一种莲必治注射液的质量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种莲必治注射液的质量测定方法。所述莲必治注射液的质量测定方法具体包括以下步骤：1)配制供试品溶液；2)配制对照品溶液；3)取步骤2)制得的所述对照品溶液注入液相色谱仪中，记录对照品溶液色谱图，调节检测灵敏度；4)取步骤1)制得的所述供试品溶液，注入所述液相色谱仪，记录供试品溶液色谱图；5)比对所述对照品溶液色谱图和供试品溶液色谱图，判断所述待测莲必治注射液的质量。本发明专利技术的莲必治注射液的质量测定方法操作简单，重现性好，峰纯度高，准确度高，各峰分离度良好，峰形良好，能准确检测出穿心莲内酯杂质，为亚硫酸氢钠穿心莲内酯后续的一些研究工作开展创造有利条件。

A method for the determination of the quality of Lianbizhi Injection

The invention discloses a quality of Lianbizhi injection method. The method comprises the following steps of determination of the mass of the Lianbizhi injection: 1) preparation of the test solution; 2) preparation of the reference solution; 3) from step 2) prepared by the reference solution injected into the liquid chromatograph, record referencesolution chromatograms, adjust the detection sensitivity; 4) take steps 1) prepared by the testsolution, injected into the liquid chromatograph, record the chromatogram obtained from the test solution; 5) than the control solution chromatogram and the testsolution chromatogram, judge the quality of the tested Lianbizhi injection. The quality of Lianbizhi injection method for the determination of the invention has the advantages of simple operation, good reproducibility, high purity, high accuracy, the peak separation is good, good shape, can accurately detect andrographolide impurities, to create favorable conditions for some Sodium Bisulfite andrographolide follow-up study development.

