一种野黄芩苷元衍生物、其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及一类新型的野黄芩苷元衍生物（Ⅰ），以及它的制备方法和用途。药理实验证明，这类化合物具有明显的抗肿瘤活性，可用于制备抗肿瘤药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属药物化学领域，涉及一类新型的野黄芩苷元衍生物，具体涉及野黄芩 苷元8位Mannich碱衍生物、及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
灯盏花是菊科飞蓬属植物短葶飞蓬￡Wg"o" Srev&cop/"e 6^m" 7fo"d Ma^的 全草，又名灯盏细辛、灯盏菊等，主要分布于我国南方各地。二十世纪70年代经临 床验证，证明灯盏花粗提物对高血压、脑溢血、脑血栓形成、脑栓塞多发性神经 炎、慢性珠网膜炎及其后遗症具有明显疗效，由此引起人们对灯盏花粗提物有效成 分研究的广泛兴趣。经过多年研究，从灯盏花中分离鉴定了多种化学成分，如吡 喃酮类、黄酮类、内酯类、氨基酸类、多糖类等，并发现灯盏乙素(又名野黄芩 苷)是灯盏花提取物的主要活性成分，其粗提物作为心脑血管治疗药物已用于临 床；研究表明，灯盏乙素还具有抗肿瘤、抗HIV病毒、抗肝纤维化、抗老年痴呆、 神经保护等广泛药理活性。但灯盏乙素存在纯度低、溶解性差、生物利用度低、体 内半衰期短、且毒副作用严重等问题，以灯盏乙素为先导物进行结构改造，以期发 现药理活性及疗效更理想的治疗药物将具有重要意义。对灯盏乙素的体内代谢研究发现，野黄芩苷元为其活性代谢物，具有较强生物 活性，但野黄芩苷元的水溶性和脂溶性都较差，难透过生物膜，故吸收极差，生物 利用度非常低。因此，以野黄芩苷元为先导物，通过化学结构修饰，增强其脂溶性 或水溶性有可能发现药理活性更强的药物。对野黄芩苷元的构效关系研究表明A 环上羟基的存在是生物活性所必需，并且多个羟基相邻时，生物活性较高，当酚羟 基甲基化或糖苷化则导致活性降低或消失；2，3-位双键被饱和后，由于分子失去平面 性，导致生物活性大大降低；A环上8-位碳上有氨基、取代氨基或硝基取代时，则 细胞毒性增强。基于上述研究结果，利用野黄芩苷元8-位H具有较强酸性的特征， 通过Mannich反应引入含氮基团，以期改善目标物的溶解性，提高其生物利用度和增强药理活性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一类新型的野黄芩苷元衍生物(野黄芩苷元8位 Mannich碱衍生物)及其药学上可接受的盐；本专利技术的另一目的在于公开该类化合物的制备方法； 本专利技术的第三个目的在于公开该类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。 本专利技术所提供的野黄芩苷元8位Ma皿ich碱衍生物的化学结构通式为式中R'、 R2可以相同或不同，R，、 R2代表H、 C广C,2脂肪烷烃、C广C7脂肪 环烷烃、取代的C3 C7脂肪环烷烃、芳基、供电子或吸电子取代的芳基、C广Q脂肪 醇及其酯、C广C6羧酸及其酯、-CHR3COOH及其酯，或R,、 112分别与C、 O及N 原子环合形成四元环、五元环、六元环或七元环；其中，R3为氨基酸残基。本专利技术所提出的野黄芩苷元衍生物可通过以下方法制备得到上述化学反应式给出了野黄芩苷元8位Mannich碱衍生物的合成方法。 以野黄芩苷元为起始原料，在溶剂中，经酸催化(也可不用酸催化)下与甲醛和有机胺(包括伯胺、仲胺、氨基酸及其酯)发生Mannich反应，所得产物经重结晶或柱层析纯化，得野黄芩苷元8位Mannich碱衍生物。 其具体制备方法描述如下Mannich反应所用溶剂为乙醚、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚 砜、水、C, Q脂肪醇、二氯甲烷、氯仿、C3 Q脂肪酮、苯、正庚垸、甲苯、吡啶或上述两种溶剂的混合物，优选溶剂为二甲基亚砜、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰 胺、水、甲醇、丙酮、吡啶、甲醇-吡啶混合液；Mannich反应所用酸催化剂为各种质子酸或Lewis酸，优选酸催化剂为盐 酸、三氟化硼乙醚、樟脑磺酸；反应所用甲醛为甲醛水溶液、三聚甲醛、多聚甲醛、二甲氧基甲烷，优选甲醛 为甲醛水溶液；反应所用有机胺包括有机伯胺、有机仲胺、氨基酸及其酯；野黄芩苷元与甲醛和有机胺的摩尔投料比为1.0: 1.0-5.0: 1.0-5.0，优选摩尔投 料比为1.0: 3.0-4.0: 3.0~4.0;縮合反应温度为(K200'C,优选反应温度为室温 80'C; 縮合反应时间为2~72小时，优选反应时间为2~24小时。