用于检测大丽轮枝菌的引物组合、试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于检测大丽轮枝菌的引物组合、试剂盒及应用。所述引物组合包括RPA引物对和crRNA；所述RPA引物对的靶标基因包括大丽轮枝菌ITS基因；所述crRNA的靶标基因包括大丽轮枝菌ITS基因。本发明专利技术提供的引物组合、试剂盒将RPA扩增技术和CRISPR检测技术结合起来，实现了对大丽轮枝菌的快速检测，具有灵敏度高，特异性强，检测效率高的优点。将本发明专利技术所述引物组合、试剂盒应用于大丽轮枝菌的检测，对因大丽轮枝菌感染导致的黄栌枯萎病的防治具有重要意义。有重要意义。有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
用于检测大丽轮枝菌的引物组合、试剂盒及应用


[0001]本专利技术涉及生物检测
，尤其涉及一种用于检测大丽轮枝菌的引物组合、试剂盒及应用。

技术介绍

[0002]黄栌(Cotinus coggygria)为漆树科(Anacardiaceae)黄栌属(Cotinus)植物，落叶灌木或小乔木，秋季叶色变红，极具观赏价值和经济价值，是北京香山公园秋季红叶景观的主要树种。自上世纪80年代香山发现黄栌枯萎病以来，其发生有逐年加重的趋势。该病害导致黄栌叶片萎蔫，同时自叶缘向内发黄，或失水卷曲，但通常不脱落；根、茎的维管束出现坏死，木质部与皮层交界处出现褐色带线，部分树杈迅速死亡，发病严重时可导致整株长势衰弱或死亡。
[0003]黄栌枯萎病的病原菌为大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)，其无性世代属于半知菌亚门(Deuteromycotina)丝孢纲(Hyphomycetes)轮枝孢属(Verticillium)，菌落表面常形成黑色微菌核，其温度适应范围较宽，具有耐高温特性。大丽轮枝菌为典型土壤习居菌，土壤中的微菌核萌发产生的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于检测大丽轮枝菌的引物组合，其特征在于，所述引物组合包括RPA引物对和crRNA；所述RPA引物对的靶标基因包括大丽轮枝菌ITS基因；所述crRNA的靶标基因包括大丽轮枝菌ITS基因。2.根据权利要求1所述的引物组合，其特征在于，所述RPA引物对包括上游引物和下游引物；所述上游引物的序列包括Seq_1、Seq_2、Seq_3和Seq_4中的一种；所述下游引物的序列包括Seq_5、Seq_6、Seq_7和Seq_8中的一种。3.根据权利要求2所述的引物组合，其特征在于，所述上游引物的序列包括Seq_1；所述下游引物的序列包括Seq_6。4.根据权利要求1所述的引物组合，其特征在于，所述crRNA包括框架核酸片段序列和向导序列；所述向导序列包括Seq_14、Seq_15和Seq_16中的一种。5.根据权利要求4所述的引物组合，其特征在于，所述框架核酸片段序列包括Seq_13；所述向导序列包括Seq_15。6.根据权利要求1
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5任意一项所述的引物组合，其特征在于，所述RPA引物对包括Seq_1和Seq_6；所述crRNA包括框架核酸片段序列Seq_13和向导序列Seq_15。7.用于检测大丽轮枝菌的试剂盒，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：王永林，陈琦，唐晨，黄建东，
申请(专利权)人：北京昌回林海生态科技有限公司，
类型：发明
国别省市：