用于免疫治疗的组合物和方法技术

本发明专利技术涉及通过细胞免疫疗法(例如通过过继转移肿瘤特异性基因修饰的淋巴细胞亚群)产生和/或增加免疫应答的方法和组合物。本发明专利技术提供了包含基因修饰的淋巴细胞的组合物，其表达具有调节免疫系统和先天性及适应性免疫响应能力的至少两个转基因。应能力的至少两个转基因。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于免疫治疗的组合物和方法
[0001]交叉引用
[0002]本申请请求2019年11月14日提交的申请号为62/935308的美国临时专利的根据《美国法典》第35卷第119(e)条享有的优先权。上述申请通过引用全部并入本文。


[0003]本专利技术一般涉及治疗受试者癌症或肿瘤的组合物和方法，更具体地，涉及通过调节受试者的免疫系统治疗受试者癌症或肿瘤的组合物和方法。

技术介绍

[0004]过继性细胞转移或过继性细胞治疗(ACT)是治疗癌症患者的一种有希望的治疗方法。然而，它面临着两大障碍：癌症患者体内转移细胞的短期生存状况和恶性免疫抑制肿瘤微环境。
[0005]为了克服这些限制，提出了几种选择。例如，一些试验测试了白细胞介素2(IL
‑
2)和ACT的同时施用。IL
‑
2是一种强效的免疫刺激剂；因此，它可以增强免疫反应，提高转移细胞的存活率。然而，由于与IL
‑
2相关的毒性，这种方法是不成功的。美国专利7381405描述了为了ACT制备可以分泌IL
‑
2的IL
‑
2转导的淋巴细胞的方法。这种方法基于这样的假设，即淋巴细胞会分泌自己的生长因子(如IL
‑
2)，从而减少对体内生存的其他外源因子的依赖。尽管在体外环境中取得了成功的结果，但临床试验确定了这种方法是无效的。IL
‑
2转导的淋巴细胞在治疗癌症方面并不比未转导的淋巴细胞更有效(Heemskerk等人.,Human Gene Therapy,2008)。
[0006]嵌合抗原受体(CAR)T细胞的出现为改善ACT提供了有用的工具TRUCKs(T cells redirected foruniversal cytokine killing)(国际公布文本WO 2017/108805)和Armored CAR(美国专利10124023)是CAR T细胞的代表性示例，它们分别还被设计用于分泌重组白细胞介素
‑
12(IL
‑
12)和CD40L。然而，这些策略也有缺点。例如，在TRUCK上，高转基因IL
‑
12产量限制了T细胞的扩增并增加了凋亡，显示了有限的治疗效果。此外，到目前为止，armored CAR T细胞的临床应用仅限于液体肿瘤。
[0007]实体肿瘤及其微环境给ACT疗法的成功带来了一系列挑战。这些挑战包括肿瘤的有效转运和渗透和克服肿瘤介导的免疫抑制。尽管做出了许多努力，但最先进的ACT疗法并不能在免疫抑制实体瘤微环境中提供长期疗效的功能持久性。
[0008]因此，迫切需要鉴别可以为细胞提供功能持久性和/或可以改变细胞因子环境以克服免疫抑制性肿瘤微环境的新的ACT疗法。

