柚核预处理：水洗涤、干燥后，粉碎至２０～４０目；（２）提取：柚核粉末料，以乙醇水溶液作为溶剂，９０℃～１００℃热回流抽提；（３）杂质分离：以大孔吸附树脂分离杂质，依次以３０％～５０％乙醇水溶液淋洗，淋洗液弃去；再以６０％～８０％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；（４）所述洗脱液减压浓缩至干，用二氯甲烷溶解后过滤；加入２倍体积异丙醇，冷却至４℃，缓慢搅拌结晶；再过滤和干操，得最终产品。本发明专利技术的有益效果是：利用热回流提取、吸附树脂分离杂质等过程，从柚核中提出了含量大于９０％的柠檬苦素。该工艺简单，淋洗剂可回收，循环利用，成本低，可进行大规模生产应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化学分离纯化
，具体涉及从柚核中分离纯化提取柠 檬苦素的工艺。
技术介绍
柠檬苦素(limonin)即黄柏内酯，又称吴茱萸苦素、白藓内酯，是一种三 薛类植物次生代谢产物，主要存在于芸香科和楝科植物中。科属芸香科的柚子果 实中含有柠檬苦素，以柚核中含量最大。柠檬苦素具有抗癌、镇痛、除虫和杀虫、 调节体内胆固醇水平，防止动脉粥样化等功效。因此分离纯化柠檬苦素引起了生 化科研工作者的重视，文献中己有相关分离纯化柠檬苦素工艺的报道。中国专利CN1279242A中提供了 一种从芸香科果实中提取柠檬苦素的工艺。 该工艺先将芸香科果核烘干粉碎，再用石油瞇彻底脱脂三次，然后用丙酮抽提柠 檬苦素，提取液蒸发浓缩至干后，用二氯甲烷和异丙醇的混合液溶解浓縮物，过 滤后，置于低温下，进行结晶，产品用二氯甲烷和异丙醇混合液重结晶两次，得 到柠檬苦素产品。该工艺在脱脂过程中，需消耗大量溶剂、电能，成本高，操作 繁瑣且工艺不易放大。施英等应用大孔吸附树脂对梓檬苦素类似物进行了分离纯化(施英，徐玉娟， 吴娱明等.桔核中柠檬苦素类物质纯化工艺的研究[J].广东农业科学，2006， 11: 70 - 72 ),该工艺用桔核提取的浓缩水溶液，经大孔吸附树脂吸附分离，用乙醇 水溶液淋洗，收集淋洗液后，冷冻干燥，得到柠檬苦素类似物。该技术能够将柠 檬苦素类似物分离出来，但含量不高，且不能分离出柠檬苦素单体。综上所述，现有技术工艺复杂，成本高，多为实验室釆用，不能大规模生产。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种简单实用、溶剂淋洗剂可回收循环利用，成本低， 适于进行大规模生产柠檬苦素制品的工艺。 为达到上述目的，采用的技术方案是一种从柚核中分离纯化柠檬苦素的工艺，其特征在于依次包括下述步骤 U)柚核预处理柚核经水洗涤、干燥后，粉碎；(2) 提取柚核粉末料，以60% ~80%乙醇水溶液作为溶剂，90°C~100°C热回流抽提，得提取液；(3) 杂质分离步骤(2)所述提取液稀释至乙醇浓度为40%-60%, pH为 3.0-5.0,以大孔吸附树脂分离杂质，以30% ~50%乙醇水溶液淋洗，淋洗液 弃去；再以60%~80%乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；(4) 浓缩、溶解步骤(3)所述洗脱液减压浓缩至干，用二氯甲烷溶解后过滤；(5) 结晶步骤(4)得到的二氯甲烷过滤液中，加入2倍体积异丙醇，冷却 至4'C，缓慢搅拌结晶；(6) 过滤和干操步骤(5)得到晶体物过滤，5(TC 7(TC真空干燥。所述大孔吸附树脂是骨架为苯乙烯-二乙烯苯共聚物的非极性吸附树脂 巿售HZ816、 HZ818、 HZ820中的一种。步骤(l)中将经过水洗涤、6(TC 7(TC干燥6-8小时至衡重的柚核粉碎至 20目~60目。步骤(2)中，热回流提取仪中柚核粉末料，粉末料重量(g):乙醇溶液(ml) 为1 : ( 4 - 6 )，进行20 ~ 35次的连续抽提。经步骤(6)过滤和干操后，干燥成品用HPLC (Agilent 1100 Series)高 效液相色谱仪测量含量，色谱柱ZORBAX SB-C18 (4. 6mmxl00mm, 3.5); 流动 相甲醇乙腈水=45 : 10 : 45 (v/v);流速0.6ml/min;检测波长 210nm;柱温20。C。结晶母液减压蒸干，用乙醇溶解后，返回大孔吸附树脂柱吸附分离。本专利技术的有益效果是利用热回流提取、吸附树脂分离杂质等过程，从柚核中提出了纯度大于90%的柠檬苦素。工艺简单，淋洗剂可回收循环利用，成本低，适合大规模生产应用。 附图说明图1为从柚核中分离纯化柠檬苦素的工艺流程图。 具体实施例方式以下结合实施例对本专利技术作进一步说明，但并不限于实施例。实施例中浓度非特别注明，均为体积百分浓度。淋洗液可回收循环使用。实施例1将经水洗涤后的柚核，置于烘干箱中65'C烘7小时直至衡重，粉碎至20目 得粉料。