The invention discloses a method for detection of donkey hide glue source of traditional Chinese medicine and its compound preparation in component composition, reagent kit and detection method of the composition by the peptide I and peptide II and peptide III and control test matrix. The amino acid sequence of I polypeptides SEQ ID NO.1 shows, the amino acid sequence of polypeptide II SEQ ID NO.2 shows, the amino acid sequence of polypeptide III SEQ ID NO.3 shows, control test matrix for fish glue. The detection value of the polypeptide II is subtracted from the detection value of the polypeptide I, and the detection deviation is corrected by the detection value of the polypeptide III, so as to realize the content detection of the donkey skin ingredient in the gum type Chinese medicine and the compound preparation thereof. The method has the advantages of accurate content detection and simple operation, and has a wide application prospect in the field of product quality monitoring of traditional Chinese medicine and its compound preparation.
【技术实现步骤摘要】
一种用于检测胶类中药及其复方制剂中驴皮源成分含量的组合物、试剂盒及其检测方法
本专利技术涉及一种用于检测胶类中药及其复方制剂中驴皮源成分含量的组合物、试剂盒及其检测方法。本专利技术属于医药检测
技术介绍
阿胶作为一种传统名贵中药,已有数千年的食用历史,具有补血滋阴,润燥,止血的功效。纯正的阿胶必需来自百分百的驴皮,方能保证产品的功效。从原料生物分类学上看,驴属于奇蹄目马科驴属,包括非洲野驴、藏野驴、中亚野驴、家驴等品种。其中中国饲养的家驴包括关中驴、德州驴、广灵驴、佳米驴、泌阳驴、淮阳驴、庆阳驴、华北驴、新疆驴、西南驴等众多地方品种。由于驴皮的供应也逐年紧张,价格不断上涨,市场上出现了很多不法分子,在生产阿胶时,部分甚至全部用各种其他动物皮包括马皮、骡皮、牛皮、猪皮等来取代驴皮进行熬制,有的甚至直接掺入工业明胶。这些伪品的存在严重干扰了市场正常秩序,损害消费者利益,影响正规产品的信誉。阿胶经长时间高温蒸煮浓缩而成,主要成分非常相近且不同厂家的生产工艺存有差异,采用红外、近红外、X-衍射、HPLC等方法对阿胶进行真伪鉴别常存在判断不准确、缺乏足够说服力等。目前已报道的鉴别阿胶真伪比较权威的方法主要是DNA分子鉴定方法和检测特征性肽段的液质联用方法。已报道的这两种方法都无法对阿胶中驴皮源成分进行比较准确的定量检测,而是通过检测阿胶中是否含有驴的成分,并排除其他动物源成分来判断阿胶真伪;但阿胶的掺假可能会五花八门,因此需要排除的动物源成分会是多种多样,利用排除法来鉴别阿胶真伪存在重要缺陷,其准确性和可靠性会大打折扣,这种情况非常不利于对市场阿胶产品的监 ...
【技术保护点】
一种用于检测胶类中药及其复方制剂中驴皮源成分含量的组合物,所述组合物由多肽I、多肽II、多肽III以及对照品检测基质组成,其特征在于:所述多肽I的氨基酸序列为Gly‑Ala‑Thr‑Gly‑Pro‑Ala‑Gly‑Val‑Arg,多肽II的氨基酸序列为Gly‑Glu‑Pro‑Gly‑Pro‑Ala‑Gly‑Leu‑Pro‑Gly‑Pro‑Hyp‑Gly‑Glu‑Arg,多肽III的氨基酸序列为Gly‑Val‑Val‑Gly‑Pro‑Gln‑Gly‑Ala‑Arg,对照品检测基质为鱼皮胶。
【技术特征摘要】
1.一种用于检测胶类中药及其复方制剂中驴皮源成分含量的组合物,所述组合物由多肽I、多肽II、多肽III以及对照品检测基质组成,其特征在于:所述多肽I的氨基酸序列为Gly-Ala-Thr-Gly-Pro-Ala-Gly-Val-Arg,多肽II的氨基酸序列为Gly-Glu-Pro-Gly-Pro-Ala-Gly-Leu-Pro-Gly-Pro-Hyp-Gly-Glu-Arg,多肽III的氨基酸序列为Gly-Val-Val-Gly-Pro-Gln-Gly-Ala-Arg,对照品检测基质为鱼皮胶。2.一种含有权利要求1所述组合物的检测试剂盒。3.一种用于检测胶类中药及其复方制剂中驴皮源成分含量的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)对照品溶液的制备1)基质溶液的制备:将称量好的对照品检测基质置于量瓶中,加入NH4HCO3溶液,超声使样品完全溶解,加NH4HCO3溶液稀释至刻度;2)对照品母液的制备:将称量好的对照品检测基质置于量瓶中,加入NH4HCO3溶液,超声使样品完全溶解,将称量好的的多肽I、多肽II和多肽III加入该量瓶中,用NH4HCO3溶液溶解并稀释至刻度;3)对照品溶液制备:以步骤1)制得的基质溶液为溶剂,将步骤2)制得的对照品母液稀释,微孔滤膜过滤,续滤液中加胰蛋白酶溶液,酶解;(2)待检测样品溶液的制备取待测样品,重量记为N1,加入三氯乙酸溶液,超声、静置、离心后去除上清液,沉淀用丙酮洗涤、干燥后称重,重量记为N2,称取沉淀于量瓶中,加入NH4HCO3溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,微孔滤膜过滤,续滤液中加入胰蛋白酶溶液,酶解;(3)液质联用仪检测分别取对照品溶液、待检测样...
【专利技术属性】
技术研发人员:郝向慧,郭尚伟,段小波,徐云鹏,王静,王玉娇,石永坚,周祥山,张大伟,
申请(专利权)人:东阿阿胶股份有限公司,
类型:发明
国别省市:山东,37
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