含有肿瘤排斥抗原前体或肿瘤排斥抗原以及佐剂和/或生长因子的组合物制造技术

公开了具有增强的免疫原性的组合物。该组合物含有一种或多种肽类，当这些肽类与一种细胞表面分子如ＭＨＣ，ＨＬＡ或Ｂ细胞受体结合时，能够引起免疫应答。该组合物含有加强免疫应答的佐剂如皂苷。尤其优选的组合物是能够刺激胞溶性Ｔ细胞应答的组合物，如那些能够满足ＭＨＣ结合标准的肽类，例如衍生于肿瘤排斥抗原前体的肽类，包括ＭＡＧＥ，ＢＡＧＥ以及ＧＡＧＥ衍生肽类。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于产生针对肿瘤排斥抗原前体(“TRAPs”)和肿瘤排斥抗原(“TRAs”)分子的免疫应答的组合物。其免疫应答包括，抗TRAPs和TRAs的抗体的产生，以及对TRA与主要组织相容性分子的复合物具有特异性的T细胞的产生。这些T细胞和抗体能够在小鼠，大鼠，兔，绵羊，山羊和其它非人类动物中产生，然后用于诊断肿瘤的存在。通过将其给予具有癌变症状的对象或细胞转化已经发生的个体，该组合物还可用于治疗以引起针对肿瘤、癌细胞和转化细胞的免疫应答。这些癌变包括黑素瘤或发育异常的痣。背景和现有技术针对宿主生物对肿瘤细胞的识别或这种识别作用的缺失的研究已在许多不同的分支方向上进行。对该领域的了解意味着对基础免疫学和肿瘤学的一些了解。早期对小鼠肿瘤的研究揭示了当将小鼠肿瘤移植到同源动物中会显现导致肿瘤细胞排斥反应的分子。这些分子在受体动物中被T细胞“识别”，并唤起胞溶性T细胞的反应，溶解移植的细胞。这种现象首先在体外通过化学致癌物，如甲基胆蒽诱发的肿瘤中发现。还发现在每种肿瘤中，肿瘤表达的抗原及其引发的T细胞反应是不同的。见Prehn，et al.，J.Natl.Canc.Inst.18769-778(1957)；Klein，et al.，Cancer Res.3326-333(1943)；Basombrio，Cancer Res.302458-2462(1970)，这些文献教导了用化学致癌物对肿瘤的诱导以及细胞表面抗原的不同。这种抗原被称作肿瘤特异性移植抗原或“TSTAs”。在观察到此类由化学诱变剂引起的抗原之后，类似的结果在体外用紫外线照射产生的肿瘤中也有发现。见Kripke，J.Natl.Canc.Ins.53333-1336(1974)。尽管在如上所述的肿瘤中观察到T细胞介导的免疫应答，但自发性肿瘤一般被认为是非免疫原性的。因此据信在带有肿瘤的对象中不存在可引起免疫应答的抗原。见Hewitt，et al.，Brit.J.Cancer，33241-259(1976)。呈递tum-抗原家族的细胞株是通过诱变小鼠肿瘤细胞或细胞株得到的免疫原性变异体。见Boon et al.，J.Exp.Med.1521184-1193(1980)，该文献引入本文作参考。详细地说，tum-抗原是通过突变在同源小鼠中不产生免疫应答并形成肿瘤的肿瘤细胞(即tum+细胞)而得到的。当这些tum+细胞被诱变时，它们在同源小鼠中被排斥，不能形成肿瘤(tum-)，见Boon et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 74272(1977)，该文献引入本文作参考。许多肿瘤类型都显示出这一现象。见Frost et al.，Cancer Res.43125(1983)。tum-变异体似乎不能形成肿瘤，因为它们能引起免疫排斥过程。证实这个假说的证据包括不能正常形成肿瘤的tum-变异体在那些免疫系统被亚致死剂量的射线破坏的小鼠中又恢复了形成肿瘤的能力。见Van Pel et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 765282-5285(1979)。而且，外周注射的肥大细胞瘤细胞株P815的tum-细胞指数增长12-15天，然后这些细胞在给予巨噬细胞和淋巴细胞几天后就消失了(Uyttenheve et al.，J.Exp.Med.1521175-1183(1980))。类似的证据还包括，观察到获得免疫记忆的小鼠，其在通过射线处理破坏免疫系统后，在相同的tum-变异体的攻击中能够存活下来。