一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法技术

本发明专利技术属于药物分析技术领域，具体涉及3-氨基哌啶手性纯度的分析方法。本发明专利技术提供了一种条件温和、快速，检测灵敏度高、重复性好、易于标准化操作，可用于工业化生产中3-氨基哌啶手性纯度的测定，即提供一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法。该分析方法以 (R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯为衍生化试剂与3-氨基哌啶进行快速双衍生化反应，通过反相高效液相色谱与紫外联用对(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯和3-氨基哌啶衍生物进行手性纯度分析，从而实现对3-氨基哌啶的手性纯度分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法。
技术介绍
(R)-3-氨基哌啶是Ⅱ型糖尿病新药利拉利汀、阿格列汀的重要中间体。利拉利汀是德国勃林格殷格翰制药公司2011年上市的口服降糖药。阿格列汀是由日本武田制药公司开发的DPP-Ⅳ抑制剂，于2013年1月获美国FDA批准上市。利拉利汀、阿格列汀分子结构中只有一个手性中心，由中间体(R)-3-氨基哌啶引入，因此(R)-3-氨基哌啶的光学纯度直接决定了利拉利汀、阿格列汀的光学纯度和药效。制备高标准、高光学纯度的(R)-3-氨基哌啶，对于合成新药利拉利汀、阿格列汀具有重要理论意义与实际意义。Meek等(WO2011160037)采用CrownpakTMCR+(150×4.6mm)手性柱，示差折光检测器直接对3-氨基哌啶进行检测，孙凤霞等(CN104007202ACN104034814A)采用苯甲酰氯为衍生化试剂对3-氨基哌啶分别进行单衍生化和双衍生化，使用CHIRAL-AGP(150×4.6mm)手性柱，在254nm下对衍生物进行分析，Watanabe等人（TetsuyaAssigneeSumitomoChemicalCo.,Ltd.,Japan2009）采用氯甲酸丙酯为衍生化试剂对3-氨基哌啶进行衍生，采用CHIRALCELAS-RH(150×4.6mm)手性柱在254nm下对衍生物进行分析。示差折光检测器灵敏度低，进样量大，误差较大。而以紫外进行的检测，既衍生化又采用价格昂贵的手性柱。相比示差折光检测器，紫外检测器具有更高的灵敏度和稳定性。但由于3-氨基哌啶及其手性异构体紫外吸收很弱，使用常规的紫外检测存在末端吸收干扰等问题，通常采用衍生化方法使之紫外吸收增强从而提高检测灵敏度。而通过与手性试剂进行衍生化，得到具有三个手性基团的衍生物，能够直接在反相柱上进行异构体的分析。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种3-氨基哌啶3-氨基哌啶手性纯度的分析方法，可以快捷准确的实现定性、定量和对映体过量率分析。为了实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法，具体包含如下步骤：步骤一、衍生化将3-氨基哌啶溶于有机溶剂中，在一定的温度条件下，以(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯为衍生化试剂，控制3-氨基哌啶和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的摩尔比，进行双衍生化反应，得到衍生化后的3-氨基哌啶，反应式见式I；步骤二、分离检测采用反相高效液相色谱-紫外检测器对衍生化后的3-氨基哌啶进行定性、定量和对映体过量率测定。所述的有机溶剂选自庚烷、己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿和四氯化碳中的一种或两种以上的组合。所述的有机溶剂与3-氨基哌啶的体积比为0.5~300:1，优选的体积比范围为2~20:1。所述的一定温度是指从15℃到回流温度。本专利技术的回流温度具体数值与有机溶剂的选择有关，本领域技术人员可以根据溶剂的选择清楚的确定回流温度的范围。所述的3-氨基哌啶和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的摩尔比为1:2~5，优选的摩尔比是1:2。所述的紫外检测器的检测波长为210~300nm，优选220~260nm。所述的反相高效液相色谱选自十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱、辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱或者苯基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，优选十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱。所述的反相高效液相色谱的流动相由水和有机溶剂组成，有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇和乙腈中的一种或两种；有机溶剂占流动相的体积比例范围为40%～90%，优选的范围为60%~80%。所述的流动相中还添加有表面活性剂，所述表面活性剂选自二乙胺、三乙胺、季铵盐、磺酸盐。所述的流动相流速为0.5~3.0mL/min，优选的流速为1.0mL/min。所述柱温为20~40℃，优选的柱温为30℃。所述衍生化后的3-氨基哌啶在反相高效液相色镨的进样浓度为0.005~5mg/mL，优选的浓度为0.1~1mg/mL。本专利技术中，反相高效液相色谱分析条件优选为：AgilentC18色谱柱，流动相为甲醇-水（体积比为30:70），紫外检测波长为254nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样体积20μL。