作为免疫调节剂的基于球形核酸的构建体制造技术

本发明专利技术的方面涉及纳米级构建体及其相关方法和组合物。本发明专利技术的组合物有效用于治疗对免疫细胞活化水平敏感的紊乱，诸如自身免疫性疾病或其他基于炎症的疾病或紊乱。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2013年7月25日提交的题为“作为用于预防和治疗用途的免疫刺激剂的基于球形核酸的构建体”的美国临时申请号61/858,584的优先权，通过引用将其全文并入本文中。专利
本专利技术涉及用于递送核酸相互作用复合物的拮抗剂的纳米级构建体及其方法和组合物。专利技术背景免疫细胞(特别是巨噬细胞、树突状细胞和B细胞)使用Toll样受体(TLR)来了解环境中的外源材料(诸如细菌成分和外源DNA或RNA4-10)。这些受体一旦活化之后，通过特定细胞信号传导途径(主要通过转录因子NFκB11)产生大的免疫应答。然后，NFκB的活化导致产生几种分泌的信号传导分子(诸如TNFα)，其促进免疫应答至相邻的免疫细胞11。这种免疫感觉系统(sensorysystem)被称为固有免疫应答。在几种自身免疫性疾病中，身体将自身成分(诸如DNA或RNA)不正确地识别为外源成分，并会启动(mount)大规模的炎性应答，如果不受控制的话，其可以是破坏性的、痛苦的和威胁生命的。这种情况的最流行的实例包括如果没有进行仔细调控则主要侵袭关节并且会破坏软骨和骨的类风湿性关节炎以及如果不受控制则也会侵袭内部器官(诸如心、肾和肺)并可能致命的狼疮。目前的治疗主要依赖于通过TNFa结合抗体(依那西普等)来隔绝(sequestering)免疫细胞所得到的细胞因子的产生以及用化学治疗剂(诸如氨甲蝶呤)进行全身(general)免疫抑制和消除B细胞群体以延缓(staveoff)适应性免疫应答。但是，这些治疗常常很难容忍和/或随时间推移变得易于获得耐药性。因此，针对该信号传导级联的开始时TLR活化的拮抗剂的开发应当是阻断患有自身免疫性紊乱的患者中自身DNA和RNA的不适当识别的强效疗法。TLR7、8和9均驻留于免疫细胞的内体。TLR9识别未甲基化的CpG基序，其在细菌DNA中常见但在人DNA中不常见5,10。TLR7和8二者均识别在病毒感染中常见的短单链RNA的特异性序列6-8。重要的是，这些能够拮抗它们各自TLR并阻断下游信号传导的常见识别基序的模拟物是已知的12-17。但是，它们在治疗中的用途被它们能够被递送至病理部位而不被体内降解的能力所限制。专利技术概述本文中所述的是使用纳米级构建体通过调节受体相互作用(诸如TLR)用于调控免疫应答的新方法和组合物。本专利技术的方面涉及纳米级构建体，其具有核酸相互作用复合物的拮抗剂的冠部，其中核酸相互作用复合物的拮抗剂的表面密度为至少0.3pmol/cm2。在其他方面，本专利技术是构建体，其具有核酸相互作用复合物的拮抗剂的冠部，以及被并入冠部的抗原。在一些实施方案中，抗原的表面密度为至少0.3pmol/cm2。在其他实施方案中，抗原包括至少两种不同类型的抗原。在又一些其他方面，本专利技术是构建体，其具有并入了核酸相互作用复合物的至少两种拮抗剂的冠部，其中拮抗剂选自由TLR3、7/8和/或9的拮抗剂组成的组。在一些实施方案中，核酸相互作用复合物的拮抗剂含有间隔子。在其他实施方案中，核酸相互作用复合物的拮抗剂是RNA或DNA。核酸相互作用复合物的拮抗剂可以是例如双链RNA或双链DNA。备选地，核酸相互作用复合物的拮抗剂可以是单链RNA。在一些实施方案中，核酸相互作用复合物的拮抗剂为未甲基化的脱氧核糖核酸，诸如优化的免疫调节序列。在某些实施方案中，纳米级构建体包括纳米颗粒核心并且任选地纳米颗粒核心是金属的。在某些实施方案中，金属选自由金、银、铂、铝、钯、铜、钴、铟、镍及其混合物组成的组。在某些实施方案中，纳米颗粒核心包含金。在某些实施方案中，纳米颗粒核心是包括可降解金的晶格结构(latticestructure)。在一些实施方案中，纳米级构建体是可降解的。在某些实施方案中，纳米级构建体的直径是平均直径1nm至大约250nm、平均直径大约1nm至大约240nm、平均直径大约1nm至大约230nm、平均直径大约1nm至大约220nm、平均直径大约1nm至大约210nm、平均直径大约1nm至大约200nm、平均直径大约1nm至大约190nm、平均直径大约1nm至大约180nm、平均直径大约1nm至大约170nm、平均直径大约1nm至大约160nm、平均直径大约1nm至大约150nm、平均直径大约1nm至大约140nm、平均直径大约1nm至大约130nm、平均直径大约1nm至大约120nm、平均直径大约1nm至大约110nm、平均直径大约1nm至大约100nm、平均直径大约1nm至大约90nm、平均直径大约1nm至大约80nm、平均直径大约1nm至大约70nm、平均直径大约1nm至大约60nm、平均直径大约1nm至大约50nm、平均直径大约1nm至大约40nm、平均直径大约1nm至大约30nm或者平均直径大约1nm至大约20nm或者平均直径大约1nm至大约10nm。在其他方面，本专利技术是纳米级构建体，其具有核酸相互作用复合物的拮抗剂的球形冠部，其中拮抗剂是具有至少一个核苷酸间磷酸二酯键的核酸。在一些实施方案中，核酸的每个核苷酸间键是磷酸二酯键。在本专利技术的一些实施方案中，冠部是球形冠部。在本专利技术的其他方面中提供了由如本文中所述的纳米级构建体和载体组成的疫苗。在其他方面中提供了用于向细胞递送治疗剂的方法，其包括向细胞递送本专利技术的纳米级构建体。在本专利技术的其他方面中提供了用于调控靶分子的表达的方法。该方法涉及向细胞递送本专利技术的纳米级构建体。在一些实施方案中，靶分子是选自由TLR3、7、8和9组成的组的TLR。在本专利技术的其他方面中提供了用于拮抗TLR的方法，其通过向细胞递送如本文中所述的纳米级构建体。根据其他方面，本专利技术是治疗受试者的方法，其涉及向受试者施用有效量的如本文中所述的纳米级构建体以降低免疫应答。在一些实施方案中，受试者患有感染性疾病、癌症、自身免疫性疾病、哮喘或变应性疾病、炎性疾病、代谢性疾病、心血管疾病，或者受试者是组织或器官移植的候选者或者接受者。在其他方面，本专利技术是调节受试者中免疫应答的方法，其通过向受试者施用有效量的核酸相互作用复合物的拮抗剂的冠部的纳米级构建体以调节免疫应答，其中所述拮抗剂是具有至少一个核苷酸间磷酸二酯键的核酸。在某些实施方案中，该方法涉及向细胞递送治疗或检测方式(modality)。本发本文档来自技高网...