技术实现思路

[0009]本专利技术在多个方面解决了上述需求。在一个方面，本专利技术提供了一种组合物，其包含至少表达两个转基因(例如，治疗性转基因)的多个转基因淋巴细胞，用于调节受试者的免疫系统。
[0010]在一些实施方案中，转基因选自抗体、抗体片段、受体、诱饵、检查点阻断调节剂、细胞因子、趋化因子、激素、细胞消除标签及其组合。
[0011]在一些实施方案中，所述诱饵选自PD1、CTLA4、LAG3、VEGFR1、TIM3、TIGIT和SIRPα诱饵。在一些实施方案中，所述诱饵是PD1诱饵。在一些实施方案中，所述PD
‑
1诱饵是PD
‑
1IgG4(例如PD
‑
1IgG4 Fc)诱饵。
[0012]在一些实施方案中，所述细胞因子选自LIGHT或其变体/片段、IL
‑
33或其变体/片段、IL
‑
2或其变体/片段、IL
‑
15或其变体/片段、IL
‑
12或其变体/片段，和CD40L或其变体/片段。在一些实施方案中，所述细胞因子是突变细胞因子。
[0013]在一些实施方案中，所述细胞消除标签选自tEGFR、Her2、CD20和CD19。
[0014]在一些实施方案中，所述至少两个转基因包含PD
‑
1诱饵或其变体/片段、IL
‑
2变体/片段、LIGHT或其变体/片段、IL
‑
33或其变体/片段和CD40L或其变体/片段中的两个或多个。在一些实施方案中，所述至少两个转基因还包含截断EGFR(tEGFR)或其变体/片段、截断HER2(tHER2)或其变体/片段，或CD20或其变体/片段。在一些实施方案中，所述PD
‑
1诱饵或其变体/片段和tEGFR或其变体/片段(或tHER2或其变体/片段、CD20或其变体/片段、CD19或其变体/片段)包含在同一载体上。
[0015]在一些实施方案中，所述至少两个转基因包括：(a)PD
‑
1诱饵或其变体和tEGFR或其变体；(b)PD
‑
1诱饵或其变体和IL
‑
2变体；(c)PD
‑
1诱饵或其变体和LIGHT或其变体；(d)PD
‑
1诱饵或其变体和IL
‑
33或其变体；(e)PD
‑
1诱饵或其变体和CD40L或其变体；(f)PD
‑
1诱饵或其变体、IL
‑
2变体和IL
‑
33或其变体；(g)PD
‑
1诱饵或其变体、tEGFR或其变体和IL
‑
2变体；(h)PD
‑
1诱饵或其变体、tEGFR或其变体和LIGHT或其变体；(i)PD
‑
1诱饵或其变体、tEGFR或其变体和IL
‑
33或其变体；(j)PD
‑
1诱饵或其变体、tEGFR或其变体和CD40L或其变体；(k)PD
‑
1诱饵或其变体、tEGFR或其变体、IL
‑
2变体和IL
‑
33或其变体；(l)PD
‑
1诱饵或其变体、tEGFR或其变体、IL
‑
2变体和CD40L或其变体；或(m)PD
‑
1诱饵或其变体、tEGFR或其变体、IL
‑
33变体和CD40L或其变体。
[0016]在一些实施方案中，所述PD
‑
1诱饵包含SEQ ID NO:1
‑
4、6
‑
17、42、44、47
‑
48和51
‑
52中任一条的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:1
‑
4、6
‑
17、42、44、47
‑
48和51
‑
52中任一条具有至少80％一致性的氨基酸序列。
[0017]在一些实施方案中，所述IL
‑
2变本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种组合物，包含基因修饰的淋巴细胞，所述多个淋巴细胞表达用于调节受试者免疫系统的至少两个转基因。2.如权利要求1所述的组合物，其中所述转基因选自抗体、抗体片段、受体、诱饵、检查点阻断调节剂、细胞因子、趋化因子、激素、细胞消除标签及其组合。3.如权利要求2所述的组合物，其中所述诱饵选自PD1、CTLA4、LAG3、VEGFR1、TIM3、TIGIT和SIRPα诱饵。4.如权利要求3所述的组合物，其中所述诱饵是PD1诱饵。5.如权利要求4所述的组合物，其中所述PD
‑
1诱饵是PD
‑
1.IgG4诱饵。6.如权利要求2所述的组合物，其中所述细胞因子选自：LIGHT或其变体、IL
‑
33或其变体、IL
‑
2或其变体、IL
‑
15或其变体、IL
‑
12或其变体和CD40L或其变体。7.如权利要求6所述的组合物，其中所述细胞因子是突变细胞因子。8.如权利要求2所述的组合物，其中所述细胞消除标签选自截断的EGFR(tEGFR)、HER2、CD20和CD19。9.如前述权利要求任一项所述的组合物，其中所述至少两个转基因包含PD
‑
1诱饵或其变体、IL
‑
2变体、LIGHT或其变体、IL
‑
33或其变体和CD40L或其变体中的两个或多个。10.如权利要求9所述的组合物，其中所述至少两个转基因还包含tEGFR或其变体、截断的HER2(tHER2)或其变体、CD20或其变体、或CD19或其变体。11.如权利要求9或10所述的组合物，其中所述至少两个转基因包含：(a)所述PD
‑
1诱饵或其变体和所述tEGFR或其变体；(b)所述PD
‑
1诱饵或其变体和所述IL
‑
2变体；(c)所述PD
‑
1诱饵或其变体和所述LIGHT或其变体；(d)所述PD
‑
1诱饵或其变体和所述IL
