DNA甲基转移酶抑制剂制造技术

本发明专利技术涉及一类广谱抗生素，它们是细菌性腺嘌呤ＤＮＡ甲基转移酶的抑制剂。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1.专利
本专利技术涉及抗生素领域，尤其是抗菌化合物。特别是本专利技术涉及靶向DNA修饰酶的抗生素，尤其是腺嘌呤DNA甲基转移酶，它是各种不同细菌病原体的成分，该细菌病原体包括那些为细菌细胞生长所必需者。本专利技术特别提供了这种腺嘌呤DNA甲基转移酶的抑制剂，其对胞嘧啶甲基转移酶的抑制作用很小或没有抑制作用，并因此对真核细胞尤其是哺乳动物细胞的抗菌作用有限。本专利技术还提供了制备和使用本专利技术腺嘌呤DNA甲基转移酶抑制剂的方法，以及它们的药物组合物。2.专利技术背景现代医学发展的一个标志是降低与细菌感染有关的发病率和死亡率。20世纪早期和中期各种抗生素药物的开发第一次为医学从业人员提供了对各种感染性疾病的有效治疗。但是，滥用常规抗生素和感染性细菌群的自然选择已导致了大多数细菌感染性药剂的耐药性发展为不同程度的大多数抗生素药剂的耐药性。严重情况下，诸如MRSA(耐多种药物的StaphA)，目前只有一种或仅一些抗生素是有效的。另外，免疫缺陷综合症的存在导致另外发生需要抗生素加强治疗的机会性致病感染。因此，本领域越来越需要新的更有效的抗生素化合物来治疗对现有的疗法产生耐药性的细菌感染。大多数细菌通过使特定的核苷酸碱基甲基化来修饰它们的基因组DNA。DNA甲基化对于基因调节和突变损伤的修复很关键(见Jost和Soluz，1993，DNA甲基化，分子生物学和生物学显著性，Birhauser VerlagBasel，Switzerland；Palmer和Marinus，1994，《基因》1431-12；Dryden，1999，“细菌DNA甲基转移酶”，在《S-腺苷蛋氨酸依赖性甲基转移酶结构和功能》中，X.Cheng和R.M.Blumenthal(编)，World Scientific Publishing，p.283340，评论)。DNA甲基化是由一类具有不同序列特征的酶来催化的。有这样一些DNA甲基转移酶，例如(dam)，它们使GATC序列中的腺嘌呤残基或者CCAGG或CCTGG序列中的胞嘧啶(dcm)残基甲基化，这些序列不包含在关联限制酶的识别部位。有这样一些DNA甲基化转移酶，它们使包含在关联限制酶的识别部位的残基甲基化(例如，ApaI，AvaII，BclI，ClaI，DpnII，EcoRI，HaeIII，HhaI，MboI，和MspI；见Marinus和Morris，1973，《细菌学杂志》(J.Bacteriol.)1141143-1150；May和Hatman，1975，《细菌学杂志》(J.Bacteriol.)123768-770；Heitman，1993，Genet.Eng.1557-108)。另外，本专利技术人已经从新月柄杆菌中发现了一种腺嘌呤DNA甲基转移酶，这种酶可使GANTC序列中的腺嘌呤残基甲基化，这公开在国际申请公开号WO98/12206中。这种甲基转移酶是细胞周期调节性的酶并且是成功的细菌细胞生长所必需的；酶的抑制作用使得细菌不能生存。在流产布鲁氏菌、幽门螺杆菌、根癌土壤杆菌和苜宿中华根瘤菌中也发现了相似的甲基转移酶。与细菌细胞相比，真核细胞尤其是哺乳动物细胞中的DNA甲基化限于包括序列CpG部位的胞嘧啶甲基化(Razin和Riggs，1980，《科学》210604-610；Jost和Bruhat，1997，Prog.NucleicAcid Res.Molec.Biol.57217-248)。因此，DNA甲基化的存在，尤其是，本专利技术人在某些细菌种类中发现有细胞-周期调节的腺嘌呤DNA甲基转移酶，表明本领域对于抗生素活性需要提出新的研究目标。专利技术概要本专利技术提供了能抑制细菌细胞中的腺嘌呤DNA甲基转移酶的抗生素化合物。本专利技术的抗生素化合物特别抑制腺嘌呤特异性细菌DNA甲基转移酶，而不抑制细菌的或真核细胞的，尤其是哺乳动物和大多数特定的人的胞嘧啶特异性DNA甲基转移酶。本专利技术化合物还抑制植物中的腺嘌呤特异性DNA甲基转移酶。这种抗生素化合物也能以药物组合物的形式给动物尤其是人服用，用于治疗细菌病原性疾病、或机会性感染，它是由免疫妥协或衰弱状态的动物(尤其是人)的一种细菌感染的。本专利技术还提供了制备抗生素化合物及其药物组合物的方法，和治疗上使用所述抗生素的方法。