新的肽组合物以及它们在制备抗丙肝病毒药物组合物中的用途制造技术

本发明专利技术涉及新的肽组合物，具体地，本发明专利技术涉及含有至少两种肽的肽组合物，其中所述至少两种肽选自下列肽：至少具有氨基酸序列ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１的肽Ａ，至少具有氨基酸序列ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４５的肽Ｂ，至少具有氨基酸序列ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２７的肽Ｃ，至少具有氨基酸序列ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７４的肽Ｄ。特别地，本发明专利技术组合物可以用于制备对抗丙型肝炎病毒的活性药物组合物。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术的一个目的是新的肽组合物以及它们特别在制备抗丙肝病毒药物组合物中的用途。本专利技术的一个目的是肽组合物，它特别用于抗丙肝病毒的预防和治疗性疫苗接种。丙型肝炎是输血导致肝炎的主要原因。丙肝也可以被其它经皮途径传播，例如通过静脉途径注射药物。此外，对专业人员污染的危险也不可忽视。丙肝与其它形式的与病毒相关的肝脏疾病(如甲肝、乙肝或丁肝)不同。丙肝病毒(HCV)的感染通常是慢性的，导致高比例(5到20％)的肝炎、肝硬化、肝癌之类的肝脏疾病。虽然于1990年代建立起来的筛选测试降低了通过输血传播病毒的危险，但是丙肝的发生率仍然很高。举例来说，最近的研究表明至今在法国每年仍然有10000到15000个新的病例被感染(S.Deuffic等人，Hepatology 1999；291596-1601)。目前，全世界约有17000万人被HCV慢性感染。感染的高危人群主要是医务人员和静脉药物使用者，但是在不属于高危人群的无症状供血者体内发现了参与循环的抗HCV抗体，对于后者而言感染路径还不确定。HCV是通过分子生物学技术发现的第一个趋肝性病毒。在病毒颗粒被观察之前，病毒的基因组序列已被克隆。HCV属于黄病毒科家族的新类别——肝病毒。该病毒具有一9.5kb的单链正链RNA，它被一拷贝的互补RNA复制，其翻译产物是约3000氨基酸的聚蛋白单体前体。HCV基因组的5’相应于与编码结构蛋白质、核壳核心蛋白质、两个包膜糖蛋白质(E1和E2)和被称为p7的小蛋白质的基因相邻的非翻译区。在不同的基因型中，5’非翻译区和核心基因相对更加保守。从一个分离体到另一个分离体，包膜蛋白质E1和E2由更可变的区域编码。p7蛋白质是一极端疏水蛋白质，其功能未知。HCV基因组的3’端包含编码非结构蛋白质(NS2，NS3，N54，NS5)的基因和具有较保守域的3’非编码区(Major ME，Feinstone SM，Hepatology，June 1997，25(6)1527-1538)。目前关注的丙肝治疗方法是使用pegylated干扰素和利巴伟林的双重疗法(Manns MP等人，The Lancet，22 September 2001，Vol.358，958-965)。尽管这种疗法对感染属于2和3基因型病毒株的病人特别有效，对1a、1b和4基因型却只有有限的效果(Manns MP，上文)。因此，发展优先针对这些低反应基因型的疫苗组合物是必要的。今天的一些研究表明对HCV引起的感染的控制，不管是天然的(“自发解决”)或治疗后的(“治疗解决”)，都与涉及T-CD4+和T-CD8+淋巴细胞的细胞介导的免疫反应的诱导或被赋予潜力有关(CERNY A等人，J.Clin.Invest.，95521-530(1995))。基于使用肽的疫苗的目的大体是诱导T-CD4+和/或T-CD8+淋巴细胞介导的免疫反应。主要组织相容性复合物(MHC)的分子被描述成I类或II类。I类分子几乎在所有的具核细胞都有表达，并且能够成为CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的目标。