从多重峰色谱图中剥离出单独峰的方法技术

本发明专利技术涉及一种从多重峰色谱图中剥离出单独峰的方法。该方法的过程包括：峰形的拟合和迭代计算，其中，拟合首先确定待拟合的单独峰顶点及拟合单独峰所用的峰形前沿和后沿，然后根据确定的峰形前沿和后沿经过伸缩变化和横坐标的平移完成峰形的拟合；迭代计算是用多重峰的峰形分别减去拟合得到的单独峰的叠加峰形；不断重复拟合和迭代过程直至得到的连续两次迭代单独峰面积的误差小于0.01％停止，并把最后一次的迭代峰形作为从多重峰色谱图中剥离出单独峰。本发明专利技术的优点在于：可以对n重逢色谱图进行剥离，应用范围广；应用excel办公软件或其它计算机程序下完成，操作简单；最终定量误差能控制在1％以内，定量精度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。属于色谱定量和色谱峰形分析的改进技术。
技术介绍
多重峰是指由于柱温高、流动相流速大、柱效低或死体积大等原因造成待分离组分尚未完全分开而使得峰形叠加在一起的色谱峰形，实验室中常见的多重峰以3-5重为主。随着分析样品的日益复杂化和分离条件难以最优化，色谱图中多重峰的重叠现象日益显著。实现多重峰的剥离成为了色谱定量和峰形研究中的一个技术难题。针对于这种难题的解决办法，传统上往往采用垂直切割法和切线法。但是这两种方法只能对于正常的拖尾峰具有较好的定量结果，对于一些不规则的峰形定量误差往往超过20%。范国樑等确定了色谱二重峰中剥离出单独峰的方法(ZL200410094021)，将定量误差控制在5%以内。但是这种方法仅仅局限于二重峰的剥离定量，对于多重峰的剥离定量无能为力。同时，该方法通过修正的塔板理论实现对单独峰的模拟，方法繁琐、参数较多且实施起来难度较大。因此， 一种适用性更为广泛、实施简单、定量误差小的方法有待开发。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种从多重峰色谱图中剥离单独峰方法，该方法具有实用性更为广泛、实施简单、定量误差小的特点，它为色谱定量和峰形研究提供技术支持。本专利技术是通过下述技术方案加以实现的，一种，其特征在于包括以下过程1.第一次拟合(1)根据多重峰的形状，以确定极大值的方法准确确定多重峰中每个峰的顶点，以所确定的顶点近似替代第一次拟合单独峰的顶点；(2)依据步骤(1)所确定的多重峰的每个峰的顶点，以及以多重峰的前沿和后沿构造出各个单独峰的前沿和后沿读出多重峰的每个峰的顶点的纵坐标、多重峰前沿最高点的纵坐标和后沿最高点的纵坐标，根据每个峰的顶点的纵坐标与多重峰前沿最高点的纵坐标之比求出纵向修正系数a2……知，再由a2……知的值乘以多重峰的前沿曲线的各点纵坐标确定每个单独峰的前沿；根据每个峰的顶点的纵坐标与多重峰后沿最高点的纵坐标之比求出纵向修正系数b1; b2……bn，再由b1; b2……比值乘以多重峰的后沿曲线的各点纵坐标确定每个单独峰的后沿；(3)将步骤( 所确定的每个单独峰的前沿和后沿平移到依据步骤(1)所确定的每个峰的顶点，构成独立的η个单独峰，则完成了第一次单独峰的拟合；2.第一次迭代用多重峰的峰形减去第一次拟合得到的单独峰2、3……η的叠加峰形，第一次迭代出单独峰1的峰形；用多重峰的峰形减去第一次拟合得到的单独峰1，3……η的叠加峰形，第一次迭代出单独峰2的峰形；……；用多重峰的峰形减去第一次拟合得到的单独峰1， 2……n-1的叠加峰形，第一次迭代出单独峰η的峰形；3.第二次拟合(1)依据步骤2所确定的第一次迭代的每个单独峰的顶点，以及以第一次迭代单独峰1的前沿和第一次迭代单独峰η后沿构造出第二次拟合单独峰的前沿和后沿读出第一次迭代出的每个单独峰的顶点的纵坐标、第一次迭代计算出的单独峰1的前沿最高点的纵坐标和单独峰η的后沿最高点的纵坐标，根据每个第一次迭代单独峰的顶点的纵坐标与第一次迭代单独峰1的前沿最高点的纵坐标之比求出纵向修正系数a2……知，再由 ， a2……％的值乘以第一次迭代单独峰1的前沿曲线的各点纵坐标，确定出第二次拟合的每个单独峰的前沿；根据每个第一次迭代单独峰的顶点的纵坐标与第一次迭代出的单独峰η 后沿最高点的纵坐标之比求出纵向修正系数b1; b2……bn，再由b1; b2……bn的值乘以第一次迭代出的单独峰η的后沿曲线的各点纵坐标，确定出第二次拟合的每个单独峰的后沿；(2)将步骤(1)所确定的第二次拟合的每个单独峰的前沿和后沿平移到依据步骤 2所确定第一次迭代的每个单独峰的顶点，构成第二次拟合的η个单独峰；4.