与现有技术相比，本专利技术所取得的有益效果如下：本专利技术给出了3-氨基哌啶的衍生化方法，通过对(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯和3-氨基哌啶衍生物进行手性纯度分析，从而实现对3-氨基哌啶的手性纯度分析。通过控制反应条件，快速生成(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯和3-氨基哌啶的衍生物，建立了对(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯和3-氨基哌啶衍生物手性纯度的高效液相色谱分析方法。该方法操作简单、重现性好、灵敏度高、准确性强，便于标准化操作。为糖尿病新药利拉利汀、阿格列汀进一步深入研发创造了不可或缺的条件。附图说明图1：(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(R)-3-氨基哌啶衍生化后色谱图；图2：(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(RS)-3-氨基哌啶衍生化后色谱图；在附图中：1为(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(R)-3-氨基哌啶的衍生物；2为(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯和(S)-3-氨基哌啶的衍生物。具体实施方式以下结合附图对本专利技术进行进一步详细的叙述。实施例1：(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与3-氨基哌啶衍生物的液相色谱分析1-1：(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(R)-3-氨基哌啶衍生物的液相色谱分析取(R)-3-氨基哌啶3.09g(0.03mol)，溶于60mL庚烷中，30℃下搅拌，缓慢加入(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯12.29g(0.06mol)。TLC监测反应，反应结束后蒸干得(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(R)-3-氨基哌啶衍生物。将(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(R)-3-氨基哌啶衍生物用流动相溶解，浓度为0.05mg/mL，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：AgilentC18色谱柱，流动相为甲醇-水（体积比为70:30），紫外检测波长为254nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样体积20μL，保留时间和手性纯度分析见表1，其图谱见图1。1-2：(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯与(RS)-3-氨基哌啶的衍生物的液相色谱分析取(RS)-3-氨基哌啶3.09g(0.03mol)，溶于60mL庚烷中，30℃下搅拌，缓慢加入(R)-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种3‑氨基哌啶手性纯度的分析方法，其特征在于，具体包含如下步骤：步骤一、衍生化将3‑氨基哌啶溶于有机溶剂中，在一定的温度条件下，以(R)‑(+)‑1‑苯基乙磺酰氯为衍生化试剂，控制3‑氨基哌啶和(R)‑(+)‑1‑苯基乙磺酰氯的摩尔比，进行双衍生化反应，得到衍生化后的3‑氨基哌啶，反应式见式I；式I步骤二、分离检测采用反相高效液相色谱‑紫外检测器对衍生化后的3‑氨基哌啶进行定性、定量和对映体过量率测定。

【技术特征摘要】
1.一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法，其特征在于，具体包含如下步骤：
步骤一、衍生化
将3-氨基哌啶溶于有机溶剂中，在一定的温度条件下，以(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯为
衍生化试剂，控制3-氨基哌啶和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的摩尔比，进行双衍生化反应，得
到衍生化后的3-氨基哌啶，反应式见式I；
式I
步骤二、分离检测
采用反相高效液相色谱-紫外检测器对衍生化后的3-氨基哌啶进行定性、定量和对映
体过量率测定。
2.根据权利要求1所述的一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法，其特征在于，所述的有
机溶剂选自庚烷、己烷、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、氯仿和四氯化碳中的一种或两种以上的
组合。
3.根据权利要求1所述的一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法，其特征在于，所述的有
机溶剂与3-氨基哌啶的体积比为0.5~300:1，优选的体积比范围为2~20:1。
4.根据权利要求1所述的一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法，其特征在于，所述的一
定温度是指从15℃到回流温度。
5.根据权利要求1所述的一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法，其特征在于，所述的3-
氨基哌啶和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的摩尔比为1:2~5，优选的摩尔比是1:2。
6.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙凤霞，郝飞飞，孔琳，郝忠翠，周蒙，张琛，
申请(专利权)人：河北科技大学，
类型：发明
国别省市：河北;13