一种3-氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法技术

本发明专利技术属于药物分析技术领域，具体涉及一种3-氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法。本发明专利技术采用(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯为衍生化试剂与3-氨基哌啶进行快速单衍生化反应，然后使用普通反相HPLC-UV对(R)-(+)-1-苯基乙磺酰-3-氨基哌啶进行定性、定量分析和对映体过量率的测定。该方法操作简单、快速、重现性好、灵敏度高、易于标准化操作。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种3-氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法。
技术介绍
3-氨基哌啶虽然分子结构中有两个氮原子，但由于氮原子的孤对电子能量较低，所以3-氨基哌啶在紫外区几乎无吸收，因此采用传统的HPLC-UV方法对3-氨基哌啶进行准确可靠的定性和定量就变得无力。王灿辉等（CN103435538B）采用3-氨基哌啶的1,3位氮上分别用叔丁氧羰基取代，采用chiralparkAD-H4.6×250手性色谱柱在215nm对其进行分析，流动相为正己烷，流速1.0mL/min，出峰时间未报道。Meek等(WO2011160037)采用CrownpakTMCR+(150×4.6mm)手性柱，示差折光检测器直接对3-氨基哌啶进行检测，其流动相为95:5（V:V）的HClO4(pH=1):MeOH，柱温0℃，流速0.6mL/min，(S)-3-氨基哌啶3.0min出峰，(R)-3-氨基哌啶3.7min出峰。但实际上示差折光检测器对分析的样品量要求很大。Watanabe等人（TetsuyaAssigneeSumitomoChemicalCo.,Ltd.,Japan2009）采用氯甲酸丙酯为衍生化试剂对3-氨基哌啶进行衍生，采用CHIRALCELAS-RH(150×4.6mm)手性柱在254nm下对衍生物进行分析，其流动相组成为70:30（V:V）的水:乙腈，流速1.0mL/min，(S)-衍生物19.1min出峰，(R)-衍生物31.5min出峰。孙凤霞等(CN104007202ACN104034814A)采用苯甲酰氯为衍生化试剂对3-氨基哌啶分别进行单衍生化和双衍生化，使用CHIRAL-AGP(150×4.6mm)手性柱，在254nm下对衍生物进行分析。3-氨基哌啶是利拉利汀的重要中间体，建立并确定3-氨基哌啶的定性、定量以及对应异构体的分离检测方法对3-氨基哌啶的检测和监测具有重要意义。HPLC检测法具有检测灵敏度高、精确度高，检测所需时间少，检测结果重复性高等优点，是当前分析化学中常用检测手段。相比示差折光检测器，紫外检测器具有更高的灵敏度和稳定性。但由于3-氨基哌啶及其手性异构体紫外吸收很弱，使用常规的紫外检测存在末端吸收干扰等问题，通常采用衍生化方法使之紫外吸收增强从而提高检测灵敏度。而通过与带紫外吸收的手性试剂进行选择性衍生化，得到既有紫外吸收又带有两个手性基团的衍生物，直接在反相高效液相上进行对应体过量率的分析。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种3-氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法，可以快捷准确的实现定性、定量和对映体过量率分析。为了实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：一种3-氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法，具体包含如下步骤：步骤一、衍生化将3-氨基哌啶溶于有机溶剂中，在低温条件下，以(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯为衍生化试剂，控制3-氨基哌啶和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的摩尔比，进行单衍生化反应，得到衍生化后的3-氨基哌啶，反应式见式I；式I步骤二、分离检测采用反相高效液相色谱-紫外检测器对衍生化后的3-氨基哌啶进行定性、定量和对映体过量率测定。所述的有机溶剂选自石油醚、甲苯、四氢呋喃、二氯甲烷和己烷中的一种或两种以上的组合。所述的有机溶剂与3-氨基哌啶的体积比为5~400:1，优选的体积比范围为5~30:1。所述的低温条件是指从-20℃~20℃，优选-5℃~5℃。所述的3-氨基哌啶和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的摩尔比为1:0.5~1，优选的摩尔比是1:1。所述的紫外检测器的检测波长为220~300nm，优选230~260nm。所述的反相高效液相色谱的色谱柱是普通反相柱，优选的色谱柱为反相C18柱，最优的为迪马反相C18柱（250×4.6mm，5μm，pH范围2.0~8.0）。所述的反相高效液相色谱的流动相由水和有机溶剂组成，有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇和乙腈中的一种或两种；有机溶剂占流动相的体积比例范围为50%~100%，优选的范围为60%~80%。所述的流动相流速为0.2~3.0mL/min，优选的流速为1.0mL/min。本专利技术中，反相高效液相色谱分析条件优选为：迪马反相C18柱，流动相为水-乙腈(体积比为30:70)，紫外检测波长为254nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样量为20μL。