第二次迭代对步骤3完成的第二次拟合出的η个单独峰依据步骤2的方法进行第二次迭代， 得到第二次迭代的η个单独峰；5.第三次拟合对步骤4完成的第二次迭代出的η个单独峰依据步骤3的方法进行第三次拟合， 得到第三次拟合的η个单独峰；6.第三次迭代对步骤5完成的第三次拟合出的η个单独峰依据步骤2的方法进行第三次迭代， 得到第三次迭代的η个单独峰；7.重复拟合和迭代不断重复以上步骤5和步骤6的拟合和迭代过程，当连续两次迭代出的单独峰的面积误差小于0.01%时，停止迭代计算；8.峰形定量将最后一次迭代计算出的单独峰形曲线用于定量和峰形分析，从而完成从多重峰色谱图中剥离出单独峰的过程。本专利技术的优点在于对于已知多重峰色谱图，只要找到多重峰中每个峰的顶点即可逐步进行拟合与迭代计算从而实现对η重峰色谱图进行剥离，该方法应用范围广；在得到多重峰形的原始数据后，即可以在excel或是其它计算机程序下完成，操作简单；最终定量误差能控制在1 %以内，定量精度高。附图说明图1为本专利技术从多重峰色谱图中剥离出单独峰的实施过程流程图2为经过人为叠加的四重峰色谱在图2中，A，B，C和D点为准确确定的四重峰色谱图的四个顶点；E和F点分别为四重峰前沿的起始点和后沿的终止点；曲线EA表示四重峰的前沿曲线，曲线DF表示四重峰的后沿曲线。图3为对于图2第一次拟合计算出的四个单独峰与真实单独峰的比较在图3中，拟合单独峰1-4分别表示经过第一次拟合得到的单独峰1-4。图4为对于图2第二次拟合计算出的四个单独峰与真实单独峰的比较图5为对于图2第三次拟合计算出的四个单独峰与真实单独峰的比较图6为对于图2第四次拟合计算出的四个单独峰与真实单独峰的比较图7为对于图2应用本专利技术从多重峰色谱图中剥离出的单独峰与真实单独峰的比较图8为对异戊醇、1，4_ 二氧六环、乙酸丁酯和乙酸异戊酯实测的四重峰色谱图9为对于图8应用本专利技术方法从四重峰色谱图中剥离出的单独峰色谱图。上述图各单独峰中，实线表示拟合单独峰，虚线表示真实单独峰。具体实施方式实施例一仪器HP6890气相色谱仪，氢火焰离子化检测器，6890气相色谱工作站；色谱柱非极性的HP-5 (5%苯基甲基聚硅氧烷)柱，30mX0. 32_Χ2. 5μπι;条件检测器的温度为250C，进样口温度为250C，柱温80C ；载气使用高纯氮气(纯度不低于99. 999%)，恒流操作模式，即载气在柱出口处， 质量流量保持恒定，为Iml / min ；进样方式分流进样，分流比为50 :1，每次的进样量为0. 2ul,样品甲基叔丁醚、苯甲醇、丁酸和庚酸。为验证本专利技术的方法，将以上四种样品的色谱图人为地通过横坐标(即保留时间)平移的方式以不同的重叠程度叠加在一起，构成不同分离度的四重峰色谱图。分离度用Rs表示，它的大小反映了峰形重叠程度。表1为应用本专利技术的方法对不用分离度Rs条件下的四重峰的定量结果。以下以Rs = 0. 45为例说明具体实施过程。第一步，确定待剥离的四重峰色谱图，如图2所示。第二步，第一次拟合出四个单独峰。确定四重峰的四个顶点A、B、C和D，相应的坐标分别为(516，0. 002557)、(595,0. 002821), (738，0. 005068)和(822，0. 006703)；确定四重峰的前沿曲线EA，后沿曲线DF。计算四个单独峰的前沿修正系数a2, a3和 ，B1 = 0. 002557/0. 002557 = 1. 0000，a2 = 0. 002821/0. 002557 = 1. 1036，a3 = 0. 005068/0. 002本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：范国樑，张兴华，李登科，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：