一种从枳实提取废弃物中分离谷甾醇的方法技术

本发明专利技术涉及一种从枳实提取废弃物中分离谷甾醇的方法，包括步骤：萃取、柱层析、洗脱、浓缩、精制、干燥即得谷甾醇。本发明专利技术的方法采用萃取，层析、重结晶精制方法从枳实提取废弃物中分离得到高纯度谷甾醇。本发明专利技术方法将枳实提取废弃物中谷甾醇提取、分离出来所得的谷甾醇纯度大于98%，实现废物再利用，具有较高的经济和环保效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从枳实提取废弃物中分离谷甾醇的方法。
技术介绍
谷甾醇是一类具有强生理活性的物质，有降低胆固醇、降血脂、抗肿瘤、防治心脏病等生理活性功能，是甾体药物和维生素D3的重要生产原料，而且在日用化工、化妆品、动物生长剂等方面有着广泛的用途。随着近年来甾体市场的需求量剧增，甾醇类化合物需求量更是供不应求，价格也是逐年攀升。谷甾醇广泛存在于稻谷、小麦、玉米、油菜等自然界的植物中，但由于含量低很少具有工业利用价值。工业上很多都是从一些富集废料中提取，所以产量受到一定限制。目前枳实在工业上主要用于提取橙皮苷，现有提取方法大致分为水提取和醇提取两种。其中水提取污染较大，而醇提取有污染小，提取率高，产品质量好的优点，势必将逐渐取代水提工艺。在枳实醇提取过程中大量有效物质被提取出来，分离橙皮苷后的废液经浓缩后有大量有效物质富集在废弃液中。经分析发现在废弃液中的谷甾醇具有很好的利用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供了一种从枳实提取废弃物中提取、分离高纯度谷甾醇的方法。在枳实工业化生产中，往往只提取里面的橙皮苷及辛弗林，其余有效成分被忽略掉，其中废弃物中含有3-5%β谷甾醇，3%-4橘皮素，0.3-0.5%川陈皮素，而这些有效成分都是一些附加值很高的产品，直接丢弃造成很大的浪费。本专利技术解决的技术问题是，对枳实生产中的辛弗林母液进行分离，分离其中β谷甾醇，实现废物再利用，具有较高的经济和环保效<br>益。本专利技术的从枳实提取废弃物中分离谷甾醇的方法包括步骤：（A）废弃物处理：取枳实经醇提后分离橙皮苷的浓缩液，将该废弃物溶液再浓缩至浓度1.02-1.12g/cm3，优选1.05-1.10g/cm3；（B）萃取：处理完成的废弃物加入有机溶剂搅拌萃取后静置，分离有机层，任选地水层再用有机溶剂重复上述操作一次或多次，将有机相的萃取液合并，静置；（C）层析：将萃取液过氧化铝或硅胶层析柱吸附，过柱完成后洗脱，收集含谷甾醇的洗脱液；（D）洗脱液浓缩、结晶、干燥：将含谷甾醇的洗脱液浓缩至有结晶析出；将浓缩液降温、静置结晶，结晶抽滤，干燥得粗品；（E）精制：步骤（D）产生的粗品加乙醇，加热回流溶解，过滤，滤液浓缩至原体积1/3-1/12，优选1/5-1/10；（F）二次结晶、干燥：浓缩液搅拌降温，静置结晶；结晶抽滤，洗涤，抽干，然后干燥，获得产品。在本专利技术中，枳实经醇提后分离橙皮苷的浓缩液是将枳实用醇提取辛弗林之后，提取渣用醇碱溶液提取，然后调pH至酸性，析出橙皮苷，母液浓缩回收醇之后获得的浓缩残液。更进一步地，所述枳实经醇提后分离橙皮苷的浓缩液是如下获得的：将枳实粉碎，过60目，2-4倍量50-80%甲醇或乙醇浸泡，重复1-3次，提取液合并浓缩得辛弗林；提取渣用2-6倍60-90%甲醇或乙醇碱溶液（碱用量为溶剂用量的2-5%）循环浸泡12-16小时，重复1-2次，提取液合并，盐酸调PH至4-5，析出大量固体，静置6-10小时，过滤，得橙皮苷，母液浓缩回收醇，浓缩残液为枳实提取废弃物。在一个优选实施方案中，步骤（A）中的浓缩是在95-100℃常压浓缩。优选地，步骤（B）中萃取用有机溶剂选自醚类（例如石油醚、异丁醚、正丁醚）或烃类（包括链状烃类、环状烃类，例如正己烷、环己烷）。在一个优选实施方案中，步骤（B）的萃取是在处理完成的废弃物溶液加热至60-65℃，加入有机溶剂如醚类（例如石油醚、异丁醚、正丁醚）或烃类（包括链状烃类、环状烃类，例如正己烷、环己烷）搅拌萃取30分钟~2小时，优选约60分钟、静置15分钟~1小时，优选约30分钟，分离有机层，水层再用有机溶剂重复上述操作2-3次，将有机相的萃取液合并，静置1~4小时，优选约2小时。在一个优选实施方案中，步骤（C）的层析包括将萃取液过氧化铝或硅胶层析柱吸附，过柱完成后用9：1的石油醚乙酸乙酯混合溶液或95：5环己烷乙酸乙酯混合溶剂洗脱，收集含谷甾醇的洗脱液。在一个优选实施方案中，步骤（D）的洗脱液浓缩、结晶、干燥包括将含谷甾醇的洗脱液浓缩至有结晶析出；浓缩液降温至20-25℃，静置结晶8小时，结晶抽滤，80℃干燥得粗品。在一个优选实施方案中，步骤（E）的精制包括：步骤（D）产生的粗品加粗品重量6-10倍，优选8倍的90-95%乙醇，加热回流1-2h溶解，过滤，滤液80-90℃浓缩至原体积1/5-1/10。在一个优选实施方案中，步骤（F）的二次结晶、干燥包括将浓缩液搅拌降温至5-10℃，静置结晶12-24h；结晶抽滤，乙醇洗涤，抽干；抽滤后结晶75℃-95℃，优选约85℃烘干，即得产品。本专利技术的优点本专利技术对枳实生产中的辛弗林母液进行分离，分离其中β谷甾醇，其纯度大于98质量%，实现废物再利用，具有较高的经济和环保效益。附图说明图1为实施例1所得结晶的紫外光谱图谱。图2为文献报道的谷甾醇的红外图谱。图3为实施例1所得结晶的红外图谱。图4(a)为谷甾醇标准对照的高效液相色谱图；图4(b)为实施例1所得谷甾醇样品的高效液相色谱图；图4(c)为谷甾醇混合样（实施例1所得样品+标准品）的高效液相色谱图。具体实施方式为使本领域技术人员更加清楚和明确本专利技术的技术方案，特提供下面优选的实施例，但本专利技术的技术思想并不限于以下实施例。制备例将枳实粉碎，过60目，用枳实的3倍重量的70%乙醇浸泡，重复3次，提取液合并浓缩得辛弗林；提取渣用5倍70%乙醇碱溶液（碱氢氧化钠用量为溶剂乙醇用量的约4质量%）循环浸泡15小时，重复2次，提取液合并，盐酸调PH至4，析出大量固体，静置8小时，过滤，得橙皮苷，母液浓缩回收醇，浓缩残液为枳实提取废弃物，用于以下实施例。实施例一取2000ml枳实提取废弃物，100℃常压浓缩，得浓度1.08g/cm3浓缩液850ml,将浓缩液冷却至65℃，在65℃水浴中加入石油醚850ml溶剂搅拌萃取60分钟、静置30分钟，分取石油醚萃取层；水层再用850ml石油醚重复萃取操作2次，将有石油醚萃取液合并，静置2小时。用石油醚适量和600g层析硅胶湿法装柱。将萃取液加入到硅胶柱中，控制过柱速度，萃取液过柱完成后用9：1的石油醚:乙酸乙酯混合溶液混合溶剂洗脱，洗脱液用结晶发检测有谷甾醇时收集洗脱液至洗脱液中检不出谷甾醇，共收集洗脱液8500ml。将含谷甾醇的洗脱液加热浓缩至有结晶析出；浓缩液降温至25℃，静置结晶8小时，结晶，抽滤，80℃干燥得粗品25.2g。取95%乙本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从枳实提取废弃物中分离谷甾醇的方法，包括以下步骤：（A）废弃物处理：取枳实经醇提后分离橙皮苷的浓缩液，将该废弃物溶液在浓缩至浓度1.02‑1.12g/cm3，优选1.05‑1.10g/cm3；（B）萃取：处理完成的废弃物加入有机溶剂搅拌萃取后静置，分离有机层，任选地水层再用有机溶剂重复上述操作一次或多次，将有机相的萃取液合并，静置；（C）层析：将萃取液过氧化铝或硅胶层析柱吸附，过柱完成后洗脱，收集含谷甾醇的洗脱液；（D）洗脱液浓缩、结晶、干燥：将含谷甾醇的洗脱液浓缩至有结晶析出；将浓缩液降温、静置结晶，结晶抽滤，干燥得粗品；（E）精制：步骤（D）产生的粗品加乙醇，加热回流溶解，过滤，滤液浓缩至原体积1/3‑1/12，优选1/5‑1/10；（F）二次结晶、干燥：浓缩液搅拌降温，静置结晶；结晶抽滤，洗涤，抽干，然后干燥，获得产品。

