本发明专利技术涉及利用多肽合成的方法将蛋白质功能片段制备成为多项并列联接的功能性多肽产物的方式，利用这种方式可制备出含有２项、４项、８项、１６项并列联接的蛋白质功能片段的多肽产物。按照本方式合成制备的多项并列联接的蛋白质功能片段多肽产物在机体内部具有抗生物酶降解，能够显著提高蛋白质功能片段的生物学活性和延长作用半衰期的功效。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及利用多肽合成的方法将一项蛋白质的功能片段制备成为多项并列联接的蛋白质功能片段多肽产物的方式，利用本方式制备的合成产物可作为药物进入体内具有耐降解，提高蛋白质功能片段在体内的生物学活性的作用。本专利技术属于医药领域。
技术介绍
由于人类基因组计划的完成和人类蛋白组计划的开展，将会有越来越多的蛋白质功能片段被发现并被作为药物应用到医药领域中来。现已开发并在临床上得到应用的多肽药物有“催产素”、“胸腺肽α1”、“胸腺五肽”等，有在天然肽链的基础上进行人工改构制备成为用于治疗消化道出血和肢端肥大症的多肽药物“奥曲肽”等。蛋白质中的功能片段常常能筛选到含有三十几个或小到只有三个氨基酸组成的多肽片段，它们为人工合成蛋白质功能片段并将它们投入应用奠定了基础。由于筛选和鉴定出的蛋白质功能片段多为直链短肽，如果将它们直接投入应用作为药物进入体内后会被体内的多种酶很快地降解而失去其效用，因此很多天然多肽片段需要进行结构改造以提高其在体内的生物活性和延长其作用半衰期。
技术实现思路
蛋白质的功能片段是指被发现具备某种特定生物学功能的小分子多肽片段，它们通常是三十几个至三个氨基酸组成的多肽片段，被鉴定和发现的蛋白质功能片段可通过人工合成的途径制备。直链多肽小分子物质作为药物进入体内后易降解而难以达到预期的药效。为了达到保留蛋白质功能片段的生物学活性、提高药效、延长其在体内代谢的半衰期，需要对蛋白质功能片段做结构设计上的改进。将一项蛋白质功能片段制备成为多项并列联接的功能片段多肽产物，达到将功能片段有效地聚集并能够在一定程度上抵抗体内蛋白酶的降解，作为药物有助于提高疗效，延长给药间隔，减少病人的给药次数。按照此方式开发制备的多肽药物在体内的最终降解产物为游离氨基酸，可被机体直接吸收，没有药物残留和毒副作用，作为药物安全性好。应用本方式产生的蛋白质功能片段多肽产物作为药物将具有重要的开发潜力和应用价值。具体药物设计方式多肽合成常用的方法为固相合成法，多肽合成的原理是根据氨基酸两端的氨基和羧基之间的缩合反应形成酰胺键(肽键)连接延长肽链。首先将多肽片段的羧基端氨基酸的羧基与固相树脂共价相连，合成的顺序是从肽段的羧基端(C-端)向氨基端(N-端)方向延长，多肽合成完成后再将合成的多肽产物从固相树脂上裂解下来，经过纯化得到合成产物。可采用如下方式合成含有蛋白质功能片段的多肽药物在合成功能肽段之前首先将赖氨酸(Lys)或精氨酸(Arg)与固相树脂联接，一个赖氨酸或精氨酸有两个氨基可供缩合联接氨基酸并延长肽链。现以赖氨酸为例，在赖氨酸的2个氨基上可以继续往下连接氨基酸或延长肽链，可将赖氨酸序列连接起来形成如下结构序列的多肽产物(蛋白质功能片段)2-Lys 蛋白质功能片段2项并列联接。(蛋白质功能片段)4-(Lys)2-Lys 蛋白质功能片段4项并列联接。(蛋白质功能片段)8-(Lys)4-(Lys)2-Lys蛋白质功能片段8项并列联接。(蛋白质功能片段)16-(Lys)8-(Lys)4-(Lys)2-Lys16项并列联接。或(蛋白质功能片段)2-Arg 蛋白质功能片段2项并列联接。(蛋白质功能片段)4-(Arg)2-Arg 蛋白质功能片段4项并列联接。(蛋白质功能片段)8-(Arg)4-(Arg)2-Arg蛋白质功能片段8项并列联接。(蛋白质功能片段)16-(Arg)8-(Arg)4-(Arg)2-Arg16项并列联接。多项并列联接的蛋白质功能片段在Lys(或Arg)之间，或Lys(或Arg)与Lys(或Arg)之间可与N个任意氨基酸(AA)形成的肽链相连，例如(蛋白质功能片段-AAN)2-Lys-AAN，其中N为自然数。