一种用于检测载体GATV3转化事件的引物组、试剂盒和方法技术

本发明专利技术涉及生物工程技术领域中转基因植物的安全评估和检测方法，具体涉及一种用于检测载体GATV3转化事件的引物组、试剂盒和方法。所述引物组包括左边界特异性引物和/或右边界特异性引物；其中，左边界特异性引物包括GATV3

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测载体GATV3转化事件的引物组、试剂盒和方法


[0001]本专利技术涉及生物工程
中转基因植物的安全评估和检测方法，具体涉及一种用于检测载体GATV3转化事件的引物组、试剂盒和方法。

技术介绍

[0002]近年来，大豆、玉米、棉花和油菜等转基因作物已在很多国家获准种植和生产，有的被加工成食品、饲料或作食品添加剂。但转基因产品的生态安全和食用安全目前仍备受争议，需进行严格的监管。鉴定转化事件在基因组中的具体插入位点，根据外源载体插入的位点，判断宿主基因组插入失活和缺失的情况，推测该转化事件对宿主的影响和导致的安全性问题是监管的重要环节之一。
[0003]通过农杆菌介导的遗传转化获得的转基因作物中，T
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DNA在受体植物基因组中的整合位置都是随机的，每个转基因事件的T
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DNA左右端序列与受体基因组序列拼接而成的T
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DNA插入位点侧翼序列是唯一的，是区别不同转化事件的唯一性标识，是建立转基因植物品系特异性检测方法的重要技术资料。目前分离外源T/>‑
DN本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于检测载体GATV3转化事件的引物组，其特征在于，其包括左边界特异性引物和/或右边界特异性引物；所述左边界特异性引物包括GATV3
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LB
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R1、GATV3
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LB
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R2和GATV3
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LB
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R3，其序列依次分别如SEQ ID NO:1～3所示；所述右边界特异性引物包括GATV3
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RB
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F1、GATV3
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RB
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F2和GATV3
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RB
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F3，其序列依次分别如SEQ ID NO:4～6所示。2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，其还包括简并引物；优选所述简并引物包括LAD1、LAD3和AC1。3.一种试剂盒，其特征在于，其包括权利要求1或2所述的引物组。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，其还包括dNTPs、PCR缓冲液和耐高温DNA聚合酶。5.权利要求1或2所述的引物组或权利要求3或4所述的试剂盒在检测载体GATV3转化事件中的应用；优选地，所述应用具体包括在以下任一方面的应用：(1)检测待测样品中是否存在载体GATV3转化事件；(2)鉴定载体GATV3转化事件特异的侧翼序列；(3)鉴定载体GATV3转化事件的插入位点。6.一种检测载体GATV3转化事件的方法，其特征在于，其包括：使用权利要求1或2所述的引物组或权利要求3或4所述的试剂盒，以待测样品的DNA为模板，进行PCR扩增。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，其包括：对GATV3的左边界和/或右边界进行hiTail
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PCR扩增；在对GATV3的左边界进行hiTail
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PCR扩增时，具体包括：a)以待测样品的DNA为模板，以LAD1、LAD3和所述GATV3
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LB
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R1为引物，进行第1级PCR扩增；b)以第1级PCR扩增产物稀释40倍为模板，以AC1和所述GATV3
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LB
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R2为引物，进行第2级PCR扩增；c)以第2级PCR扩增产物稀释20倍为模板，以以AC...

【专利技术属性】
技术研发人员：金雄霞，安保光，王健华，吴永忠，黄培劲，曾翔，李新鹏，
申请(专利权)人：海南波莲水稻基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：