一种淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂及其用途，该阻断剂包含雷公藤红素，能够用于制备治疗肥胖、糖尿病、急性肺损伤以及抗炎症和抗动脉粥样硬化的药物或药物组合物。本发明专利技术的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂能够与MD2蛋白结合的疏水区域结合，抑制MD2蛋白的活化，还能阻断MD2活化剂LPS与MD2的结合，阻断下游的炎症反应。

Blocking agent for lymphocyte antigen 96 protein activation and uses thereof

The invention discloses a blocking agent and a use of activated lymphocyte antigen 96 protein, the antagonist containing tripterine, can be used for the preparation of the treatment of obesity, diabetes, acute lung injury, anti-inflammatory and anti atherosclerotic drug or drug combination. The invention of the lymphocyte antigen 96 activation agent binds to the hydrophobic region blocking the binding of MD2 protein, inhibiting the activation of MD2 protein, but also inhibit the combination of MD2 activator LPS and MD2, inhibit inflammatory reaction downstream.

【技术实现步骤摘要】
一种淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂及其用途
本专利技术涉及一种淋巴细胞抗原96蛋白(MD2)，具体涉及一种淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂及其用途。
技术介绍
淋巴细胞抗原96(Lymphocyteantigen96)，也称MD2蛋白，是人细胞膜上的蛋白，由LY96基因编码。MD2蛋白能与一些化合物结合，如细菌脂多糖(lipopo-lysaccharide,LPS)，它是革兰阴性菌细胞壁外膜中的重要组成成分，在革兰阴性细菌感染及疾病演化中有重要作用，被认为是造成全身性炎症综合征的主要原因。细菌成份脂多糖(LPS)与Toll样受体4蛋白(Toll-likereceptor4,TLR4)及MD2蛋白复合物结合，TLR4蛋白活化后能够进一步激活核转录因子(NF-κB)，从而合成一系列的炎症因子，引起炎症反应。虽然TLR4蛋白在整个炎症反应信号途径中起着主要作用，但是在一些临床前研究或临床实验中靶向TLR4的试剂均未取得成功，研究发现LPS直接与MD2蛋白结合，并非直接与TLR4直接结合，MD2蛋白是TLR4在细胞内的分布以及TLR4和LPS的识别所必需的蛋白。因此，靶向阻断MD2蛋白与LPS的结合可以用于治疗炎症。雷公藤红素是一个具有多种生物活性的天然产物，来源于中药雷公藤的根皮，属三萜类化合物。雷公藤红素是治疗类风湿病雷公藤片、雷公藤多甙片等制剂的有效成分之一。研究表明，它有很强的抗氧化的作用，抗癌症新生血管生成的作用，以及抗炎症的作用。目前，尚未报道雷公藤红素具有阻断MD2活化的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂及其用途，该阻断剂能够与MD2蛋白结合的疏水区域结合，抑制MD2蛋白的活化，进而阻断下游的炎症反应。为了达到上述目的，本专利技术提供了一种淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂及其用途，该阻断剂包含雷公藤红素。一种根据所述的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂作为制备治疗肥胖的药物或药物组合物的用途，其特征在于，所述的药物组合物包含雷公藤红素或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。一种根据所述的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂作为制备治疗糖尿病的药物或药物组合物的用途，所述的药物组合物包含雷公藤红素或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。一种根据所述的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂作为制备抗动脉粥样硬化的药物或药物组合物的用途，所述的药物组合物包含雷公藤红素或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。一种根据所述的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂作为制备抗炎症的药物或药物组合物的用途，所述的药物组合物包含雷公藤红素或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。一种根据所述的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂作为制备治疗急性肺损伤的药物或药物组合物的用途，所述的药物组合物包含雷公藤红素或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。