与现有技术相比，本专利技术所取得的有益效果如下：本专利技术给出3-氨基哌啶的衍生化方法，以(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯为衍生化试剂，通过控制反应条件，(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯选择性与3-氨基哌啶的伯胺反生反应，并建立了衍生化后的3-氨基哌啶的定性、定量和手性e.e.值的高效液相色谱分析方法。该方法操作简单、重现性好、灵敏度高、准确性强、便于标准化操作，衍生化产物性质稳定。通过对衍生化后的3-氨基哌啶进行定性、定量和对映体过量率分析，从而实现对3-氨基哌啶的定性、定量和对映体过量率（手性e.e.值）分析。附图说明图1：(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(RS)-3-氨基哌啶衍生化后色谱图；图2：(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(R)-3-氨基哌啶衍生化后色谱图；在附图中：1为(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(R)-3-氨基哌啶的衍生物；2为(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯和(S)-3-氨基哌啶的衍生物。具体实施方式以下结合附图对本专利技术进行进一步详细的叙述。实施例1：(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与3-氨基哌啶衍生物的液相色谱分析1-1：(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(RS)-3-氨基哌啶衍生物的液相色谱分析称取(RS)-3-氨基哌啶3.09g(0.03mol)，溶于50mL二氯甲烷中，在5℃下搅拌，缓慢滴加(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯6.14g(0.03mol)。TLC监测反应，反应结束后蒸干溶剂得(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(RS)-3-氨基哌啶衍生物。将(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(RS)-3-氨基哌啶的衍生物用流动相溶解后采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：迪马C18色谱柱，流动相为水-乙腈(体积比30:70)，紫外检测波长为254nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样体积20μL，保留时间和手性纯度分析见表1，其图谱见图1。1-2：(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(R)-3-氨基哌啶衍生物的液相色谱分析取(R)本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种3‑氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法，其特征在于，具体包含如下步骤：步骤一、衍生化将3‑氨基哌啶溶于有机溶剂中，在低温条件下，以(R)‑(+)‑1‑苯基乙磺酰氯为衍生化试剂，控制3‑氨基哌啶和(R)‑(+)‑1‑苯基乙磺酰氯的摩尔比，进行单衍生化反应，得到衍生化后的3‑氨基哌啶，反应式见式I；式I步骤二、分离检测采用反相高效液相色谱‑紫外检测器对衍生化后的3‑氨基哌啶进行定性、定量和对映体过量率测定。

【技术特征摘要】
1.一种3-氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法，其特征在于，具体包含如下步骤：
步骤一、衍生化
将3-氨基哌啶溶于有机溶剂中，在低温条件下，以(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯为衍生化
试剂，控制3-氨基哌啶和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的摩尔比，进行单衍生化反应，得到衍生
化后的3-氨基哌啶，反应式见式I；
式I
步骤二、分离检测
采用反相高效液相色谱-紫外检测器对衍生化后的3-氨基哌啶进行定性、定量和对映
体过量率测定。
2.根据权利要求1所述的一种3-氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法，其特征在于，
所述的有机溶剂选自石油醚、甲苯、四氢呋喃、二氯甲烷和己烷中的一种或两种以上的组
合。
3.根据权利要求1所述的一种3-氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法，其特征在于，
所述的有机溶剂与3-氨基哌啶的体积比为5~400:1，优选的体积比范围为5~30:1。
4.根据权利要求1所述的一种3-氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法，其特征在于，
所述的低温条件是指从-20℃~20℃，优选-5℃~5℃。
5.根据权利要求1所述的一种3-氨基哌啶对映异构体过量率的测定方法，其特征在于，
所述的3-氨基哌啶和(R)-(...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙凤霞，白少玲，孔飞飞，孔琳，张琛，韩珊，
申请(专利权)人：河北科技大学，
类型：发明
国别省市：河北;13