称量柚核粉料60克，用滤纸包裹后，置于索氏提取仪中，用60%乙醇 水溶液300ml在IO(TC温度下，连续抽提30次。提取液稀释至乙醇浓度为50%， 提取液pH-3.0,流过装有50ml HZ816树脂柱，流速lml/min。先用40%乙醇 水溶液200ml淋洗，流速为lml/min,得到淋洗液弃去，再用70%乙醇水溶液 300ml洗脱，流速为lml/min,收集洗脱液，减压蒸馏(0. 8bar， 80°C ),浓縮至 干，用20ml的二氯甲烷溶解，过滤后，加入40ml的异丙醇，置于冰箱4'C中， 缓慢搅拌结晶。将结晶液过滤，得到无色晶体，6(TC真空干燥，得纯度91.2% 的柠檬苦素成品约159mg。 实施例2将实施例1中大孔吸附树脂HZ816换成HZ818,其他与实施例l相同，得到 纯度为92. 5%的柠檬苦素成品约为150mg。 实施例3将洗涤后的柚核，置于烘干箱中6(TC烘8小时直至衡重，将烘干的柚核粉 碎至40目，得粉料。称量60克，用滤纸包裹后，置于索氏提取仪中，用70% 乙醇水溶液300ml在ll(TC温度下，连续抽提25次。提取液稀释至乙醇浓度为 50%，提取液pH = 4. 0,流过装有50ml HZ818树脂柱，流速lml/min。分别用 45%乙醇水溶液150ml淋洗，流速为lml/min,得到淋洗液弃去，再用80%乙醇 水溶液250ml洗脱，流速为lml/min,收集洗脱液，减压蒸馏(0. 8bar， 8(TC )， 浓缩至干，用20ml的二氯甲垸溶解，过滤后，加入40ml的异丙醇，置于冰箱4 'C中，缓慢搅拌结晶。将结晶液过滤，得到无色晶体，65'C真空干燥，可以得到 纯度为90. 5。/。的柠檬苦素成品约149mg。 实施例4将实施例3中大孔吸附树脂HZ818换成HZ820,其他同实施例3操作，可得 纯度为90. 3%的柠檬苦素成品约为151mg。 实施例5将洗涤后的柚核，置于烘干箱中7(TC烘干6小时，将烘干的柚核粉碎至60 目，得粉料。称量60克，用滤纸包裹后，置于索氏提取仪中，用80%乙醇水溶 液300ml在IO(TC温度下，连续抽提30次。提取液稀释至乙醇浓度为50 % ,提 取液pH-3.5,流过装有50ml HZ820树脂柱，流速lml/min。分别用200ml体积 分数50%乙醇水溶液淋洗，流速为lml/min,弃去淋洗液，再用70%乙醇水溶 液300ml洗脱，流速为lml/min,收集洗脱液减压蒸馏(0. 8bar, 8fTC ),浓缩至 干，用20ml的二氯甲烷溶解，过滤后，加入40ml的异丙醇，置于冰箱4'C中， 缓慢搅拌结晶。将结晶液过滤，得到无色晶体，6(TC真空干燥，得纯度92.3% 的柠檬苦素成品约154mg。 实施例6将实施例5中大孔吸附树脂HZ820换成HZ816,其他同实施例5 —样操作， 得纯度为91.8%的柠檬苦素成品约为157mg。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从柚核中提取柠檬苦素的工艺，其特征在于依次包括下述步骤：　（１）柚核预处理柚核经水洗涤、干燥后，粉碎至２０～４０目；　（２）提取所述步骤（１）制得的柚核粉末料，以６０％～８０％乙醇水溶液作为溶剂，９０℃～１００℃热回流抽提，得提取液；　（３）杂质分离步骤（２）所述提取液稀释至乙醇浓度为４０％～６０％，ｐＨ为３．０～５．０，以非极性大孔吸附树脂分离杂质，以３０％～５０％乙醇水溶液淋洗，淋洗液弃去；再以６０％～８０％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；　（４）浓缩、溶解步骤（３）所述洗脱液减压浓缩至干，用二氯甲烷溶解后过滤；　（５）结晶步骤（４）得到的二氯甲烷过滤液中，加入２倍体积异丙醇，冷却至４℃，缓慢搅拌结晶；　（６）过滤和干操步骤（５）得到晶体物过滤，５０℃～７０℃真空干燥。

【技术特征摘要】
1. 一种从柚核中提取柠檬苦素的工艺，其特征在于依次包括下述步骤(1)柚核预处理柚核经水洗涤、干燥后，粉碎至20～40目；(2)提取所述步骤(1)制得的柚核粉末料，以60％～80％乙醇水溶液作为溶剂，90℃～100℃热回流抽提，得提取液；(3)杂质分离步骤(2)所述提取液稀释至乙醇浓度为40％～60％，pH为3.0～5.0，以非极性大孔吸附树脂分离杂质，以30％～50％乙醇水溶液淋洗，淋洗液弃去；再以60％～80％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；(4)浓缩、溶解步骤(3)所述洗脱液减压浓缩至干，用二氯甲烷溶解后过滤；(5)结晶步骤(4)得到...

【专利技术属性】
技术研发人员：江邦和，王辉，徐环昕，宁方红，张磊，刘坐镇，
申请(专利权)人：华东理工大学华昌聚合物有限公司，上海华震科技有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]