CTLs识别与I类MHC分子一起呈递的肽或表位。例如，I类分子HLA-A2.1表明肽的结合位点是通过I类分子重链结构域α1和α2的组合而产生(Bjorkman等人，Nature，329506(1987))。如专利申请WO01/21189，一些作者认为肽制品产生免疫反应的能力决定于它们与HLA分子结合的能力。这种推论并非是显然的，并且可能导致要么如本申请的申请者在实施例1中用FLAT肽所展示的，选择不具产生免疫反应能力的肽(虽然具有很高的结合值)，要么排除事实上具有很高免疫原性的肽(如Brinster C.等人用CIN肽所展示的(Hepatology，Vol.34，N°6，2001，1206-1217))。事实上，虽然CIN肽具有普通的，甚至低的(335)结合值，但它仍然能够强烈诱导细胞毒性T淋巴细胞介导的反应。申请者目前已经出乎意料的发现了一含有至少两种肽(选自A到D肽)的新肽组合物，它具有强烈的产生免疫反应的能力，并且能够影响来自感染1a、1b和4基因型病毒株的病人的细胞诱导特殊免疫反应的能力。这些病人优选(但不限于)具有HLA-A2.1型HLA。因此，本专利技术的一个目的是含有至少两种化合物的肽组合物，所含化合物选自-A肽，至少具有如下SEQ ID NO1氨基酸序列X1AX2QGYKVX3VLNPSVX4A TLX5FGX6YMSKAX7GX8，其中X1是Y或H，X2是A、G或T，X3是R或L，X4是A或T，X5是G或S，X6是A、T或V，X7是H或Y，X8是I，T，M或V，-B肽，至少具有如下SEQ ID NO45氨基酸序列GX18X19X20X21X22X23TSLTGRDX24NX25X26X27GEX28QX29X30STAX31X32X33FLX34X35X36X37NGX38X39WTVX40，其中X18是L或V，X19是L或F，X20是G或S，X21是C或T，X22是I或V，X23是I或V，X24是K、R或T，X25是Q或E，X26是V或N，X27是D，E或C，X28是V或A，X29是V、I、E或M，X30是L或V，X31是T、K或A，X32是Q或H，X33是S或T，X34是A或G，X35是T或S，X36是C或A，X37是V、I或T，X38是V或A，X39是C或M，X40是Y或F，-C肽，至少具有如下SEQ ID NO127氨基酸序列SX47MX48FTX49X50X51TSPLX52X53X54X55TLX56FNIX57GGWVAX58QX59，其中X47是L或P，X48是A或S，X49是A或S，X50是A或S，X51是I或V，X52是T，S或A，X53是T或I，X54是Q，S或G，X55是N、Q、H、S、Y或T，X56是L或M，X57是L或W，X58是A或S，X59是L、P或I，-D肽，至少具有如下SEQ ID NO174氨基酸序列X69KX70ARX71IVX72PX73LGX74RVCEKX75ALX76X77VX78X79X80x81，其中X69是R或Q，X70是P或A，X71是L或F，X72是F或Y，X73是D或E，X74是V或S，X75是M或R，X76是Y或H，X77是D或N，X78是V或I，X79是S、T或K，X80是T、K、I或N，X81是L或T，-B’表位，具有如下SEQ ID NO213序列GX18X19X20X21X22X23TSL，其中X18是L或V，X19是L或F，X20是G或S，X21是C或T，X22是I或V，X23是I或V，-C’表位，具有如下SEQ ID NO221序列SPLX52X53X54X55TL，其中X52是T，S或A，X53是T或I，X54是Q，S或G，X55是N，Q，H，S，Y或T，和含有它们的药物组合物，以及它们在制备抑制或阻止丙肝病毒引起的感染的药物方面和作为诊断组合物(特别是作为疫苗)方面的用途。本专利技术的一特殊目的是如上描述的肽组合物，其特征在于包含A、B、C、D肽中至少两肽。另一个目的是特定的A、B、C、D肽、编码所述肽的核苷酸序列，以及被这些载体共转化的微生物或宿主细胞。最终的目的是针对本专利技术组合物的抗体和使用所本文档来自技高网...

