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一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用技术

技术编号:13927238 阅读:75 留言:0更新日期:2016-10-28 09:55
本发明专利技术公开了一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用,所述化合物的分子式为C28H26N2O6,结构式如下:所述化合物的衍生物结构式如下:其中,R1为H、OCH3、OH、CH3或CF3;R2为H、OCH3或OH;R3为H、OCH3或OH,R4为H、OCH3、OH、CH3或CF3;所述化合物采用苦豆子植物的果实部位经打粉、乙醇提取、氯仿萃取后烘干得到氯仿部位浸膏;氯仿部位浸膏经硅胶柱反复分离纯化后得到黄色粉末,即为本发明专利技术的目标化合物;本发明专利技术通过对苦豆子植物进行提取、萃取和柱层析,得到一种黄色粉末化合物,该化合物及其衍生物制备方法便捷,采用天然来源制备,用途广泛,能用于制备神经元保护或脑缺血再灌注损伤的药物或功能食品,具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化学领域,具体是一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用
技术介绍
苦豆子(学名Sophora alopecuroides L),异名布亚(维名),是宁夏的重要药用植物资源和自然植被组成部分,野生资源分布面积广,蕴藏量大,种群优势突出;由于其较高的药用价值和生态功能,苦豆子资源的合理保护与开发利用越来越引起人们的重视,宁夏回族自治区已将苦豆子列入重点保护的六大地道药材之一,纳入国家中药现代化科技产业行动计划中,生产基地建设和深层次开发都有长足的发展。苦豆子是重要的药用植物资源和饲用植物资源,早在1914年国外就从苦豆子籽实中提出苦参总碱,世界性研究苦豆子始于20世纪30年代初,前苏联学者用提出的苦参总碱入药后,发现具有清热解毒,抗菌消炎等作用,又分离出槐定碱、槐安碱;此后,波兰、美国学者相继研究报导了苦豆子植物体内的多种化学成份,1930年被正式列入《美国药典》,在世界上广泛引起重视并用于医药界,随后美国抗癌研究中心发现苦参碱中槐果碱在临床上有抗癌效果;国内研究始于1971年,为了开发资源,1975年研制的苦豆子生物碱制剂——苦豆子片治疗腹泻新药,被正式载入1977年版《中国药典》,现改名为克泻灵片;1983年开发出“苦参碱制剂妇炎栓”,用于治疗妇科疾病;1984年国内建成了第一条苦豆子生物碱工业生产线,生产苦豆总碱、苦参素、苦参碱、槐定碱等,开始了苦豆子生物碱系列产品的批量生产;苦豆子的利用价值具有极大的研究和开发空间。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种采用苦豆子分离制备的具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用,以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:一种具有神经元保护作用的化合物,分子式为C28H26N2O6,结构式如下:所述化合物的衍生物结构式如下:其中,R1为H、OCH3、OH、CH3或CF3;R2为H、OCH3或OH;R3为H、OCH3或OH,R4为H、OCH3、OH、CH3或CF3。作为本专利技术进一步的方案:所述具有神经元保护作用的化合物的制备方法,包括以下步骤:1)化合物提取分离:1.1)原料:取苦豆子植物的果实部位,打粉备用;1.2)将步骤1.1制备的苦豆子粉放入提取罐中,加入质量分数为10-95%的乙醇溶剂,提取得到初提浸膏;1.3)将步骤1.2中提取得到的初提浸膏用水溶解,加入氢氧化钠溶液调节pH=1-3.5,再加入与溶解初提浸膏用水等体积的氯仿,置于分液漏斗中,摇晃,静置至分层清晰,氯仿部位在下层,取下层氯仿部位,用旋转蒸发器旋干溶剂得氯仿部位浸膏;回收氯仿,反复萃取,直至氯仿层无颜色;2)生物碱单体的分离、纯化:2.1)选用硅胶柱,将100-400目硅胶用二氯甲烷浸泡,搅拌无气泡,湿法装柱;2.2)将步骤1.3制备氯仿部位浸膏用二氯甲烷-甲醇溶解,加入100-400目的硅胶搅拌并挥干溶剂,并碾磨直到完全均匀,干法上样;2.3)选取洗脱系统为二氯甲烷:甲醇,洗脱梯度为100:1、50:1、30:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1、0:1;流出液用瓶子收集,然后用旋转蒸发仪浓缩,移入小样瓶,并加以编号,直到洗脱后TLC检测无生物碱时停止;根据TLC检测生物碱的分离情况,合并各洗脱溶剂液,得到28个流份;3)化合物单体纯化:3.1)在洗脱剂二氯甲烷:甲醇=50:1条件下,收集9个流分,对其中Fr8进行硅胶柱层析;3.2)在洗脱剂二氯甲烷:甲醇=100:1条件下收集的流分,旋干进行凝胶柱层析,得黄色粉末,得到目标化合物。作为本专利技术再进一步的方案:所述化合物用于制备具有神经元保护或脑缺血再灌注损伤的药物或功能食品。与现有技术相比,本专利技术的有益效果是:本专利技术通过对苦豆子植物进行提取和萃取,得到一种黄色粉末化合物,该化合物制备方法便捷,用途广泛,能用于制备具有神经元保护或脑缺血再灌注作用的药物,或功能饮料,具有广阔的应用前景。附图说明图1为本专利技术化合物对神经元细胞活力影响的研究柱形图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图,对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本专利技术保护的范围。一种具有神经元保护作用的化合物,分子式为C28H26N2O6,其结构式如下:所述化合物的衍生物结构式如下:其中,R1为H、OCH3、OH、CH3或CF3;R2为H、OCH3或OH;R3为H、OCH3或OH,R4为H、OCH3、OH、CH3或CF3。所述化合物的制备方法包括以下步骤:1)化合物提取分离:1.1)原料:取苦豆子植物的果实部位,打粉备用;1.2)将步骤1.1制备的苦豆子粉放入提取罐中,加入质量分数为10-95%的乙醇溶剂,提取得到初提浸膏;1.3)将步骤1.2中提取得到的初提浸膏用水溶解,加入氢氧化钠溶液调节pH=1-3.5,再加入与溶解初提浸膏用水等体积的氯仿,置于分液漏斗中,摇晃,静置至分层清晰,氯仿部位在下层,取下层氯仿部位,用旋转蒸发器旋干溶剂得氯仿部位浸膏;回收氯仿,反复萃取,直至氯仿层无颜色。2)生物碱单体的分离、纯化:2.1)选用硅胶柱,将100-400目硅胶用二氯甲烷浸泡,搅拌无气泡,湿法装柱;2.2)将步骤1.3制备氯仿部位浸膏用二氯甲烷-甲醇溶解,加入100-400目的硅胶搅拌并挥干溶剂,并碾磨直到完全均匀,干法上样;2.3)选取洗脱系统为二氯甲烷:甲醇,洗脱梯度为100:1、50:1、30:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1、0:1;流出液用瓶子收集,然后用旋转蒸发仪浓缩,移入小样瓶,并加以编号,直到洗脱后TLC检测无生物碱时停止;根据TLC检测生物碱的分离情况,合并各洗脱溶剂液,得到28个流份;3)化合物单体纯化:3.1)在洗脱剂二氯甲烷:甲醇=50:1条件下,收集9个流分,对其中Fr8进行硅胶柱层析;3.2)在洗脱剂二氯甲烷:甲醇=100:1条件下收集的流分,旋干进行凝胶柱层析,得黄色粉末,即为本专利技术的化合物。所述化合物用于制备具有神经元保护或脑缺血再灌注损伤的药物,以及制备功能饮料。下面通过神经元保护实验进一步阐述本专利技术化合物的作用请参阅图1,神经元保护实验1.细胞处理方法1)利用原代神经元制备氧糖剥夺复供OGD/R模型对本专利技术的化合物H以及其衍生物M、衍生物L样品的活性进行筛选,衍生物M的结构:R1为OH,R2为H,R3为OH,R4为H;衍生物L的结构为:R1为H,R2为OH,R3为OCH3,R4为OH;将样品在培养基中终浓度为1μM,每个样品设3个复孔(n=1),重复5次(n=5);2)原代培养神经元细胞以2×105个/ml的密度种于96孔细胞培养板中,细胞分组如下:空白对照组(control)、模型组(Model)、阳性对照组、给药组;3)细胞常规培养:48h后换以新鲜培养液并给药(给予筛选样品或者阳性对照药、空白对照组和模型组给予等量溶媒),换液后于37℃、5%CO2培养箱中继续孵育12h后换以不含血清的培养基,MTT法进行细胞活力检测;其中除正常对照组外各组细胞都进行氧糖剥夺造模,即以无糖血清本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种具有神经元保护作用的化合物,所述化合物的分子式为C28H26N2O6,其特征在于:所述化合物的结构式如下:所述化合物的衍生物结构式如下:其中,R1为H、OCH3、OH、CH3或CF3;R2为H、OCH3或OH;R3为H、OCH3或OH,R4为H、OCH3、OH、CH3或CF3。

