本发明专利技术属于生物技术和医学领域，具体涉及一种SET基因在制备治疗和/或诊断胃癌产品中的应用。本发明专利技术证明SET在胃癌组织中频繁高表达(80％)，SET表达升高与胃癌病人的侵袭表型及更差预后显著相关(P<0.05)。低表达SET明显抑制胃癌细胞的迁移和侵袭。并且SET通过PP2A/Akt信号通路促进肿瘤恶性转化。此外，胃癌组织中SET的蛋白水平明显高于癌旁组织。因此SET基因可作为诊断胃癌的特异标志基因，使胃癌诊断更加准确、快速。本发明专利技术SET基因为防治胃癌提供了新的治疗靶点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物技术和医学领域，具体涉及一种SET基因在制备诊断和/或治疗胃癌产品中的应用。
技术介绍
胃癌是东亚(包括中国、日本和韩国)和东欧最常见的癌症之一。过去的半个世纪胃癌的发病率和死亡率已大有减少。在发达的国家，但它依然是死亡率最高的癌症之一。在中国，大约三分之二的胃癌患者会发生转移，>50％的患者有治疗后复发风险。转移和复发是患者死亡的重要原因。蛋白磷酸酶2A(proteinphosphatase2A,PP2A)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶，在多种细胞过程中发挥着重要作用，包括蛋白合成，信号转导，周期进程，凋亡，代谢，及应激反应等。作为肿瘤抑制因子，PP2A的活性丧失和多种肿瘤恶性转移及耐药密切相关。在肿瘤细胞中PP2A内源性抑制因子的过表达是PP2A活性丧失的重要原因。PP2A的内源性抑制因子包括CIP2A(cancerousinhibitorofproteinphosphatase2A)；蛋白磷酸酶2A抑制剂-1(inhibitorofproteinphosphatase2A-1,I1PP2A)；蛋白磷酸酶2A抑制剂-2(inhibitorofproteinphosphatase2A-2,I2PP2A)三种类型。三种PP2A抑制因子中，CIP2A研究得最为透彻，且其表达升高与多种肿瘤(包括结肺癌、乳腺癌、胃癌、白血病、结直肠癌等)的进展和转移相关。I2PP2A又称SET(patientSEtranslocation)，目前关于其基因和蛋白表达、功能调控的机制研究尚不丰富。
技术实现思路
本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点和不足，提供一种SET基因在制备诊断胃癌产品中的应用。本专利技术的另一目的在于提供上述基因在制备治疗胃癌产品中的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种SET基因在制备诊断胃癌产品中的应用，所述的诊断胃癌产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或基因芯片诊断胃癌的产品；所述的通过RT-PCR诊断胃癌的产品包括至少一对特异扩增SET基因的引物；所述的特异扩增SET基因的引物优选为引物SET-CDS-F和引物SET-CDS-R：引物SET-CDS-F：5’-ACTTCCCTAACAGCATGGCCCCT-3’；引物SET-CDS-R：5’-CTCCTTCATCCTCCTCTCCTTCC-3’。所述的通过实时定量PCR诊断胃癌的产品包括至少一对特异扩增SET基因的引物；所述的特异扩增SET基因的引物优选为引物SET-F和引物SET-R：引物SET-F：5’-AAATATAACAAACTCCGCCAACC-3’；引物SET-R：5’-CAGTGCCTCTTCATCTTCCTC-3’。所述的通过免疫检测诊断胃癌的产品包括：与胃癌蛋白特异性结合的抗体，包括多克隆抗体和单克隆抗体；所述的通过原位杂交诊断胃癌的产品包括：与SET基因的核酸序列杂交的探针；所述的通过基因芯片诊断胃癌的产品包括：与SET基因的核酸序列杂交的探针；在本专利技术中，可以使用一系列本领域已知的方法来制备针对SET蛋白特异的抗体。例如，将提纯的人SET基因产物或它的抗原片段注射入动物体内以产生多克隆抗体。同样，表达人SET蛋白或它的抗原片段的细胞也可以用来对动物致免疫而产生抗体。根据本专利技术制备的抗体也可以是单克隆抗体，这些单克隆抗体可用杂交瘤技术制备。本专利技术的抗体包括可以阻抑SET功能的抗体，也可以是不影响人SET功能的抗体。每一类抗体都可以通过对人SET基因产物的片段或功能域致免疫而产生，而人SET基因产物及其片段可以用重组方法产生或用多肽合成仪进行合成。