一种从茶叶末中提取分离木麻黄素的方法技术

本发明专利技术公开了一种从茶叶末中提取分离木麻黄素的方法。该方法由以下步骤组成：(1)取茶叶末，按1g∶10～20mL的固液比加入乙醇溶液，超声提取，滤膜过滤，得到粗提液；(2)按1mL粗提液加入0.3～0.5g磷酸锆的比例往粗提液中加入磷酸锆，摇床振荡12～24h，离心分离出磷酸锆用水洗涤；(3)按0.1g∶1mL固液比往洗涤后的磷酸锆中加入磷酸去离子水溶液，摇床振荡12h，离心分离得到脱附液，滤膜过滤，滤液冷冻干燥，即得。本发明专利技术方法对木麻黄素的回收率高、产品杂质低，操作简便、绿色环保、对生产设备要求低，产品成本低，适于进行规模化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及茶萃出物，具体涉及从茶叶中分离茶多酚的方法。
技术介绍
茶多酚是茶叶的主要活性成分，是一类具有抗氧化、抗衰老和预防癌症等功效的酚类物质的总称。木麻黄素(Strictinin)是茶多酚中的一个具体化合物，其化学结构如下式Ⅰ所示。木麻黄素具有很高的抗氧化能力，可以作为抗氧剂用于油脂类产品的抗氧化(Zhou,B.；Yang,L.；Liu,Z.-L.,Strictininasanefficientantioxidantinlipidperoxidation.ChemistryandPhysicsofLipids2004,131,15-25.)；在疾病治疗方面，研究表明木麻黄素具有抗病毒，尤其是抵抗流感病毒的作用(Saha,R.K.；Takahashi,T.；Kurebayashi,Y.；Fukushima,K.；Minami,A.；Kinbara,N.；Ichitani,M.；Sagesaka,Y.M.；Suzuki,T.,Antiviraleffectofstrictininoninfluenzavirusreplication.AntiviralResearch2010,88,10-18.)；因此，木麻黄素作为食品添加剂，在功能性食品开发中具有广阔的应用前景。木麻黄素在茶叶中的含量很低，约占茶多酚总量的5％左右；因为受到茶叶中复杂成分的影响，目前除了硅胶柱层析和高效液相色谱法外，很难得到木麻黄素含量很高的茶多酚制品。但是上述方法存在对仪器设备要求高、产品成本高和难以进行规模化生产的不足，因此急需发展一种操作简便、可以进行规模化生产的分离方法。公开号为CN105330544A的专利申请公开了一种从茶叶末中提取分离5-O-没食子酰奎宁酸的方法，该方法采用对5-O-没食子酰奎宁酸具有特异性选择的磷酸锆为吸附剂，使用茶叶末为原料，在乙醇溶液中超声提取后，经过吸附、洗涤、脱附和冻干，不仅可制备较高纯度的5-O-没食子酰奎宁酸，且回收率较高。但是，该方法提取的茶多酚中，木麻黄素的纯度和回收率均较低。
技术实现思路
针对现有技术中存在的不足，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种从茶叶末中提取分离木麻黄素的方法，该方法具有木麻黄素回收率高和产品杂质低的优点。本专利技术解决上述技术问题的方案是：一种从茶叶末中提取分离木麻黄素的方法，该方法由以下步骤组成：(1)取茶叶末，按1g∶10～20mL的固液比加入体积浓度为50～70％的乙醇溶液，超声提取，提取液经滤膜过滤，得到粗提液；(2)按1mL粗提液加入0.3～0.5g磷酸锆的比例往粗提液中加入磷酸锆，摇床振荡12～24h，离心分离出液体，磷酸锆用水洗涤；其中，所述的磷酸锆的理化参数如下：晶胞参数为：其红外光谱数据(KBr)为：3450，1632，1114，980，752，547(cm-1)；上述磷酸锆由以下方法制得：A)取固体ZrOCl2·8H2O溶于去离子H2O后，在搅拌下缓慢滴加重量浓度为85％的磷酸溶液；得到的悬浊液继续反应3小时；其中，ZrOCl2·8H2O、H3PO4和去离子H2O的摩尔比为ZrOCl2·8H2O∶H3PO4∶H2O＝1∶2∶1000；B)反应结束后，离心得到磷酸锆固体，用去离子水洗涤至pH＝7，在烘箱中80℃烘干，再于马弗炉中500～1000℃煅烧1小时，即得白色磷酸锆；(3)按0.1g∶1mL固液比往洗涤后的磷酸锆中加入重量浓度为0.4％的磷酸去离子水溶液，摇床振荡12h，离心分离得到脱附液，滤膜过滤，滤液冷冻干燥，即得木麻黄素。本专利技术所述从茶叶末中提取分离木麻黄素的方法中，所述的超声提取的功率与物料体积比为2.5～5W∶1mL，超声提取的时间为50～70min。本专利技术所述从茶叶末中提取分离木麻黄素的方法中，步骤(2)和(3)中所述的摇床震荡的工作温度37℃，转速为150rpm。本专利技术所述方法针对木麻黄素的分子量、极性和化学结构，采用理化参数不同的磷酸锆为吸附剂对茶叶末的醇提物进行纯化，所得木麻黄素的纯度接近60％。本专利技术所述的方法除乙醇外，没有使用其他任何有机试剂，是一种环境友好型的分离方法。本专利技术方法操作简单、无需投入昂贵的生产设施、产品成本低，适于工业化生产。附图说明图1为本专利技术所述方法制得的磷酸锆的IR图谱。图2为本专利技术所述方法制得的磷酸锆的XRD图谱。图3为本专利技术所述方法制得的木麻黄素的ESI-MS图谱。