添加N个任意氨基酸连接成的肽链的目的是为了减少蛋白质功能片段与骨架之间可能产生的空间位阻效应。按照此方式合成的多项并列联接的蛋白质功能片段的一端为游离端，这对某些蛋白质功能片段的生物学活性具有重要价值。根据具体合成产物的设计和需求，可将蛋白质功能片段的序列以顺式的形式联接到赖氨酸或精氨酸上，例如蛋白质功能片段为Gly-Thr-Ala-Pro可合成为(Gly-Thr-Ala-Pro)2-Lys或(Gly-Thr-Ala-Pro)2-Arg。也可将蛋白质功能片段的序列以反式的形式联接到赖氨酸或精氨酸上，例如蛋白质功能片段为Gly-Thr-Ala-Pro可合成为(Pro-Ala-Thr-G1y)2-Lys或(Pro-Ala-Thr-Gly)2-Arg。根据以上设计通过多肽合成的方式制备而成的多项并列联接的蛋白质功能片段多肽产物在体内具有抗酶解，在体内能够显著提高功能片段的生物学活性的功效，显著延长合成产物在体内作用的半衰期。按照此方式合成的多肽产物可开发制备成为临床用药或兽用药。实施例1按照此方式合成的多肽产物经过纯化后其纯度可超过98％以上，符合国家食品药品监督管理局对药品纯度的质量要求。将合成产物作为主药原料经过注射用水的溶解，通过无菌过滤灌装到无菌、无内毒素、无热源的药用安瓿瓶或西林瓶中。灌装后可直接封口成为水针剂型或经过冷冻干燥后封口成为冻干粉针剂型。合成产物的灌装量可根据治疗需求来确定并根据病情调整使用剂量。权利要求1.蛋白质功能片段是指已鉴定出该片段具有某种生理活性或生理功能的短肽片段，利用多肽合成技术可将一项蛋白质功能片段制备成为多项并列联接的一种多肽产物的方式。2.在多肽的合成过程中，可利用赖氨酸(Lys)或精氨酸(Arg)分别具有2个氨基的特性，将赖氨酸或精氨酸的2个氨基末端利用多肽合成的方法可缩合联接上氨基酸或蛋白质功能片段。3.合成的产物可为(功能片段-AAN)2-Lys-AAN；(功能片段-AAN)4-(Lys-AAN))2-Lys-AAN；(功能片段-AAN)8-(Lys-AAN)4-(Lys-AAN)2-Lys-AAN；(功能片段-AAN)16-(Lys-AAN)8--(Lys-AAN)4-(Lys-AAN)2-Lys-AAN，其中AAN代表由N个任意氨基酸(AA)连接成的肽链，N为自然数。4.合成的产物可为(功能片段-AAN)2-Arg-AAN；(功能片段-AAN)4-(Arg-AAN))2-Arg-AAN；(功能片段-AAN)8-(Arg-AAN)4-(Arg-AAN)2-Arg-AAN；(功能片段-AAN)16-(Arg-AAN)8--(Arg-AAN)4-(Arg-AAN)2-Arg-AAN，其中AAN代表由N个任意氨基酸(AA)连接成的肽链，N为自然数。5.蛋白质功能片段可顺式序列与赖氨酸或精氨酸连接，例如功能片段为Gly-Thr-Ala-Pro可合成为(Gly-Thr-Ala-Pro)2-Lys或(Gly-Thr-Ala-Pro)2-Arg。6.蛋白质功能片段可反式序列与赖氨酸或精氨酸联接，例如功能片段为Gly-Thr-Ala-Pro可合成为(Pro-Ala-Thr-Gly)2-Lys或(Pro-Ala-Thr-Gly)2-Arg。7.制备而成的多项并列联接的蛋白质功能片段多肽产物在体内具有耐降解和提高蛋白质功能片段的生物活性的特点，可制备成外用药、口服药、或注射药。8.本方式合成制备的多项并列连接的蛋白质功能片段多肽产物可制备成人用药。9.本方式合成制备的多项本文档来自技高网...
【技术保护点】
蛋白质功能片段是指已鉴定出该片段具有某种生理活性或生理功能的短肽片段，利用多肽合成技术可将一项蛋白质功能片段制备成为多项并列联接的一种多肽产物的方式。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：韩苏，
申请(专利权)人：韩苏，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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