与非修饰形式的SET基因产物结合的抗体，可以利用在原核细胞例如E.coli中产生的基因产物来免疫动物而得到。与翻译后修饰形式如糖基化或磷酸化SET蛋白或多肽结合的抗体，可以利用在真核细胞如酵母或昆虫细胞中产生的基因产物来免疫动物而得到。在本专利技术中，所述探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述探针的长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最长一般不超过30个碱基对，与目的核苷酸序列互补的长度以15～25个碱基对最佳。所述探针自身互补序列最好少于4个碱基对，以免影响杂交效率。一种SET基因在制备治疗胃癌产品中的应用，所述的治疗胃癌产品包括：通过RNA干扰抑制SET基因表达的双链核糖核酸、基于SET抗原蛋白的肿瘤疫苗和用于抑制SET蛋白活性的化学分子。所述的通过RNA干扰抑制SET基因表达的双链核糖核酸优选为靶向SET基因的siRNA；所述的靶向SET基因的siRNA靶向序列为siRNA#1或siRNA#2；所述的siRNA#1的靶向序列为：siRNA#1：5’-AACCATCCACAAGTGTCTGCA-3’；所述的siRNA#2的序列为：siRNA#2：5’-AAGATGAAGAGGCACTGCATT-3’。在本专利技术中，所述RNA干扰(RNAinterference，RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-strandedRNA，dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。以细胞为基础的RNAi筛选在功能基因学研究方面具有许多优势，主要表现在大多数细胞类型都能使用RNAi方法，并且相对较容易下调或沉默任何目的基因的表达。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：(1)本专利技术实验证明SET在胃癌组织中频繁高表达(81％)，SET表达升高与胃癌病人的侵袭表型及更差预后明显相关(P<0.05)。低表达SET显著抑制胃癌细胞的迁移和侵袭。并且通过调节PP2A/Akt信号通路促进胃癌恶性转化。此外，胃癌组织中SET的蛋白水平明显高于癌旁组织。因此SET基因可作为胃癌诊断或预后判断标志物。(2)本专利技术SET基因为防治胃癌提供了新的治疗靶点。附图说明图1为SET在MKN28、MGC803、BGC823、SGC7901四种胃癌细胞系及正常胃黏膜上皮细胞系(GES-1)中基因及蛋白表达图。图2为胃癌患者及正常胃组织中SET表达情况分析。其中：图2A是免疫组化染色强度结果分析图；图2B为IHC检测25例正常胃组织和102例胃癌组织中SET的表达水平分析图。图3为胃癌患者组织中SET中低表达及高表达总体生存时间比较。图4是实施例4中增殖和侵袭实验结果分析图，NC：瞬转表达NCshRNA的胃癌细胞；shSET：瞬转SETshRNA的胃癌细胞。其中，图4A为Westernblot检测胃癌细胞中shRNA对SET的干扰效果；图4B为荧光定量PCR检测胃癌细胞中shRNA对SET的干扰效果；图4C为NC组和shSET组显微镜下侵袭变化；图4D为NC组和shSET组显微镜下迁移变化。具本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种靶向SET基因的siRNA在制备治疗胃癌产品中的应用，其特征在于：所述的靶向SET基因的siRNA靶序列为siRNA#1或siRNA#2；所述的siRNA#1的序列为：siRNA#1：5’‑AACCATCCACAAGTGTCTGCA‑3’；所述的siRNA#2的序列为：siRNA#2：5’‑AAGATGAAGAGGCACTGCATT‑3’。
【技术特征摘要】
1.一种靶向SET基因的siRNA在制备治疗胃癌产品中的应用，其特征在于：所述的靶向SET基因的siRNA靶序列为siRNA#1或siRNA#2；所述的siRNA#1的序列为...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘莹，钦闪闪，季娟丽，张云飞，张亮，孙智婷，
申请(专利权)人：湖北医药学院，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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