一种穿心莲类制剂中穿心莲内酯含量的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种穿心莲类制剂中穿心莲内酯含量的检测方法，包括以下步骤：(1)取穿心莲内酯对照品，溶剂溶解，作为对照品溶液；(2)取供试品，溶剂溶解，作为供试品溶液；(3)分别对供试品溶液和对照品溶液进行差分脉冲伏安法电化学检测；所述电化学检测中：支持电解质为磷酸盐缓冲溶液；工作电极为纳米氧化铜/Nafion修饰金电极；参比电极为饱和甘汞电极；辅助电极为铂丝电极为辅助电极；(4)绘制标准曲线，计算穿心莲类制剂中的穿心莲内酯含量。本发明专利技术方法简单、快速、经济，可用于穿心莲内酯的现场快速检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药品的检测，具体涉及穿心莲类制剂中穿心莲内酯含量的检测方法。
技术介绍
穿心莲内酯是爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees的主要有效成分，结构如下所示:现代药理研究表明，穿心莲内酯及其衍生物具有抗病原微生物，解热，抗炎，抗生育，抗心血管疾病、免疫刺激，利胆保肝，抗肿瘤等作用[1]，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效[2]，被誉为天然抗生素药物。临床上用于脑膜炎、菌痢、肺炎、钩端螺旋体病、增强肾上腺皮质功能、上呼吸道感染等[3]。目前，中国药典公布的检测穿心莲内酯的方法为高效液相色谱法[4]，亦有文献报道穿心莲内酯的其他检测方法。例如邹洪等用单示波极谱法[5]在0.2mol/L NH4Cl+0.25mol/L NH3·H2O中检测穿心莲内酯；李琦等用胶束电动毛细管色谱法[6]分离测定了穿心莲内酯；还有高效液相色谱法[7-11]和薄层扫描法[12]等检测方法。然而，上述方法或实验条件苛刻，或操作步骤较繁琐，或所需仪器较昂贵且耗时，不适合于大规模推广应用，也不适合于现成的快速检测。因此，目前需要建立一种简单、灵敏、快速检测穿心莲内酯的分析方法。[1]李曙光，叶再元.穿心莲内酯的药理活性作用.中华中医药学刊，2008,26(5):984-986[2]董广涛，焦润生，高丽萍，赵敏，王秀杰.穿心莲内酯对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的保护作用及机制的实验研究.中国急救医学，2013,33(8):735-738[3]刘优靖.穿心莲内酯对病毒性下呼吸道感染患儿临床及细胞因子影响的研究.大连医科大学，2014：[4]国家药典委员会.中国药典:1部.北京:中国医药科技出版社，2015:268[5]邹洪，袁倬斌.穿心莲内酯的电化学研究.分析试剂室，1997,16(4):1-4[6]李琦，胡广林，徐晓琴，庄峙厦，王小如.胶束电动毛细管色谱法测定穿心莲中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯.分析化学，2003,31(4):451-454[7]孟宪波.HPLC测定莲栀清火胶囊中栀子苷、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量.中国实验方剂学杂志,2013,19(14):155-157[8]汪剑飞，吴静，胡杰，叶文才，范春林.双波长HPLC法同时测定穿心莲浸膏中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量.安徽医药，2014,18(7):1237-1240[9]黄秀展，潘民儒，朱正英，李荣德.HPLC法测定复方穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量.用药指导，2012,14(7):28-29[10]韩光，许笑笑，刘蕾，许启泰.HPLC-ELSD测定穿心莲超分子提取物中三种穿心莲内酯的含量.中国现代应用药学杂志，2008,25(4):345-347[11牛其云，李传河，秦增贵，王建.高效液相色谱法测定穿心莲片中穿心莲内酯的含量.中国药事，2005,19(9):550-551[12]顾利红，朱品业.薄层扫描法测定穿心莲中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量.中草药，2000,31(4):260-262
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种穿心莲类制剂中穿心莲内酯含量的检测方法，包括以下步骤：(1)取穿心莲内酯对照品，溶剂溶解，作为对照品溶液；(2)取供试品，溶剂溶解，作为供试品溶液；(3)分别对供试品溶液和对照品溶液进行差分脉冲伏安法电化学检测；所述电化学检测中：支持电解质为磷酸盐缓冲溶液；工作电极为纳米氧化铜/Nafion修饰金电极；参比电极为饱和甘汞电极；辅助电极为铂丝电极；(4)绘制标准曲线，计算穿心莲类制剂中的穿心莲内酯含量。进一步地，所述磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.1M。进一步地，所述0.1M磷酸盐缓冲溶液的pH＝4.5。进一步地，其特征在于：所述差分脉冲伏安法的参数如下：增量0.004V，振幅0.05V，脉冲宽度0.04s，脉冲周期0.2s，静置时间2s。