用于纯化L-α-甘油磷酰胆碱的工艺制造技术

描述用于纯化L‑α‑甘油磷酰胆碱的工艺，其中使L‑α‑甘油磷酰胆碱从DMSO中或从DMSO与至少另一种溶剂的混合物中结晶，该至少另一种溶剂优选地选自水、醇、卤化的溶剂、醚、酯和/或酰胺。此类工艺允许获得具有大于99.5％，优选地大于99.7％，甚至更优选地大于或等于99.9％的纯度的L‑α‑甘油磷酰胆碱。还描述用于确定L‑α‑甘油磷酰胆碱的纯度的方法，所述方法包括使L‑α‑甘油磷酰胆碱通过具有氨基固定相的HPLC柱洗脱，以及随后借助于蒸发光散射检测器类型检测L‑α‑甘油磷酰胆碱自身和其任何杂质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】描述本专利技术的目的是用于纯化L-α-甘油磷酰胆碱的工艺，其中使L-α-甘油磷酰胆碱从DMSO中或从DMSO与至少另一种溶剂的混合物中结晶，该至少另一种溶剂优选地选自水、醇、卤化的溶剂、醚、酯和/或酰胺。此类工艺允许获得也构成本专利技术的目的的具有大于99.5％、优选地大于99.7％、甚至更优选地大于或等于99.9％的纯度的L-α-甘油磷酰胆碱；特别地，此类工艺允许获得被小于0.1％的其β-GPC异构体和/或被小于0.1％的环状物质cGP污染的GPC。本专利技术的另外的目的由用于确定L-α-甘油磷酰胆碱的纯度的方法来代表，所述方法包括使L-α-甘油磷酰胆碱通过具有氨基固定相的HPLC柱洗脱，以及随后借助于蒸发光散射检测器类型(EvaporativeLightScatteringDetectortype)检测L-α-甘油磷酰胆碱自身和其任何杂质。当前的经济和人口趋势已经导致人群的一般老龄化，并且此现象在全球的最富裕地区中特别地明显。个体能力随着老龄化的下降因此已经变成非常重要的问题，并且存在确定帮助减缓此下降的方法的渐增的需求。特别地，精神能力的弱化是老龄化的最负面结果中的一个，并且许多研究努力致力于寻找斗争精神能力的弱化的有效的疗法。在该领域中，最感兴趣的产品中的一种是L-α-甘油磷酰胆碱(GPC)，其结构在下文被示出。GPC在认知紊乱(cognitivedisorder)领域中作为治疗剂具有明确的用途，并且基于医学实践中和大量临床试验中的效力的广泛确证，GPC的全世界的消耗是明确的。制备GPC的方法可以分成两种主要类型：基于天然来源的磷脂酰胆碱的脱乙酰化反应的类型，以及其中GPC从化学中间体的市场中可商购的原材料合成的类型。第一类型的方法具有使用例如已经在食品工业中广泛使用的大豆卵磷脂作为原材料产品的优点，并且其特征在于，第一类型方法的操作不产生任何特别的安全风险。基于GPC合成方法的程序可以反而引起对管理所使用的物质并且特别地管理手性合成前体的关注。这些手性合成前体主要是R-缩水甘油以及R-氯丙二醇(分别地下文概述的结构I和结构II)并且在两种情况下，这些手性合成前体是具有相当大的毒性特性的烷基化分子。因此，清楚的是，手性合成前体的使用可以如何在该使用和操作期间产生危险的问题，以及在残余痕量的情况下或如果其他物质存在(例如中间体或副产物)从而保持其毒性特性时，甚至如何产生消耗从这些手性合成前体获得的GPC时的危险。无论GPC制备方法是什么，与其纯化和分离有关的部分将对产物的质量具有很大影响，特别是其化学纯度可能影响其毒性和治疗概况。这样的纯度传统上通过“薄层色谱法”(TLC)来证实。此类型的分析具有良好的通用特性并且由于从最大极性至最小极性的所有组分是同时可见的而允许总体评估样品。然而，关于任何杂质的定量确定以及具有类似结构特征的物质例如比如具有相当的极性的异构体的分离，此分析技术不是完全令人满意的。HPLC是为了克服这些TLC缺点而最频繁地采用的分析技术；然而在GPC的情况下，由于分析物的高极性特性(这限制与固定性的相互作用)以及不存在发色团，HPLC的使用造成没有往常容易，这使得使用UV检测器即在质量控制实验室中更普遍的检测器成为可能。公布的方法对于灵敏度以及对于具有放大的或不对称的峰的色谱信号的形状是不令人满意的；在这些条件中，存在分离功率的降低，并且存在具有对应于隐藏在其他色谱信号下的某些物质的信号的风险，从而导致突出任何存在的杂质的能力的损失。见例如：J.Am.OilChem.Soc(2012)89:1155-1163；Talanta(2012)94:22-29；JournalofChromatographyA(2012)1220:108-114，通过引用并入本文。这种情况与药物领域中当前的指南差地相关，该指南提供在产生意图用于人类用途的活性成分时的杂质概况的详述。因此，用于确定不同的GPC制备的质量的新的分析技术的开发是最重要的，并且如果在GPC制备中杂质的存在用此类分析技术来突出，那么关于GPC的纯度的新标准的定义，以及新的纯化程序如此以致能够根据当前的质量标准生产GPC。