‑
33或其变体；(e)所述PD
‑
1诱饵或其变体和所述CD40L或其变体；(f)所述PD
‑
1诱饵或其变体、所述IL
‑
2变体和所述IL
‑
33或其变体；(g)所述PD
‑
1诱饵或其变体、所述tEGFR或其变体和所述IL
‑
2变体；(h)所述PD
‑
1诱饵或其变体，所述tEGFR或其变体和所述LIGHT或其变体；(i)所述PD
‑
1诱饵或其变体、所述tEGFR或其变体和所述IL
‑
33或其变体；(j)所述PD
‑
1诱饵或其变体、所述tEGFR或其变体和所述CD40L或其变体；(k)所述PD
‑
1诱饵或其变体、所述tEGFR或其变体、所述IL
‑
2变体和所述IL
‑
33或其变体；(l)所述PD
‑
1诱饵或其变体、所述tEGFR或其变体、所述IL
‑
2变体和所述CD40L或其变体；或(m)所述PD
‑
1诱饵或其变体、所述tEGFR或其变体、所述IL
‑
33变体和所述CD40L或其变体。12.如权利要求10所述的组合物，其中所述PD
‑
1诱饵或其变体与所述tEGFR或其变体、所述tHER2或其变体、所述CD20或其变体、所述CD19或其变体包含在同一载体上。13.如权利要求4
‑
5和9
‑
11中任一项所述的组合物，其中所述PD
‑
1诱饵包含SEQ ID NO:1
‑
4、6
‑
17、42、44、47
‑
48和51
‑
52中任一条的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:1
‑
4、6
‑
17、42、44、47
‑
48和51
‑
52中任一条具有至少80％一致性的氨基酸序列。
14.如权利要求6
‑
13中任一项所述的组合物，其中所述IL
‑
2变体包含SEQ ID NO:21
‑
23中任一条的氨基酸序列或与SEQ ID NO:21
‑
23中任一条具有至少80％一致性的氨基酸序列。15.如权利要求6
‑
14中任一项所述的组合物，其中所述IL
‑
33包含SEQ ID NO:25和27中任一条的氨基酸序列或与SEQ ID NO:25和27中任一条具有至少80％一致性的氨基酸序列。16.如权利要求6
‑
15中任一项所述的组合物，其中所述LIGHT包含SEQ ID NO:28
‑
29和31中任一条的氨基酸序列或与SEQ ID NO:28
‑
29和31中任一条具有至少80％一致性的氨基酸序列。17.如权利要求6
‑
16中任一项所述的组合物，其中所述CD40L包含SEQ ID NO:32
‑
34、36和38中任一条的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:32
‑
34、36和38中任一条具有至少80％一致性的氨基酸序列。18.如权利要求2和10
‑
17中任一项所述的组合物，其中：所述tEGFR包含与SEQ ID NO:40具有至少80％一致性的氨基酸序列或SEQ ID NO:40的氨基酸序列；所述HER2包含与SEQ ID NO:45具有至少80％一致性的氨基酸序列或SEQ ID NO:45的氨基酸序列；所述CD20包含与SEQ ID NO:49具有至少80％一致性的氨基酸序列或SEQ ID NO:49的氨基酸序列。19.如权利要求2所述的组合物，其中所述抗体或抗体片段选自VEGF、TGF
‑
B、4
‑
1BB、CD28、CD27、NKG2D、PD1、PDL1和CTLA4抗体。20.如权利要求19所述的组合物，其中所述抗体是PD1抗体。21.如前述权利要求任一项所述的组合物，其中所述多个淋巴细胞包含至少两个淋巴细胞亚群。22.如前述权利要求任一项所述的组合物，其中所述多个淋巴细胞由两个淋巴细胞亚群组成。23.如权利要求21或22所述的组合物，其中所述多个淋巴细胞的每个亚群至少表达一个转基因。24.如权利要求21
‑
23中任一项所述的组合物，其中所述至少两个转基因彼此不同。25.如权利要求21
‑
24中任一项所述的组合物，其中所述多个淋巴细胞包括：(i)至少表达两个转基因的第一亚群；和(ii)至少表达两个转基因的第二亚群，其中所述第一亚群的至少一个转基因不同于所述第二亚群的转基因，或者其中所述第一亚群的至少一个转基因与所述第二亚群的转基因相同。26.如权利要求25所述的组合物，其中：(i)所述第一亚群至少表达PD
‑
1诱饵或其变体和IL
‑
2变体，所述第二亚群至少表达PD
‑
1诱饵或其变体和LIGHT或其变体；(ii)所述第一亚群至少表达PD
‑
1诱饵或其变体和IL
‑
2变体，所述第二亚群至少表达PD
‑
1诱饵或其变体和IL
‑
33或其变体；(iii)所述第一亚群至少表达PD
‑
1诱饵或其变体和IL
‑
2变体，所述第二亚群至少表达PD
‑
1诱饵或其变体和CD40L或其变体；(iv)所述第一亚群至少表达PD
‑
1诱饵或其变体和LIGHT或其变体，所述第二亚群至少表达PD
‑
1诱饵或其变体和IL
‑
33或其变体；或(v)所述第一亚群至少表达PD
‑
1诱饵或其变体和LIGHT或其变体，所述第二亚群至少表
达PD
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔治，
申请(专利权)人：路德维格癌症研究所，
类型：发明
国别省市：