还提供了本专利技术抗生素化合物和药物组合物的试剂盒和包装形式。本专利技术特别优选的实施方式体现在下列对某些优选实施方式的更为详细的说明和权利要求书中。 附图说明图1和2表示细菌腺嘌呤DNA甲基转移酶的“活性部位”的示意图。优选实施方式的详细说明本专利技术提供了作为细菌腺嘌呤DNA甲基转移酶抑制剂的抗生素、尤其是抗细菌的化合物。本专利技术化合物对任何产生腺嘌呤DNA甲基转移酶的细菌种类具有抗细菌特性、生长抑制特性。这些酶包括属于本领域已知的细菌限制/修饰体系成分的腺嘌呤DNA甲基转移酶、以及细胞周期调节的腺嘌呤DNA甲基转移酶(CcrM)，例如，公开在国际申请公开号W098/12206中的那些，引作参考。因此，本专利技术特别提供了腺嘌呤DNA甲基转移酶抑制剂。本专利技术的腺嘌呤DNA甲基转移酶抑制剂包括一类新的广谱抗生素。大多数细菌种类具有一种DNA甲基转移酶，该转移酶是修饰剂的部分，尤其与限制酶有关，它保持细胞DNA的完整性、同时防卫外来的(特别是大多数病毒的)DNA。另外，某些细菌产生为细菌细胞生长所必需的腺嘌呤DNA甲基转移酶。为本专利技术抑制剂的抗细菌活性提供适当目标的医学上重要的细菌种类包括革兰氏阳性细菌，包括球菌例如葡萄球菌类和链球菌类；杆菌，包括杆状菌类、棒状杆菌类和梭菌类；细丝状细菌，包括防线菌类和链霉菌类；革兰氏阴性细菌，包括球菌例如奈瑟氏菌属类；杆菌，例如假单胞菌属类、布鲁氏杆菌属类、植物肥大病菌属类、博代氏杆菌属类、埃希氏杆菌属类、志贺氏菌属类、耶尔森氏菌属类、沙门氏菌属类、克雷白氏杆菌属类、水栖菌属类、嗜血杆菌类、巴斯德氏菌属类、和链杆菌属类；螺旋体类、弯曲杆菌属类、弧菌属类；和细胞内的细菌包括立克次氏体属类和衣原体属类。作为本专利技术腺嘌呤DNA甲基转移酶抑制剂的目标物的特殊细菌种类包括金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、酿脓链球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、炭疽芽孢杆菌、白喉棒杆菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌、淋病奈瑟氏球菌、脑膜炎奈瑟氏球菌、铜绿假单胞菌、侵肺军团菌、大肠埃希氏菌、鼠疫耶尔森氏菌、流感嗜血杆菌、幽门螺杆菌、胚胎弯曲杆菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、彻白密螺旋体、衣氏放线菌、普氏立克次氏体、立氏立克次氏体、砂眼衣原体、鹦鹉热衣原体、流产布鲁氏菌或根癌土壤杆菌。本专利技术腺嘌呤DNA甲基转移酶抑制剂的一个重要特性在于含胞嘧啶特异性DNA甲基转移酶的这些物质的活性水平低。这是因为胞嘧啶特异性DNA甲基转移酶出现在哺乳动物的(尤其是人的)细胞中，并且本专利技术腺嘌呤DNA甲基转移酶的一个有用特性是对哺乳动物的甲基转移酶很少有或没有抑制活性。这一特性使得这些分子具有本专利技术所提供的对细菌细胞特异性的有利特性、并且对哺乳动物的(最优选人的)细胞很少有抗生素活性。优选的是，这些化合物对胞嘧啶特异性DNA甲基转移酶的IC50大于500μM。本专利技术所提供的抑制化合物可以式I表示 其中R1、R2和R2相同或不同、并且各自为氢、低级烷基、芳基或取代的芳基、低级烷本文档来自技高网...

【技术保护点】
下式的化合物或其药学上可接受的盐，＊＊＊其中Ｒ↑［１］、Ｒ↑［２］和Ｒ↑［３］相同或不同，并且各自为氢、低级烷基、芳基或取代的芳基、低级烷氧基、低级烷氧烷基、或环烷基或环烷基烷氧基，其中每个环烷基基团具有３－７个环原子，其中该环原子 中至多两个是或不是选自氧和氮的杂原子，且其中每个烷基、芳基或环烷基基团均可被氢、低级烷基或低级烷氧基、芳基或取代的芳基取代或不取代，并且其中Ｒ↑［３］可以是核糖、脱氧核糖或其磷酸化衍生物，其中Ｒ↑［１］，Ｒ↑［２］，和Ｒ↑［３］不都是氢 ，且其中当Ｒ↑［３］是核糖、脱氧核糖或其磷酸化衍生物，Ｒ↑［１］或Ｒ↑［２］之一不是氢。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯蒂芬J本科维克，露西尔夏皮罗，斯蒂芬J贝克，达夫尼C沃农，马克沃尔，
申请(专利权)人：宾夕法尼亚州研究基金会，
类型：发明
国别省市：US[美国]