【技术保护点】
纳米级构建体，其包含：核酸相互作用复合物的拮抗剂的冠部，其中所述核酸相互作用复合物的拮抗剂的表面密度为至少0.3pmol/cm2。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.07.25 US 61/858,5841.纳米级构建体，其包含：
核酸相互作用复合物的拮抗剂的冠部，其中所述核酸相互作用复
合物的拮抗剂的表面密度为至少0.3pmol/cm2。
2.纳米级构建体，其包含：
核酸相互作用复合物的拮抗剂的冠部，以及被并入所述冠部的抗
原，其中所述抗原的表面密度为至少0.3pmol/cm2。
3.权利要求2所述的纳米级构建体，其中所述抗原包括至少两种
不同类型的抗原。
4.纳米级构建体，其包含：
并入了核酸相互作用复合物的至少两种拮抗剂的冠部，其中所述
拮抗剂选自由TLR3、7/8和/或9的拮抗剂组成的组。
5.权利要求1-4任一项所述的纳米级构建体，其中所述核酸相互
作用复合物的拮抗剂含有间隔子。
6.权利要求1-5任一项所述的纳米级构建体，其中所述核酸相互
作用复合物的拮抗剂是RNA或DNA。
7.权利要求6所述的纳米级构建体，其中所述核酸相互作用复合
物的拮抗剂是双链RNA或双链DNA。
8.权利要求6所述的纳米级构建体，其中所述核酸相互作用复合
物的拮抗剂是单链RNA。
9.权利要求1-8任一项所述的纳米级构建体，其中所述核酸相互
作用复合物的拮抗剂的表面密度为至少15pmol/cm2。
10.权利要求1-8任一项所述的纳米级构建体，其中所述核酸相
互作用复合物的拮抗剂的表面密度为至少45pmol/cm2。
11.权利要求6所述的纳米级构建体，其中所述核酸相互作用复
合物的拮抗剂为未甲基化的脱氧核糖核酸。
12.权利要求11所述的纳米级构建体，其中所述未甲基化的脱氧
核糖核酸含有优化的免疫调节序列。
13.权利要求1-12任一项所述的纳米级构建体，其中所述纳米级
构建体含有纳米颗粒核心，所述纳米颗粒核心是金属的。
14.权利要求13所述的纳米级构建体，其中该金属核心选自由金、
银、铂、铝、钯、铜、钴、铟、镍及其混合物组成的组。
15.权利要求13所述的纳米级构建体，其中所述纳米颗粒核心包
含金。
16.权利要求1-16任一项所述的纳米级构建体，其中所述纳米级
构建体是可降解的。
17.权利要求1-16任一项所述的纳米级构建体，其中所述纳米级
构建体的直径是平均直径1nm至大约250nm、平均直径大约1nm
至大约240nm、平均直径大约1nm至大约230nm、平均直径大约1
nm至大约220nm、平均直径大约1nm至大约210nm、平均直径大
约1nm至大约200nm、平均直径大约1nm至大约190nm、平均直

\t径大约1nm至大约180nm、平均直径大约1nm至大约170nm、平
均直径...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·格亚兹诺夫，C·C·马德尔，T·L·哈洛，A·F·拉多维克莫雷诺，C·李施，S·安安塔木拉，
申请(专利权)人：埃克西奎雷股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US