本专利技术提供的野黄芩苷元衍生物可与任何合适的酸通过药学上常规成盐的方法 得到其药物学上可接受的盐，所述的酸为无机酸(如盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等)；有机酸(如甲酸、乙酸、丙酸、苯甲酸、马来酸、富马酸、琥珀 酸、酒石酸、柠檬酸等；烷基磺酸，如甲基磺酸、乙基磺酸等；芳基磺酸，如苯磺 酸、对甲苯磺酸等)均可使用。本专利技术的野黄芩苷元衍生物进行了如下的生物活性筛选1、 抗肝癌细胞BEL-7402将肝癌细胞BEL-7402分别消化计数，并接种于96孔板(5000个细胞/ L), 24小 时后以磷酸盐缓冲液(PBS， pH7.4)洗涤2遍，加入含不同浓度的药物，培养72 小时；洗涤后，用0.4°/。磺酰罗丹明(SRB)溶液室温下染色15分钟，1%冰醋酸洗 3遍，空气中将染色的细胞干燥，以10mmol/L Tris-HCl溶解，并用Dynatech MR 7000仪测540nrn波长的吸光度值，每株细胞独立重复3遍，计算药物对肝癌细胞 BEL-7402生长的抑制率，试验结果见表l。2、 抗肺癌细胞A-549将肺癌细胞A-549分别消化计数，并接种于96孔板(5000个细胞/ L) ， 24小 时后以磷酸盐缓冲液(PBS， pH7.4)洗涤2遍，加入含不同浓度的药物，培养72小时；洗漆后，用0.4%磺酰罗丹明(SRB)溶液室温下染色15分钟，1%冰醋酸洗 3遍，空气中将染色的细胞千燥，以10mmol/L Tris-HCl溶解，并用Dynatech MR 7000仪测540nrn波长的吸光度值，每株细胞独立重复3遍，计算药物对肺癌细胞 A-549生长的抑制率，试验结果见表2。具体实施方式 实施例l8-(A^-二甲基)-亚甲胺基-5，6，7-三羟基-4-氧-2-(4-羟基苯基)-4fiM-苯并吡喃的制备在反应瓶中依次加入二甲胺2.0 mmol、 37%甲醛水溶液2.0 mmol、野黄芩苷元 570 mg (1.19 mmol)、甲醇20 ml和催化量盐酸，搅拌均匀，升温回流搅拌反应至 原料反应完全，过滤析出的固体，滤饼用少量甲醇洗涤，干燥，所得粗品用WiV-二 甲基甲酰胺和水的混合溶剂重结晶，得黄色粉末固体342.1 mg，收率83.8%。 'H NMR (DMS0-4j, 400 MHz) & 12.67(brs, 1H， 5-OH), 7.90 (d, / = 8.8 Hz， 2H, Ar，-H3,5),6.92 (d, J= 8.8 Hz, 2H， Ar，-H2,6)， 6.60 (s, 1H, Ar-H3), 4.15 (s， 2H, CH2), 2.56 (s， 6H, CH3); HR陽TOFMS (+Q)附/z: 344,1125 (+计算值344.1134)。实施例28-(AL吗啉基)—亚甲胺基-5，6，7-三羟基-4-氧-2-(4-羟基苯基)-4乐l-苯并吡喃的制备操作过程同实施例1，只是将二甲胺用吗啉替代，得8-(iV-吗啉基)-亚甲胺基-5,6,7-三羟基-4-氧-2-(4-羟基苯基)-4//-l-苯并吡喃的黄色粉末固体， 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一类具有如下通式（Ⅰ）的野黄芩苷元衍生物及其药学上可接受的盐：　＊＊＊　（Ⅰ）　其特征在于Ｒ↓［１］、Ｒ↓［２］可以相同或不同，Ｒ↓［１］、Ｒ↓［２］代表Ｈ、Ｃ↓［１］～Ｃ↓［１２］脂肪烷烃、Ｃ↓［３］～Ｃ↓［７］脂肪环烷烃、取代的Ｃ↓［３］～Ｃ↓［７］脂肪环烷烃、芳基、供电子或吸电子取代的芳基、Ｃ↓［１］～Ｃ↓［６］脂肪醇及其酯、Ｃ↓［１］～Ｃ↓［６］羧酸及其酯、－ＣＨＲ↓［３］ＣＯＯＨ及其酯，或Ｒ↓［１］、Ｒ↓［２］分别与Ｃ、Ｏ及Ｎ原子环合形成四元环、五元环、六元环或七元环；其中，Ｒ↓［３］为氨基酸残基。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邓勇，沈怡，吴贝，钟裕国，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：90[中国|成都]