一种含有多效唑的植物生根壮苗培养基及制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种含有多效唑的植物生根壮苗培养基及制备方法和应用。本发明专利技术通过研究不同的添加物对植物试管苗的作用，筛选出一种高效的生根壮苗培养基，该植物生根壮苗培养基是在生根培养基中添加多效唑而制得，其中多效唑的浓度为0.3‑2.5mg/L，该培养基能够使试管苗和对照相比，不仅幼苗变矮壮、叶色深绿，且生根快、根变粗及根毛增多变长，移栽后，幼苗返青快，长势好，从而提高植物试管苗的移栽存活率，最终提高研究基因功能和组培育种的效率，在植物基因工程领域具有良好的应用前景。

A containing Paclobutrazol plant rooting and preparation method and Application

The invention relates to a containing Paclobutrazol plant rooting and preparation method and application. The role of the invention through the study of different additives on the in vitro plantlets, screening out an efficient rooting, the rooting plants in rooting medium and PP333 was prepared, the concentration of Paclobutrazol was 0.3 2.5mg/L, the medium can be compared to plantlets and control, not only seedling stocky, dark green leaves, and rooting fast, thick root and root hair increased long after transplanting, seedling reviving fast growing well, so as to improve the survival rate of transplanting plant seedlings, and ultimately improve the research of gene function and group breeding efficiency, and has good application prospect in the plant genetic engineering.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种植物生根壮苗培养基及其制备方法和应用，属于植物组织培养和转基因

