一种基于核酸适配体的痕量农药残留表面增强拉曼光谱检测方法技术

本发明专利技术涉及一种基于核酸适配体的痕量农药残留表面增强拉曼光谱检测方法，属于农药检测领域。本发明专利技术以拉曼活性染料标记的金纳米颗粒作为增强基底，利用农药与适配体的特异性结合，导致活性染料标记的金纳米颗粒在盐溶液中的聚集差异；通过便携式拉曼光谱仪，得到相应活性染料的SERS谱图，实现对痕量农药的定量检测，并在茶叶实际样品中进行方法可行性验证。本发明专利技术提供的检测方法，能将传统拉曼技术中以检测目标物的拉曼特征峰作为定量判断的常规思路转变为以活性染料标记物的拉曼特征峰作为目标物检测的定量标准，不仅提高了检测灵敏度，简化了复杂增强基底制备流程，更为痕量农药残留在食品及工业领域的研究、检测、监管等提供了方便。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种针对农药残留的拉曼光谱检测方法，特指基于核酸适配体的痕量农药残留表面增强拉曼光谱(SERS)检测方法，属于农药检测领域。
技术介绍
农药，以其在农作物增收与病虫害防治方面的突出贡献，使得其在国内外农业生产与耕种中广泛使用。然而，当农药在保障蔬菜增收，粮食丰产的同时，农药残留现象也随之而来。广泛而严重的农药残留问题，带来的不仅是生态环境方面的担忧，更为严重的是残留农药通过被动摄入或者富集的方式从自然界转入体内而引发的食品安全隐患。目前，我国农药检测方法主要是传统的检测方式，包括：气相、液相及其质谱联用等方法，它们可以实现农药的准确残留检测，但需要复杂昂贵的仪器设备及专业操作人员，加之样品前处理繁琐费时、检测费用高，难以满足现场、低成本检测的需要。而基于抗原抗体的免疫分析方法虽然特异性高，却存在假阳性，价格高的缺点。拉曼光谱技术是一项具有高灵敏度，易操作性，低成本检测等多种优点的光谱技术，并广泛应用于医学、生物、环境、考古等多个领域。其中，表面增强拉曼光谱(SERS)技术的发现，更是推动了拉曼光谱技术在单个分子探测、痕量物质检测方面的应用与发展。目前，单一的纳米金/银本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于核酸适配体的痕量农药残留表面增强拉曼光谱检测方法，其特征在于，该方法利用标记物标记的纳米材料作为增强基底，通过农药与适配体的特异性识别结合，影响纳米材料在检测体系中的电荷分布平衡，从而引起标记物标记的纳米材料在不同检测农药浓度下的聚集差异；不同聚集程度的增强基底可对拉曼信号进行不同程度的放大，依据不同拉曼强度的标记物拉曼特征峰图谱，实现对痕量农药进行灵敏间接定量检测的目的。

【技术特征摘要】
1.一种基于核酸适配体的痕量农药残留表面增强拉曼光谱检测方法，其特征在于，该方法利用标记物标记的纳米材料作为增强基底，通过农药与适配体的特异性识别结合，影响纳米材料在检测体系中的电荷分布平衡，从而引起标记物标记的纳米材料在不同检测农药浓度下的聚集差异；不同聚集程度的增强基底可对拉曼信号进行不同程度的放大，依据不同拉曼强度的标记物拉曼特征峰图谱，实现对痕量农药进行灵敏间接定量检测的目的。2.根据权利要求1所述的基于核酸适配体的痕量农药残留表面增强拉曼光谱检测方法，其特征在于，增强基底为拉曼活性染料结晶紫吸附的金纳米颗粒。3.根据权利要求1所述的基于核酸适配体的痕量农药残留表面增强拉曼光谱检测方法，其特征在于，采用圆二色谱表征农药与核酸适配体的特异性识别结合。4.根据权利要求1所述的基于核酸适配体的痕量农药残留表面增强拉曼光谱检测方法，其特征在于，痕量农药为啶虫脒，核酸适配体序列为：5’-TGT AAT TTG TCT GCA GCG GTT CTT GAT CGC TGA CAC CAT ATT ATG AAG A-3’。5.根据权利要求1所述的基于核酸适配体的痕量农药残留表面增强拉曼光谱检测方法，其特征在于，检测方法包括如下具体步骤：1)增强基底的制备：采用柠檬酸三钠加热还原法进行金纳米颗粒的制备。在制备过程中，保持浓度为0.02％(M/V)氯金酸溶液与2.3mL的1％(M/V)的柠檬酸三钠溶液混合以制备粒径大小合适的金纳米颗粒，约为30nm；并将20μL 0.8μM的拉曼活性染料结晶紫溶液和100μL制备所得的金纳米颗粒混合，使得拉曼活性染...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡薇薇，陈全胜，李欢欢，张彬，欧阳琴，赵杰文，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32