【技术实现步骤摘要】
一种莲必治注射液的质量测定方法
本专利技术涉及药物检测
，具体涉及一种莲必治注射液的质量测定方法。
技术介绍
莲必治注射液的主要有效成分为亚硫酸氢钠穿心莲内酯，其为一种抗菌消炎药物，已有产品上市销售。中国新药杂志2005年14卷7期中报道了一种用HPLC检测亚硫酸氢钠穿心莲内酯有关物质的方法，若采用该方法检测并使用DAD检测器进行全波长扫描，可发现其主峰的峰纯度不高，显示有杂质峰包含在主峰内，因此，采用文献已报道的有关物质测定方法检测，结果不准确。同时，文献报道的方法检测时间较长。所述的有关物质即亚硫酸氢钠穿心莲内酯制备过程中残留在成品中的类似物，异构体，中间体等杂质成分，一般难以分离除去，也难以通过常规方法检测到，为控制产品质量，提高产品纯度，检测有关物质的含量和分离去除有关物质是必要的，因此本专利技术在于寻找一种快速，准确，适合工业化的检测方法。目前的执行的测定方法中没有订入已知杂质穿心莲内酯，且分析方法无法检出穿心莲内酯，杂质峰形较差，且分离度不好，主峰里包含杂质未分离出来。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术经过筛选，找到一种灵敏度高、杂质和主成分亚硫酸氢钠穿心莲内酯的分离度高的高效液相色谱检测法。为实现上述目的，本专利技术提供一种莲必治注射液的质量测定方法，具体地，该方法包括以下步骤：1)配制供试品溶液：精密量取待测莲必治注射液，加流动相A制成亚硫酸氢钠穿心莲内酯的浓度为1±0.1mg/ml的溶液；2)配制对照品溶液：精密量取步骤1)制得的所述供试品溶液，加流动相A制成亚硫酸氢钠穿心莲内酯的浓度为0.01±0.001mg/ml的溶液；3)取步骤2)制得的所述对照品溶液注入液相色谱仪中，以0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液-甲醇为流动相A，所述流动相A中，0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液与甲醇的体积比为68±2:32±2，以乙腈为流动相B，梯度洗脱，记录对照品溶液色谱图，调节检测灵敏度；4)取步骤1)制得的所述供试品溶液，注入所述液相色谱仪，按照与步骤3)相同的条件进行梯度洗脱，记录供试品溶液色谱图；5)比对所述对照品溶液色谱图和供试品溶液色谱图，判断所述待测莲必治注射液的质量。其中，所述莲必治注射液的规格为常规市售产品中常见的规格，例如5ml:0.25g。优选地，所述流动相A中，0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液与甲醇的体积比为68±1:32±1，更优选为68:32。该流动相能够很好的洗脱杂质，使主峰中杂质峰得到有效分离。优选地，以体积百分比计，所述梯度洗脱条件为：0-5min，所述流动相A100％，所述流动相B0％；5-15min，所述流动相A减少到75％，所述流动相B增加到25％；15-20min，所述流动相A75％，所述流动相B25％；20-25min，所述流动相A增加到100％，所述流动相B减少到0％；25-30min，所述流动相A100％，所述流动相B0％。更优选地，以体积百分比计，所述梯度条件为：该梯度洗脱方式能够使杂质峰分离效果及峰形良好，能够准确检测出穿心莲内酯杂质峰。优选地，色谱条件为：色谱柱为：C18柱，4.6mm×150mm，5μm；流速：1.0±0.1ml/min；检测波长：220nm；柱温：30℃±5℃(优选为30℃)；所述对照品溶液以及所述供试品溶液的注入量为10μl。该色谱条件下能够在相对较短时间内准确对供试液进行测试。优选地，步骤3)中，所述调节检测灵敏度为使主成分的峰高约为记录仪满量程的20％-25％。该灵敏度下，各杂质峰出峰形态好，能够清晰分辨各杂质情况。优选地，步骤5)中比对所述对照品溶液色谱图和供试品溶液色谱图之前，先判断所述供试品溶液色谱图中是否有穿心莲内酯杂质峰。本专利技术所述的莲必治注射液的质量测定方法依据所得的供试品溶液色谱图中是否含有穿心莲内酯杂质峰，具体分为两种情况进行判断：第一种情况，当所述供试品溶液色谱图中存在穿心莲内酯杂质峰时，判断所述待测莲必治注射液的质量的方法如下：当所述穿心莲内酯杂质峰的峰面积与校正因子0.43的乘积大于对照溶液色谱图中主峰面积0.2倍；则判断所述待测莲必治注射液的质量为不合格；当所述穿心莲内酯杂质峰的峰面积与校正因子的乘积小于或等于对照溶液色谱图中主峰面积0.2倍时，执行如下补充判断条件：当所述供试品溶液色谱图中除穿心莲内酯杂质外，任意其他杂质峰面积不大于所述对照溶液色谱图主峰面积，且所述供试品溶液色谱图中各杂质峰面积的总和不大于对照溶液色谱图主峰面积的1.5倍时，判断所述待测莲必治注射液的质量为合格；反之，即为不合格；其中，计算作为杂质的穿心莲内酯的峰面积时需乘以校正因子0.43。第二种情况，当所述供试品溶液色谱图中不存在穿心莲内酯杂质峰时，判断所述待测莲必治注射液的质量的方法如下：当所述供试品溶液色谱图中任意杂质峰面积不大于所述对照溶液色谱图主峰面积，且所述供试品溶液色谱图中各杂质峰面积的总和不大于对照溶液色谱图主峰面积的1.5倍时，判断所述待测莲必治注射液的质量为合格；反之，即为不合格。优选地，所述穿心莲内酯杂质峰的相对保留时间为主峰的1.58±0.2倍。优选地，所述莲必治注射液的质量测定方法对于穿心莲内酯杂质检测限为0.12537ng。与现有技术相比，本专利技术的莲必治注射液的质量测定方法操作简单，重现性好，峰纯度高，准确度高，杂质分离度及峰形良好，能准确检测出穿心莲内酯杂质，为亚硫酸氢钠穿心莲内酯后续的一些研究工作开展创造有利条件。附图说明图1为实验例1所述的现有执行的莲必治注射液的质量测定方法测得的供试液的色谱图。图2为实验例2所述的现有执行的莲必治注射液的质量测定方法测得的添加有穿心莲内酯的供试液的色谱图。图3为本专利技术实验例3所述的莲必治注射液的质量测定方法得到的供试液的色谱图。图4为本专利技术实验例4所述的莲必治注射液的质量测定方法得到的供试液的色谱图。图5为实验例7中所测得的酸破坏的莲必治注射液的色谱图。图6为实验例7中所测得的碱破坏的莲必治注射液的色谱图。图7为实验例7中所测得的氧化破坏的莲必治注射液的色谱图。图8为实验例7中所测得的光破坏的莲必治注射液的色谱图。图9为实验例7中所测得的高温破坏的莲必治注射液的色谱图。图10为实施例1中所测得的对照品溶液色谱图。图11为实施例1中所测得的供试品溶液色谱图。图12为实施例2中所测得的对照品溶液色谱图。图13为实施例2中所测得的供试品溶液色谱图。图14为实施例3中所测得的对照品溶液色谱图。图15为实施例3中所测得的供试品溶液色谱图。图16为实施例4中所测得的对照品溶液色谱图。图17为实施例4中所测得的供试品溶液色谱图。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。以下实施例使用的原料及装置均为常规市售产品，例如：实验仪器与试剂：色谱仪：Agilent1260高效液相色谱仪；综合药品稳定性试验箱：SHH-SSGD；水浴锅：DK-S22型电热恒温水浴锅；天平：梅特勒MS204S分析天平、METTLERTOLEDOXS105DU分析天平；亚硫酸氢钠穿心莲内酯：中国食品药品检定研究院111655-201503含量：100％；穿心莲内酯：中国食品药品检定研究院110797-201108含量：98.7％；莲必治注射液：江苏九旭药业有限公司；规格本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种莲必治注射液的质量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：1)配制供试品溶液：精密量取待测莲必治注射液，加流动相A制成亚硫酸氢钠穿心莲内酯的浓度为1±0.1mg/ml的溶液；2)配制对照品溶液：精密量取步骤1)制得的所述供试品溶液，加流动相A制成亚硫酸氢钠穿心莲内酯的浓度为0.01±0.001mg/ml的溶液；3)取步骤2)制得的所述对照品溶液注入液相色谱仪中，以0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液‑甲醇为流动相A，所述流动相A中，0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液与甲醇的体积比为68±2:32±2，以乙腈为流动相B，梯度洗脱，记录对照品溶液色谱图，调节检测灵敏度；4)取步骤1)制得的所述供试品溶液，注入所述液相色谱仪，按照与步骤3)相同的条件进行梯度洗脱，记录供试品溶液色谱图；5)比对所述对照品溶液色谱图和供试品溶液色谱图，判断所述待测莲必治注射液的质量。