【技术特征摘要】
1.一种从枳实提取废弃物中分离谷甾醇的方法，包括以下步骤：
（A）废弃物处理：取枳实经醇提后分离橙皮苷的浓缩液，将该废弃物溶液在浓缩至浓度
1.02-1.12g/cm3，优选1.05-1.10g/cm3；
（B）萃取：处理完成的废弃物加入有机溶剂搅拌萃取后静置，分离有机层，任选地水层
再用有机溶剂重复上述操作一次或多次，将有机相的萃取液合并，静置；
（C）层析：将萃取液过氧化铝或硅胶层析柱吸附，过柱完成后洗脱，收集含谷甾醇的洗
脱液；
（D）洗脱液浓缩、结晶、干燥：将含谷甾醇的洗脱液浓缩至有结晶析出；将浓缩液降温、
静置结晶，结晶抽滤，干燥得粗品；
（E）精制：步骤（D）产生的粗品加乙醇，加热回流溶解，过滤，滤液浓缩至原体积1/3-1/
12，优选1/5-1/10；
（F）二次结晶、干燥：浓缩液搅拌降温，静置结晶；结晶抽滤，洗涤，抽干，然后干燥，获得
产品。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，枳实经醇提后分离橙皮苷的浓缩液是将枳实用醇
提取辛弗林之后，提取渣用醇碱溶液提取，然后调pH至酸性，析出橙皮苷，母液浓缩回收醇
之后获得的浓缩残液。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，步骤（A）中的浓缩是在95-100℃常压浓缩。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中，步骤（B）中萃取用有机溶剂选自醚类
（例如石油醚、异丁醚、正丁醚）或烃类（包括链状烃类、环状烃类，例如正己烷、环己烷）。...

【专利技术属性】
技术研发人员：王余兵，饶洁，石磊，全铁传，杨婷，
申请(专利权)人：湘西华方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43