进一步地，所述纳米氧化铜/Nafion修饰金电极是通过下述方法制备得到的：取氧化铜纳米粉末溶解于Nafion和乙醇中，超声分散，得到悬浮液，取修饰剂滴涂于预处理好的金电极表面，干燥即得纳米氧化铜/Nafion修饰金电极；所述氧化铜纳米粉末与Nafion的质量体积比为1mg：20μL，与乙醇的质量体积比1mg：1mL。进一步地，所述氧化铜纳米粉末的宽度为6-8nm，长度为40-60nm。进一步地，所述氧化铜纳米粉末是通过下述方法制备得到的：将Cu(CH3COO)2、冰乙酸溶解在无水乙醇中，加热到78℃，加入NaOH，反应1h，制得的CuO纳米颗粒悬液，分离洗涤即得；其中，Cu(CH3COO)2与冰乙酸的摩尔比为1:2，与无水乙醇的摩尔体积比为1mmol：50mL，与NaOH的摩尔比为1:4。进一步地，步骤(1)和步骤(2)中，所述溶剂为乙腈。进一步地，所述制剂是胶囊剂。本专利技术还提供了一种纳米氧化铜/Nafion修饰金电极，它是前述方法制备得到的。专利技术人在研究中发现，纳米氧化铜/Nafion修饰金电极对穿心莲内酯具有很好的富集作用，构建了基于纳米氧化铜/Nafion修饰电极的穿心莲内酯电化学传感器。同时，利用差分脉冲伏安法对穿心莲内酯进行测定，通过各个条件的筛选，并将所建立的方法用于中药穿心莲中穿心莲内酯含量的测定。本专利技术方法简单、快速、经济，可用于穿心莲内酯的现场快速检测。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1为氧化铜纳米颗粒的透射电镜图。图2为裸金电极与纳米氧化铜/Nafion修饰电极测定标准品对比图：(a)裸金电极，(b)纳米氧化铜/Nafion修饰金电极。图3为不同pH 0.1M磷酸盐缓冲液对穿心莲内酯峰电流值的影响。图4为在本专利技术最佳测定条件下，穿心莲内酯的DPV图谱。具体实施方式实施例1本专利技术的检测方法1仪器与试剂CHI660C型电化学工作站，上海辰华仪器有限公司；舒美KQ116超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；雷磁PHS-3C型精密酸度计，上海仪电科学仪器股份有限公司；三电极体系：纳米氧化铜/Nafion修饰电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极。穿心莲内酯，中国药品生物制品检定所；Nafion溶液，SIGMA公司；无水乙醇，上海子钦有限公司；乙腈、甲醇，默克；不同pH值不同浓度的磷酸盐缓冲液；实验中所用水均为二次蒸馏水；穿心莲内酯软胶囊，珠海金鸿药业股份有限公司(批号：150809)。2氧化铜纳米颗粒的制备CuO的合成方法参考文献Kida T,Oka T,Nagano M.Journal of the American Ceramic Society,2007,90(1):107–110。首先1mmol的Cu(CH3COO)2、2mmol的冰乙酸依次溶解在50mL的无水乙醇中，混匀并水浴加热到78℃。磁力搅拌下，4mmol的NaOH粉末添加到该混合溶液中，反应1h。制得本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种穿心莲类制剂中穿心莲内酯含量的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)取穿心莲内酯对照品，溶剂溶解，作为对照品溶液；(2)取供试品，溶剂溶解，作为供试品溶液；(3)分别对供试品溶液和对照品溶液进行差分脉冲伏安法电化学检测；所述电化学检测中：支持电解质为磷酸盐缓冲溶液；工作电极为纳米氧化铜/Nafion修饰金电极；参比电极为饱和甘汞电极；辅助电极为铂丝电极；(4)根据检查结果，绘制穿心莲内酯的工作曲线，计算穿心莲类制剂中的穿心莲内酯含量。

【技术特征摘要】
1.一种穿心莲类制剂中穿心莲内酯含量的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)取穿心莲内酯对照品，溶剂溶解，作为对照品溶液；(2)取供试品，溶剂溶解，作为供试品溶液；(3)分别对供试品溶液和对照品溶液进行差分脉冲伏安法电化学检测；所述电化学检测中：支持电解质为磷酸盐缓冲溶液；工作电极为纳米氧化铜/Nafion修饰金电极；参比电极为饱和甘汞电极；辅助电极为铂丝电极；(4)根据检查结果，绘制穿心莲内酯的工作曲线，计算穿心莲类制剂中的穿心莲内酯含量。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.1M。3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述0.1M磷酸盐缓冲溶液的pH＝4.5。4.根据权利要求1-3任一项所述的检测方法，其特征在于：所述差分脉冲伏安法的参数如下：增量0.004V，振幅0.05V，脉冲宽度0.04s，脉冲周期0.2s，静置时间2s。5.根据权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征在于：所述纳米氧化铜/Nafion修饰金电极是通过下述方法制备得到的：取氧化铜纳米粉末溶解于Na...

【专利技术属性】
技术研发人员：余丽双，孙照霞，苏慧，褚克丹，徐伟，
申请(专利权)人：福建中医药大学，
类型：发明
国别省市：福建;35