【技术保护点】
肽组合物，其特征在于包含选自如下的至少两种化合物：　　　　－Ａ肽，至少具有如下ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１氨基酸序列：Ｘ↓［１］ＡＸ↓［２］ＱＧＹＫＶＸ↓［３］ＶＬＮＰＳＶＸ↓［４］ＡＴＬＸ↓［５］ＦＧＸ↓［６］ＹＭＳＫＡＸ↓［７］ＧＸ↓［８］，　　　　其中Ｘ↓［１］是Ｙ或Ｈ，Ｘ↓［２］是Ａ、Ｇ或Ｔ，Ｘ↓［３］是Ｒ或Ｌ，Ｘ↓［４］是Ａ或Ｔ，Ｘ↓［５］是Ｇ或Ｓ，Ｘ↓［６］是Ａ、Ｔ或Ｖ，Ｘ↓［７］是Ｈ或Ｙ，Ｘ↓［８］是Ｉ、Ｔ、Ｍ或Ｖ，　　　　－Ｂ肽，至少具有如下ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：４５氨基酸序列：ＧＸ↓［１８］Ｘ↓［１９］Ｘ↓［２０］Ｘ↓［２１］Ｘ↓［２２］Ｘ↓［２３］ＴＳＬＴＧＲＤＸ↓［２４］ＮＸ↓［２５］Ｘ↓［２６］Ｘ↓［２７］ＧＥＸ↓［２８］ＱＸ↓［２９］Ｘ↓［３０］ＳＴＡＸ↓［３１］Ｘ↓［３２］Ｘ↓［３３］ＦＬＸ↓［３４］Ｘ↓［３５］Ｘ↓［３６］Ｘ↓［３７］ＮＧＸ↓［３８］Ｘ↓［３９］ＷＴＶＸ↓［４０］，　　　　其中Ｘ↓［１８］是Ｌ或Ｖ，Ｘ↓［１９］是Ｌ或Ｆ，Ｘ↓［２０］是Ｇ或Ｓ，Ｘ↓［２１］是Ｃ或Ｔ，Ｘ↓［２２］是Ｉ或Ｖ，Ｘ↓［２３］是Ｉ或Ｖ，Ｘ↓［２４］是Ｋ、Ｒ或Ｔ，Ｘ↓［２５］是Ｑ或Ｅ，Ｘ↓［２６］是Ｖ或Ｎ，Ｘ↓［２７］是Ｄ、Ｅ或Ｃ，Ｘ↓［２８］是Ｖ或Ａ，Ｘ↓［２９］是Ｖ、Ｉ、Ｅ或Ｍ，Ｘ↓［３０］是Ｌ或Ｖ，Ｘ↓［３１］是Ｔ、Ｋ或Ａ，Ｘ↓［３２］是Ｑ或Ｈ，Ｘ↓［３３］是Ｓ或Ｔ，Ｘ↓［３４］是Ａ或Ｇ，Ｘ↓［３５］是Ｔ或Ｓ，Ｘ↓［３６］是Ｃ或Ａ，Ｘ↓［３７］是Ｖ、Ｉ或Ｔ，Ｘ↓［３８］是Ｖ或Ａ，Ｘ↓［３９］是Ｃ或Ｍ，Ｘ↓［４０］是Ｙ或Ｆ，　　　　－Ｃ肽，至少具有如下ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１２７氨基酸序列：ＳＸ↓［４７］ＭＸ↓［４８］ＦＴＸ↓［４９］Ｘ↓［５０］Ｘ↓［５１］ＴＳＰＬＸ↓［５２］Ｘ↓［５３］Ｘ↓［５４］Ｘ↓［５５］ＴＬＸ↓［５６］ＦＮＩＸ↓［５７］ＧＧＷＶＡＸ↓［５８］ＱＸ↓［５９］，　　　　其中Ｘ↓［４７］是Ｌ或Ｐ，Ｘ↓［４８］是Ａ或Ｓ，Ｘ↓［４９］是Ａ或Ｓ，Ｘ↓［５０］是Ａ或Ｓ，Ｘ↓［５１］是Ｉ或Ｖ，Ｘ↓［５２］是Ｔ、Ｓ或Ａ，Ｘ↓［５３］是Ｔ或Ｉ，Ｘ↓［５４］是Ｑ、Ｓ或Ｇ，Ｘ↓［５５］是Ｎ、Ｑ、Ｈ、Ｓ、Ｙ或Ｔ，Ｘ↓［５６］是Ｌ或Ｍ，Ｘ↓［５７］是Ｌ或Ｗ，Ｘ↓［５８］是Ａ或Ｓ，Ｘ↓［５９］是Ｌ、Ｐ或Ｉ，　　　　－Ｄ肽，至少具有如下ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１７２氨基酸序列：Ｘ↓［６９］ＫＸ↓［...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：A富尔尼勒，N伊莫迪，G安绍斯普，
申请(专利权)人：拜奥默里克斯股份有限公司，国家健康医学研究所，
类型：发明
国别省市：FR[法国]