技术介绍
植物组织培养技术是20世纪初发展起来的技术，是指在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞、原生质体等在合适的条件进行离体培养，诱导产生愈伤组织、不定芽等，之后形成完整植株的过程。组织培养技术因其具有可以利用各种人工培养条件控制细胞的生长、分化等优点，有力地推动了植物生理学、病理学、药学、遗传学、育种以及生物化学等学科的交叉发展，并广泛应用于农业、林业、园艺、工业、医药业等多种行业，产生巨大的经济效益和社会效益，归纳起来，有以下几个方面：1、苗木的离体快繁；2、培育脱毒苗；3、应用于植物育种如单倍体育种、原生质体融合、胚和胚乳的培养基转基因育种等；4、生产次生代谢产物如中药成分等；5、人工种子和种质保存；6、基因功能研究等。在合适的离体培养条件下，原来已经组织特异化的细胞，重新分裂形成具备全能性的细胞团，即愈伤组织，这一过程称为“脱分化”；经“脱分化”的全能细胞，重新形成根、芽以及输导系统等各种类型细胞的过程称为“再分化”。脱分化和分化是植物组织培养的重要环节，对组织培养效率起着决定性影响。除此之外，组织培养和基因转化所获得的试管苗往往长势较弱，根系不发达，移栽后成活率低，严重影响试管苗的培养效率和进一步的应用效果。因此，建立一种高效的植物生根壮苗系统，就显得尤为重要。多效唑(Paclobutrazol)是一种三唑类植物生长调节剂，是内源赤霉素合成的抑制剂，可提高水稻吲哚乙酸氧化酶的活性，降低稻苗内源IAA的水平。具有延缓植物生长，抑制茎杆伸长，缩短节间；减弱稻苗顶端生长优势，促进侧芽(分蘖)滋生，促进花芽分化；增加植物抗逆性能，提高产量等效果。多效唑都能被种子、叶、根部吸收，喷施多效唑后，秧苗外观表现矮壮多蘖，叶色浓绿，根系发达。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种植物生根壮苗培养基。本专利技术通过探索不同的添加物对植物试管苗的作用，筛选出一种生根壮苗培养基，使植物幼苗和对照比，不仅幼苗变矮壮且叶色深绿，生根快、变粗且根毛增多变长，移栽后，幼苗返青快，长势好，从而提高植物试管苗的移栽存活率，最终提高研究基因功能和组培育种的效率。本专利技术提供的植物生根壮苗培养基，其为含有多效唑的生根培养基。所述生根培养基包括但不限于MS培养基、N6培养基或B5培养基等，在本专利技术的一个实施例中，采用的生根培养基为1/2MS培养基。本专利技术的生根培养基包括但不限于1/2MS培养基。本专利技术实施例中所述1/2MS基础培养基为本领域通用术语，可市售获得，也可自行配制，其配方为公知常识。本专利技术的植物生根壮苗培养基中，多效唑的浓度为0.3-2.5mg/L。优选地，多效唑的终浓度为0.4-1.5mg/L。更优选地，多效唑的终浓度为0.5-1mg/L。进一步地，本专利技术的植物生根壮苗培养基还含有糖分，所述糖分在所述植物生根壮苗培养基中的浓度为15-25g/L，优选20g/L。本专利技术的植物生根壮苗培养基pH值为5.7-6.0。本专利技术的植物生根壮苗培养基还含有凝固剂，优选的凝固剂为Phytagel植物凝胶或琼脂粉。Phytagel植物凝胶是从假单胞菌分泌而来的一种琼脂的替代物，又名Gelrite,GeuamGum等。可从市售获得，例如SIGMA公司。所述Phytagel植物凝胶在所述生根壮苗培养基中的浓度为3-4g/L，优选为3g/L。所述琼脂粉在所述生根壮苗培养基中的浓度为6-8g/L，优选为7.5g/L。较佳地，上述生根壮苗培养基，是在1/2MS基础培养基中添加多效唑、蔗糖和Phytagel植物凝胶而制得；其中，所述多效唑、蔗糖和Phytagel植物凝胶在所述生根壮苗培养基中的浓度分别为0.5-1mg/L、20g/L、3g/L；所述生根壮苗培养基其pH值为5.7-6.0。本专利技术提供了上述植物生根壮苗培养基在培育植物试管苗、组织培养或基因转化中的应用，所述植物为水稻、玉米、小麦、大麦、小米、高粱、花生、大豆、甘薯、马铃薯、棉花或油菜。上述应用中，培养条件为温度28-35℃，光照培养，培养周期7-15d。本专利技术提供了多效唑在制备植物生根壮苗培养基中的应用，在生根培养基中添加多效唑，多效唑的终浓度为0.3-2.5mg/L，所述植物生根壮苗培养基能够使植物幼苗生根快，根变粗，根毛增多变长，移栽存活率高，移栽后，幼苗返青快，长势好。所述生根培养基包括但不限于1/2MS培养基、1/2N6培养基或1/2B5培养基。本专利技术还提供上述生根壮苗培养基在植物试管苗、组织培养及基因转化中的应用。本专利技术还提供一种培养生根壮苗的方法，包括以下步骤：将经组织培养获得的幼苗置于提前准备好的上述生根壮苗培养基上培养；优选地，上述培养条件为温度28-35℃，光照培养，培养周期7-15d。本专利技术的优点在于：1、本专利技术在培养基内添加0.3-2.5mg/L的多效唑，使试管苗变矮壮，叶色深绿，移栽后幼苗返青快，长势好，提高试管苗的移栽存活率。2、本专利技术培养条件为28-35℃，光照培养，在该条件下诱导试管苗生根，生根快，根粗且根毛增多变长。本专利技术通过摸索和实践，进一步优化植物生根壮苗培养基，最终摸索出一种高效的植物生根壮苗培养基。该生根培养基对水稻、玉米、小麦、大麦、花生、大豆、棉花等作物的试管苗、组织培养和基因功能研究等具有较强的实用价值。本专利技术所述的生根壮苗培养基具有使植物试管苗生根快，普通培养基用于生根培养时，长出新的根需要2d，而使用本专利技术培养基则只需1d，新根粗且根毛多而长(见图2)，苗矮壮、叶色深绿(见图3)且移栽后返青快，移栽2d后就返青、长势好的优点(见图5)，从而显著提高试管苗的移栽存活率，存活率可达到98％，最终提高研究基因功能和组培育种的效率。附图说明图1为水稻幼苗在不同培养基中生根壮苗培养15d后的根长、芽长及根数目的变化。添加多效唑的培养基可抑制茎叶徒长。1/2MS，生根培养基中不添加任何激素；MET0.5、MET1、MET1.5、MET2、MET2.5、MET3、MET5分别为生根培养基中添加多效唑0.5mg/L、1mg/L、1.5mg/L、2mg/L、2.5mg/L、3mg/L、5mg/L。图2为水稻幼苗在不同培养基中生根壮苗培养15d后的幼根显微结构。幼苗在添加多效唑的培养基中幼根粗壮且根毛极多且长。1/2MS，生根培养基中不添加任何激素；MET0.5、MET1、MET1.5、MET2、MET2.5、MET3、MET5分别为生根培养基中添加多效唑0.5mg/L、1mg/L、1.5mg/L、2mg/L、2.5mg/L、3mg/L、5mg/L。图3为水稻幼苗在不同培养基中生根壮苗培养15d后的生长状况。添加多效唑的培养基中幼苗矮壮、叶片宽厚、叶色深绿。1/2MS，生根培养基中不添加任何激素；MET0.5，生根培养基中添加多效唑0.5mg/L；MET1，MET1.5，MET2，MET2.5，MET3，MET5分别为生根培养基中添加多效唑1mg/L、1.5mg/L、2mg/L、2.5mg/L、3mg/L、5mg/L。图4为水稻幼苗在含0.5mg/LIBA的培养基1/本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种植物生根壮苗培养基，其特征在于，其为含有多效唑的生根培养基。

【技术特征摘要】
1.一种植物生根壮苗培养基，其特征在于，其为含有多效唑的生根培养基。2.如权利要求1所述的植物生根壮苗培养基，其特征在于，生根培养基中多效唑的终浓度为0.3-2.5mg/L。3.如权利要求2所述的植物生根壮苗培养基，其特征在于，生根培养基中多效唑的终浓度为0.4-1.5mg/L。4.如权利要求3所述的植物生根壮苗培养基，其特征在于，生根培养基中多效唑的终浓度为0.5-1mg/L。5.如权利要求1所述的植物生根壮苗培养基，其特征在于，还含有糖分，所述糖分在所述植物生根壮苗培养基中的浓度为15-25g/L。6.如权利要求1-5任一所述的植物生根壮苗培养基，其特征在于，该培养基pH值为5.7-6.0。7.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：安保光，陈思兰，欧阳超，吴永忠，黄培劲，
申请(专利权)人：海南波莲水稻基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：海南;46