(Boon et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 74272-275(1977)；Van Pel et al.，同上；Uyttenheve et al.，同上)。后来的研究发现，当诱变自发性肿瘤时，能产生能引起免疫应答的免疫原性变异体。事实上，这些变异体能够产生针对原始肿瘤的免疫保护性反应。见Van Pel et al.，J.Exp.Med.1571192-2001(1983)。因此，已经发现在一个是同源排斥反应靶的肿瘤中产生一种叫做“肿瘤排斥抗原”的呈递是可能的。类似的结果在外源基因导入自发性肿瘤时也已得到。见Fearson et al.，Cancer Res.482975-1980(1988)。已识别出一类抗原，它存在于肿瘤细胞表面，并能够被胞溶性T细胞所识别，导致细胞溶解。这类抗原在此后将被称作“肿瘤排斥抗原”或“TRAs”。TRAs可能会也可能不会引起抗体反应。已通过对胞溶性T细胞的体外鉴定研究，即通过特定的胞溶性T细胞(以下称“CTL”)对抗原的鉴定研究，对这些抗原进行了研究。CTL通过识别呈递的肿瘤排斥抗原而增殖，从而呈递这些抗原的细胞被溶解。鉴定研究已经鉴定出能够特异性溶解表达这类抗原的细胞的CTL克隆。这类工作的例子可见以下的文献Levy etal.，Adv.Cancer Res.241-59(1977)；Boon et al.，J.Exp.Med.1521184-1193(1980)；Brunner et al.，J.Immunol.1241627-1634(1980)；Maryanski et al..Eur.J.Immunol.1241627-1634(1980)；Maryanski et al.，Eur.J.Immunol.32406-412，(1982)；Palladino etal.，Canc.Res.475074-5079(1 987)。被CTL识别的其它种类的抗原也要求进行这类分析，其它抗原种类包括主要组织相容性抗原，雄性特异性H-Y抗原，以及一类在此讨论的称作“tum-”抗原的抗原。一种如上所述的肿瘤的例子是P815。见DePlaen et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 852274-2278(1988)；Szikora et al.，EMBO J.91041-1050(1990)；Sibille et al.，J.Exp.Med.17235-45(1990)，这些文献引入本文作参考。P815肿瘤是一种肥大细胞瘤，用甲基胆蒽诱变于DBA/2小鼠，可以作为体外肿瘤或细胞株培养。P815细胞株诱变后产生许多tum-变异体，包括P91A变异体(DePlaen，同上)；35B(Szikora，同上)；以及P198(Sibille，同上)。与肿瘤排斥抗原相反----这是一个关键----tum-抗原仅仅在诱变之后呈递。肿瘤排斥抗原存在于没有诱变的给定肿瘤的细胞中。因此，如参考文献中所述，一个细胞株可能是tum+的，例如“P1”细胞株，也能被诱发产生tum-变异体。既然tum-表型与其亲本细胞株不同，可以预料，tum-细胞株的DNA与其亲本tum+细胞株相比也有区别，而且这种区别可以被开发用来定位tum-细胞中的感兴趣的基因。结果，发现tum-变异体如P91A，35B和P198的基因与其正常等位基因不同，在基因的编码区发生了点突变。见Szikora and Sibille，同上；以及Lurquin et al.，Cell 58293-303(1989)。已证明本专利技术的TRAs不属于这种情况。这些文献也说明了源于tum-抗原的肽类被Ld分子所呈递，以便本文档来自技高网...

【技术保护点】
组合物，包括：（ｉ）一种肿瘤排斥抗原前体或肿瘤排斥抗原，以及至少如下之一：（ｉｉ）一种药学上可接受的佐剂，以及一种Ｔ或Ｂ细胞生长因子。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：皮埃尔范德布鲁根，蒂尔瑞博恩法勒尔，贝努瓦范登艾恩德，
申请(专利权)人：路德维格癌症研究所，
类型：发明
国别省市：US[美国]