附图说明图1通过程序1获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图图2从实施例2获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图图3从实施例1(比较)获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图图4通过程序2获得的GPC的31P-NMR光谱图5从实施例3获得的GPC的31P-NMR光谱图6通过程序1获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图图7从实施例3获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图图8通过程序3获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图图9从实施例4获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图图10从实施例5(比较)获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图图11通过程序4获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图图12从实施例6获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图图13从实施例7(比较)获得的GPC的HPLC-ELSD色谱图专利技术描述我们已经出乎意料地发现，在GPC的HPLC分析中，通过合适地使用氨基HPLC色谱柱类型，即其中氨基官能性结合至固定相的表面的色谱柱类型克服上文描述的问题是可能的。此类型的若干柱是可商购的：例如SupelcosilTMLC-NH2、HypersilGoldTM氨基、NH2、YMCTM多胺II、NH2、NH2。固定相可以由具有涂层的支撑材料的颗粒例如比如二氧化硅的颗粒组成，该涂层由包含氨基、优选地仲氨基和叔氨基的聚合物涂层组成。此类型的固定相的描述在YMCEuropeGmbH的出版物“HPLCColumnsYMCClassics”的第22页和第23页上被报告，其通过引用并入本文。同时，将必须使用蒸发光散射检测器(ELSD)类型。此类检测器例如在通过引用并入本文的Anal.Chem(1997)69:561A-563A和US6229605中被描述。这些检测器是其中将洗脱剂送到蒸发室中的工具，在蒸发室中，溶剂被蒸发以留下使光束散射的微小样品颗粒的薄雾。检测器响应与取决于存在的样品的量的扩散成比例；此系统使得检测没有发色团的物质例如GPC、以及同时不使用等度洗脱法成为可能。在固定相和检测器的此组合下，可以使用各种洗脱剂，并且特别地合适地由含水缓冲剂体系例如比如乙酸铵缓冲剂组成的体系可能与有机溶剂例如比如甲醇和/或乙腈组合。此类洗脱剂体系可以以等度模式使用，即通过保持相同的洗脱剂持续色谱运行的全部持续时间；或以梯度模式使用，其中洗脱剂的组成在色谱法期间根据预先确定的程序变化。分析方法的优化将遵循本领域的教导进行。因此，本专利技术的目的是用于确定L-α-甘油磷酰胆碱的纯度的方法，所述方法包括使L-α-甘油磷酰胆碱通过具有氨基固定相的HPLC柱洗脱，以及随后借助于蒸发光散射检测器类型检测L-α-甘油磷酰胆碱自身和其任何杂质。一种或多种洗脱剂相可以由水溶液、极性有机溶剂、或其混合物组成；水溶液优选地具有范围在3和6之间、甚至更优选地4和5之间的pH。极性有机溶剂可以是C1-C4醇、乙腈、或其混合物；C1-C4醇优选地是甲醇。此组合允许克服对应于GPC的色谱峰的扩大的缺点，并且同时允许在高灵敏度下进行确定GPC浓度。同时，发现在GP本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于纯化L‑α‑甘油磷酰胆碱的工艺，其特征在于，使L‑α‑甘油磷酰胆碱从DMSO或DMSO与至少另一种溶剂的混合物中结晶。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.06.10 IT MI2014A0010531.一种用于纯化L-α-甘油磷酰胆碱的工艺，其特征在于，使L-α-甘油磷酰胆碱从DMSO或DMSO与至少另一种溶剂的混合物中结晶。2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述至少另一种溶剂选自水、醇、卤化的溶剂、醚、酯和/或酰胺。3.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述醇是甲醇、乙醇、异丙醇和/或正丁醇；所述卤化的溶剂是二氯甲烷；所述醚是四氢呋喃；所述酯是乙酸乙酯；所述酰胺是DMF。4.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，DMSO以被包含在每重量份L-α-甘油磷酰胆碱2体积份和100体积份之间、优选地5体积份和15体积份之间的量被使用。5.根据权利要求4所述的工艺，其特征在于，所述至少另一种溶剂以被包含在每体积DMSO0.01体积和10体积之间、优选地0.1体积和1体积之间的量被使用。6.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述结晶在范围在0℃和100℃之间、优选地在15℃和50℃之间的温度下进行。7.L-α-甘油磷酰胆碱，...

【专利技术属性】
技术研发人员：洛伦佐·德费拉，莫罗·阿尼巴尔迪，毛里齐奥·泽诺尼，法布里奇奥·科基，
申请(专利权)人：凯米股份公司，
类型：发明
国别省市：意大利;IT