【技术特征摘要】
1.一种莲必治注射液的质量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：1)配制供试品溶液：精密量取待测莲必治注射液，加流动相A制成亚硫酸氢钠穿心莲内酯的浓度为1±0.1mg/ml的溶液；2)配制对照品溶液：精密量取步骤1)制得的所述供试品溶液，加流动相A制成亚硫酸氢钠穿心莲内酯的浓度为0.01±0.001mg/ml的溶液；3)取步骤2)制得的所述对照品溶液注入液相色谱仪中，以0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液-甲醇为流动相A，所述流动相A中，0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液与甲醇的体积比为68±2:32±2，以乙腈为流动相B，梯度洗脱，记录对照品溶液色谱图，调节检测灵敏度；4)取步骤1)制得的所述供试品溶液，注入所述液相色谱仪，按照与步骤3)相同的条件进行梯度洗脱，记录供试品溶液色谱图；5)比对所述对照品溶液色谱图和供试品溶液色谱图，判断所述待测莲必治注射液的质量。2.根据权利要求1所述的质量测定方法，其特征在于，以体积百分比计，所述梯度洗脱条件为：0-5min，所述流动相A100％，所述流动相B0％；5-15min，所述流动相A减少到75％，所述流动相B增加到25％；15-20min，所述流动相A75％，所述流动相B25％；20-25min，所述流动相A增加到100％，所述流动相B减少到0％；25-30min，所述流动相A100％，所述流动相B0％。3.根据权利要求2所述的质量测定方法，其特征在于，以体积百分比计，所述梯度洗脱条件为：4.根据权利要求1-3中任一项所述的质量测定方法，其特征在于，色谱条件为：色谱柱为：C18柱，4.6mm×150mm，5μm；流速：1.0±0.1ml/min；检测波长：220nm；柱温：30℃±5℃。5.根据权利要求1-4中任一项所述的质量测定方法，其特征在于，步骤3...

【专利技术属性】
技术研发人员：李宏，钟己未，毛黎静，张威，吴杰，
申请(专利权)人：李宏，江苏九旭药业有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32