【技术特征摘要】
1.一种具有神经元保护作用的化合物,所述化合物的分子式为C28H26N2O6,其特征在于:所述化合物的结构式如下:所述化合物的衍生物结构式如下:其中,R1为H、OCH3、OH、CH3或CF3;R2为H、OCH3或OH;R3为H、OCH3或OH,R4为H、OCH3、OH、CH3或CF3。2.根据权利要求1所述的具有神经元保护作用的化合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1)化合物提取分离:1.1)原料:取苦豆子植物的果实部位,打粉备用;1.2)将步骤1.1制备的苦豆子粉放入提取罐中,加入质量分数为10-95%的乙醇溶剂,提取得到初提浸膏;1.3)将步骤1.2中提取得到的初提浸膏用水溶解,加入氢氧化钠溶液调节pH=1-3.5,再加入与溶解初提浸膏用水等体积的氯仿,置于分液漏斗中,摇晃,静置至分层清晰,氯仿部位在下层,取下层氯仿部位,用旋转蒸发器旋干溶剂得氯仿部位浸膏;回收氯仿,反复萃取,直至氯仿层无颜色;2)生物碱单体的分离、纯化:2.1)选用硅...

【专利技术属性】
技术研发人员:尹小英刘庆山
申请(专利权)人:尹小英
类型:发明
国别省市:江西;36

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