图4为本专利技术所述方法制得的木麻黄素的NMR图谱。图5为本专利技术所述方法制得的木麻黄素的HPLC图谱。图6为本专利技术所述方法制得的茶叶粗提液的HPLC图谱。图7为CN105330544A中实施例6所述方法制得的磷酸锆的IR图谱。图8为CN105330544A中实施例6所述方法制得的磷酸锆的XRD图谱。具体实施方式实施例1一、磷酸锆的制备：1、取1.79g固体ZrOCl2·8H2O溶于100mL的去离子H2O后，缓慢滴加0.76mL浓磷酸(85％wt)，得到的悬浊液在室温下连续搅拌3小时。2、反应结束后，5000rpm离心得到的磷酸锆用去离子水洗涤至pH＝7，在烘箱中80℃烘干12h，于马弗炉中900℃煅烧1小时，即得白色磷酸锆。将制备的磷酸锆，溴化钾(KBr)压片后使用红外光谱(IR)进行分析，其红外光谱数据为：3450，1632，1114，980，752，547(cm-1)，相应的光谱图如附图1所示。对制备的磷酸锆进行X射线衍射(XRD)分析，XRD衍射图如图2所示，计算得到的晶胞参数为：二、木麻黄素的制备：1、取过40目筛的茶叶末1g，加入体积浓度为70％的乙醇溶液10mL，在50W/45kHz下超声提取60min；提取液经0.45μm滤膜过滤后，得到粗提液。2、向1mL粗提液中加入0.4g步骤一得到的磷酸锆，在37℃/150rpm的条件下，于震荡摇床上振荡吸附24小时；4000rpm离心1分钟，分离出的磷酸锆分别用10mL蒸馏水洗涤5次，得到洗涤后的磷酸锆。3、按0.1g洗涤后的磷酸锆中加入1mL重量浓度为0.4％的磷酸去离子水溶液的比例往磷酸锆中加入磷酸去离子水溶液，在37℃/150rpm条件下，于震荡摇床上振荡脱附12小时；4000rpm离心1分钟后，得到的脱附液用0.22μm滤膜过滤，滤液经冷冻干燥后得到褐色固体7.38mg。三、木麻黄素的鉴定：将制备的褐色固体溶于0.1％的甲酸溶液后，液相色谱-质谱联用仪(HPLC-MS)后，其MS图谱如图3所示，测得褐色固体中主要成分的荷质比(m/z)[M-H]为633.1，结合已有文献(Zhao,Y.；Chen,P.；Lin,L.；Harnly,J.M.；Yu,L.；Li,Z.,Tentativeidentification,quantitation,andprincipalcomponentanalysisofgreenpu-erh,green,andwhiteteasusingUPLC/DAD/MS.FoodChem2011,126,1269-1277.)，初步确定其结构为木麻黄素。为进一步确定其结构，使用制备HPLC对所得茶多酚中的主要成分进行分离，得到纯度大于95％的白色固体目标化合物，该白色固体溶于氘代丙酮后，对其进行NMR分析，其NMR图谱如图4所示，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从茶叶末中提取分离木麻黄素的方法，该方法由以下步骤组成：(1)取茶叶末，按1g∶10～20mL的固液比在茶叶末中加入体积浓度为50～70％的乙醇溶液，超声提取，提取液经滤膜过滤，得到粗提液；(2)按1mL粗提液加入0.3～0.5g磷酸锆的比例往粗提液中加入磷酸锆，摇床振荡12～24h，离心分离出液体，磷酸锆用水洗涤；其中，所述的磷酸锆的理化参数如下：晶胞参数为：其红外光谱数据(KBr)为：3450，1632，1114，980，752，547(cm‑1)；上述磷酸锆由以下方法制得：A)取固体ZrOCl2·8H2O溶于去离子H2O后，在搅拌下缓慢滴加重量浓度为85％的磷酸溶液；得到的悬浊液继续反应3～5小时；其中，ZrOCl2·8H2O、H3PO4和去离子H2O的摩尔比为ZrOCl2·8H2O∶H3PO4∶H2O＝1∶2∶1000；B)反应结束后，离心得到磷酸锆固体，用去离子水洗涤至pH＝7，在烘箱中80℃烘干，再于马弗炉中700～900℃煅烧1小时，即得白色磷酸锆；(3)按0.1g∶1mL固液比往洗涤后的磷酸锆中加入重量浓度为0.4％的磷酸去离子水溶液，摇床振荡12h，离心分离得到脱附液，滤膜过滤，滤液冷冻干燥，即得木麻黄素。...

【技术特征摘要】
1.一种从茶叶末中提取分离木麻黄素的方法，该方法由以下步骤组成：(1)取茶叶末，按1g∶10～20mL的固液比在茶叶末中加入体积浓度为50～70％的乙醇溶液，超声提取，提取液经滤膜过滤，得到粗提液；(2)按1mL粗提液加入0.3～0.5g磷酸锆的比例往粗提液中加入磷酸锆，摇床振荡12～24h，离心分离出液体，磷酸锆用水洗涤；其中，所述的磷酸锆的理化参数如下：晶胞参数为：其红外光谱数据(KBr)为：3450，1632，1114，980，752，547(cm-1)；上述磷酸锆由以下方法制得：A)取固体ZrOCl2·8H2O溶于去离子H2O后，在搅拌下缓慢滴加重量浓度为85％的磷酸溶液；得到的悬浊液继续反应3～5小时；其中，ZrOCl2·8H2O、H3PO4和去离子H2O的...

【专利技术属性】
技术研发人员：马意龙，刘凤茹，商亚芳，朱丹晔，王彩虹，
申请(专利权)人：合肥工业大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34