一种基于反相色谱飞行时间质谱的喉癌血清差异代谢物的测定筛选方法技术

一种基于反相色谱飞行时间质谱的喉癌血清差异代谢物的测定筛选方法，其特征在于：血清经过有机溶剂‑甲醇沉淀蛋白以后，然后离心、真空离心干燥，然后复溶于200µL的纯水，引入反相色谱飞行时间质谱仪进行测定，经过峰对齐、校正和标准化、多变量统计分析和谱库检索可以找到喉癌志愿者和健康志愿者血清中的差异代谢物。本发明专利技术为全新的血清中差异代谢物的鉴定方法，通过差异代谢物可以反应喉癌患者血清代谢物的变化情况，将有助于喉癌的诊断、临床治疗、预后判断及其发病机制的研究。

【技术实现步骤摘要】

：本专利技术属于血清的理化检验
，具体说是一种基于反相色谱飞行时间质谱的喉癌血清差异代谢物的测定筛选方法。
技术介绍
：常见的喉癌类型为鳞片状细胞癌，具有高发病率和高复发率的特点，且容易发生颈部淋巴结转移。在喉癌的治疗中主要采用手术为主的喉切术，并辅以放化疗，但其对于化疗不敏感，且容易引起患者发音、吞咽功能差，生存质量降低等问题，早期喉癌治疗效果较好而晚期喉癌疗效差，但对于喉癌的早期诊断仍然缺乏十分有效的生物标志物。因此，新的生物标志物的发现对于临床上实现喉癌的早期诊断和治疗具有重要意义。代谢组学是继基因组学和蛋白质组学之后新近发展起来的一门学科，是对某一生物或细胞在一特定生理时期内所有低分子量代谢产物同时进行定性和定量分析的一门新学科。代谢组学技术可以发现新的生物标志物，这将有助于头颈癌的诊断、临床治疗、预后判断及其发病机制的研究。对于具有诊断功能的生物标志物的发现，往往采用非入侵或者少入侵的体液，如血液和尿液等。尿液中包含许多的代谢终产物，以及营养物质、药物和外源性物质的代谢物，而血液反应的往往是一些内生性的代谢物。但是对于临床诊断，往往多采用血液，这是因为24小时尿液样本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于反相色谱飞行时间质谱的喉癌血清差异代谢物的测定筛选方法，其特征在于：是以喉癌志愿者和健康志愿者血清为样本进行测定、比较、筛选，具体包括以下工艺步骤：a、血液在室温下解冻，移取400 µL的血清，加入1200 µL的甲醇，涡旋混合15 s，然后以15800 g离心力在离心机中离心15 min；b、移取370 µL的上清液于2 mL的离心管中，然后于真空离心机中离心干燥，然后复溶于200 µL的纯水中，然后装入色谱瓶中待测；c、反相色谱飞行时间质谱对所有血清样本进行逐一分析，得原始数据；反相色谱条件为：采用ACQUITY UPLC® BEH柱 ，规格2.1 × 150 mm, 1.7 µm...

【技术特征摘要】
1.一种基于反相色谱飞行时间质谱的喉癌血清差异代谢物的测定筛选方法，其特征在于：是以喉癌志愿者和健康志愿者血清为样本进行测定、比较、筛选，具体包括以下工艺步骤：a、血液在室温下解冻，移取400µL的血清，加入1200µL的甲醇，涡旋混合15s，然后以15800g离心力在离心机中离心15min；b、移取370µL的上清液于2mL的离心管中，然后于真空离心机中离心干燥，然后复溶于200µL的纯水中，然后装入色谱瓶中待测；c、反相色谱飞行时间质谱对所有血清样本进行逐一分析，得原始数据；反相色谱条件为：采用ACQUITYUPLC®BEH柱，规格2.1×150mm,1.7µm进行分离，柱子温度为50ºC，流动相A为0.1%的甲酸水，流动相B为0.1%的甲酸乙腈，流动相流速为385μL/min，梯度洗脱，总分析时间为38min，进样量为5μL；飞行时间质谱检测器的条件：电喷雾离子...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡清源，侯宏卫，张小涛，陈欢，刘勇，王安，刘彤，韩书磊，付亚宁，
申请(专利权)人：国家烟草质量监督检验中心，中国科学院合肥物质科学研究院，
类型：发明
国别省市：河南;41