本专利技术提供的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂为雷公藤红素，具有以下优点：雷公藤红素与MD2蛋白结合的疏水区域与LPS与MD2蛋白结合的疏水区域相同；雷公藤红素与MD2蛋白结合能够阻断雷公藤红素与MD2蛋白的结合；雷公藤红素与MD2蛋白结合能够抑制MD2蛋白的活化，进而阻断了下游的炎症反应。附图说明图1为雷公藤红素的化学分子式及三维结构图。图2为本专利技术的实验例1的分子对接图。图3为本专利技术的实验例2的流式细胞仪检测雷公藤红素的荧光强度图(图3的A为蛋白印迹的条带，图3的B为雷公藤红素荧光强度-细胞数图)。图4为本专利技术的实验例2的流式细胞仪检测雷公藤红素的荧光强度的立体图。图5为本专利技术的实验例3的流式细胞仪检测脂多糖的荧光强度图。图6为本专利技术的实验例3的流式细胞仪检测脂多糖的荧光强度的立体图。图7为本专利技术的实验例3用Westernblot法检测NF-κB蛋白和P-NF-κB蛋白的结果图(图7的A为为蛋白印迹的条带，图7的B为NF-κB蛋白和P-NF-κB蛋白含量的统计图)。具体实施方式以下结合附图和实施例对本专利技术的技术方案做进一步的说明。本专利技术提供了一种淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂，该阻断剂为雷公藤红素。本专利技术的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂能够用于制备治疗与TLR4上调疾病有关的疾病，其具体用途如下：1、制备治疗肥胖的药物或药物组合物目前，肥胖患者越来越多，2015年就已经有大约7亿成年肥胖患者，肥胖是代谢综合征发展的主要因素，胰岛素耐受性和弱炎症反应在肥胖的发病病理中具有重要的作用。肥胖和提高循环游离脂肪酸的水平有关，游离脂肪酸能够激活各种促炎症途径，饱和脂肪酸(saturatedfattyacids，SFAs)能够增强TLR信号和巨噬细胞中核因子kappaB(NF-κB)的活性，并且提高了胰岛素耐受性。TLR信号的增强，使得促炎性级联反应增强，而NF-κB和促炎细胞因子能够阻断“肥胖抑制剂”—瘦素的分泌，而瘦素信号转导通路的抑制可导致肥胖，MD2阻断剂能够抑制TLR4的活性。因此，MD2阻断剂能够用于制备治疗肥胖的药物或药物组合物。2、制备治疗糖尿病的药物或药物组合物TLR4受非细菌物质激活(如饱和脂肪酸)，一旦TLR信号通路被激活,细胞内炎症通路均上调，如应激活化蛋白激酶(JNK)、IKBα(核因子kappaB抑制蛋白)/NF-κB，进而诱导胰岛素抵抗。大鼠在TLR4失去激活功能并给予高脂饮食的情况下，能使肥胖减轻、胰岛素敏感性增加、糖耐量改善、胰岛素诱发的胰岛素受体底物1(IRS-1)和AKT(蛋白激酶B)磷酸化增加，故TLR4在肥胖诱发的胰岛素抵抗中起重要作用，是一个潜在的治疗靶点。因此，MD2阻断剂能够用于制备治疗糖尿病的药物或药物组合物。3、制备抗动脉粥样硬化的药物或药物组合物MD2蛋白在干扰素γ(IFNγ，InterferonGamma)和高葡萄糖刺激基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase，MMP-1)的表达中具有重要的作用，MMP-1是一种调节血管重构和动脉粥样硬化所必需的蛋白酶，对细胞外基质的降解及细胞内多种可溶性因子的调控起重要作用，其主要分解细胞外基质的Ⅰ型和Ⅲ型胶原，在形成不稳定斑块中起重要作用。MMP-1含量越高，斑块越容易破裂，复杂冠状动脉病患者的血MMP-1水平要高于病变轻的患者，阻断MD2的表达或者基因敲出MD2都会影响MMP-1的表达下调，进而影响MMP-1对血管内可溶性因子等的影响，MMP-1的下调可以稳定斑块。因此，MD2阻断剂能够用于制备治疗脉粥样硬化的药物或药物组合物。4、制备抗炎症的药物或药物组合物的用途MD2蛋白是细胞内TLR4的分布和TLR4的识别所必需的，MD2蛋白与TLR4与LPS的识别有关，能够调节TLR4与LPS的相互作用，敲出MD2基因的小鼠对LPS和LPS诱导的炎症反应均没有反应。LTR4的激活会引起下游的促炎性级联反应，进而引起组织炎症。因此，MD2阻断剂能够用于制备抗炎症的药物或药物组合物。5、制备治疗急性肺损伤的药物或药物组合物的用途急性肺损伤是各种直接和间接致伤因素导致的肺泡上皮细胞及毛细血管内皮细胞损伤，造成弥漫性肺间质及肺泡水肿，导致的急性低氧性呼吸功能不全。败血症和急性炎症疾病是最普遍的引起急性肺损伤的原因，而急性炎症疾病本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂，其特征在于，该阻断剂包含雷公藤红素。

【技术特征摘要】
1.一种淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂，其特征在于，该阻断剂包含雷公藤红素。2.一种根据权利要求1所述的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂作为制备治疗肥胖的药物或药物组合物的用途，其特征在于，所述的药物组合物包含雷公藤红素或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。3.一种根据权利要求1所述的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂作为制备治疗糖尿病的药物或药物组合物的用途，其特征在于，所述的药物组合物包含雷公藤红素或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。4.一种根据权利要求1所述的淋巴细胞抗原96蛋白活化的阻断剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：张登海，张雪，彭彬，
申请(专利权)人：张登海，张雪，彭彬，
类型：发明
国别省市：上海,31