神经元再生的调控剂制造技术

本发明专利技术提供了涉及ＣＮＳ功能和疾病的方法和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】神经元再生的调控剂 专利
本专利技术一般涉及神经发育和神经学病症。本专利技术具体关注髓磷脂相关抑 制系统的新调控剂的鉴定和如此鉴定的调控剂的各种用途。
技术介绍
髓磷脂和髓磷脂相关蛋白已知成年哺乳动物CNS神经元的轴突在损伤后再生的能力非常有限，而 周围神经系统(PNS)中的轴突再生迅速。CNS神经元的有限再生能力部分地 是CNS轴突的内在特性，但也是由于不允许的环境。虽然CNS髓磷脂不是神 经突向外长出的抑制信号的唯一来源，但是它含有积极阻断轴突生长的众多 抑制分子，因此构成再生的一个重大障碍。已经鉴定了三种这样的髓磷脂相 关蛋白(MAP): Nogo (也称为NogoA)是具有两个跨膜结构域的Reticulon蛋 白质家族成员；髓磷脂相关糖蛋白(MAG)是Ig超家族的跨膜蛋白；和OMgp 是具有糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚的亮氨酸富含重复(LRR)蛋白。Chen等，Nature 403:434-39 (2000); GrandPre等，Nature 417:439-444 (2000); Prinjha等，Nature 403:383-384 (2000); McKerracher等，Neuron 13:805-11 (1994); Wang等，Nature 417:941-4 (20020: Kottis等，J. Neurochem 82:1566-9 (2002)。 NogoA的一部分， 即Nogo66已记载为66个氨基酸的胞外多肽，其见于Nogo的所有三种同等型。 不管它们的结构差异，所有三种抑制性蛋白质(还有Nogo66)已经显示 出结合相同的GPI锚定受体，称为Nogo受体(NgR;也称为Nogo受体-l或 NgRl),而且已提出NgR可能是介导Nogo、 MAG和OMgp的抑制作用所要求 的。Fournier等，Nature 409:34、-346 (2001)。还已鉴定了两种NgRl同系物 (NgR2和NgR3)。 US 2005/0048520 Al (Strittmatter等)，公布于2005年3月3 日。考虑到NgR是GPI锚定细胞表面蛋白，它不太可能是直接的信号转导物 (Zheng等，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102:1205-1210 (2005))。另有人提出神经 营养因子受体p75WW起NgR的共同受体的作用，并且在受体复合物中提供信 号转导模块(Wang等，Nature 420:74-78 (2002); Wong等，Nat. Neurosci.5:1302-1308 (2002》。然而，最近关于NgR/p75WTR受体复合物的研究提出了关于NgR在髓磷脂 相关抑制系统中作用的问题。Zheng等已显示了 NgR的遗传删除在体外不降 低神经突抑制或在体内不促进皮质脊髓束(CST)再生。Zheng等(2005)，见上 文。与这些结果一致，另一项研究未能检测到NgR突变型小鼠中CST再生的 任何增强。Kim等，Neuron 44:439-451 (2004)。这些发现与NgR/p乃NTR受体复 合物代表多种抑制信号的关键收敛点(converging point)的假设矛盾。NgR突 变型小鼠中CST再生的失败与用Nogo66/NgR相互作用的肽拮抗剂处理的野 生型动物中观察到的CST再生形成对比(GrandPre等，Nature 417:5470551 (2002)及Li和Strittmatter, Nature 23:4219-4227 (2002))。另一项研究已显示了 NgR的显性负片段的表达导致增强的视神经轴突再生以及条件损伤。这两个 试验都没有直接测试NgR的参与，因为这两种拮抗性肽都具有干扰其它抑制 性配体/受体的潜力。与实验结果的这些不 一致性强烈指示NgR或NgR/p75^^受体复合物可 能在CNS再生的髓磷脂相关抑制中发挥有限的作用，而且其它成分，诸如别 的受体或结合配偶可能参与抑制信号的传递。PirB及人直向同系物I类主要组织相容性复合物(MHC)最初鉴定为一个编码对免疫系统重要 的一个分子家族的区域。新近的证据指出了I类MHC分子在发育和成年CNS 中具有别的功能。Boulanger和Shatz， Nature Rev Neurosci. 5:521-531 (2004); US 2003/0170690 (Shatz和Syken)，公布于2003年9月11日。发现许多I类MHC 成员及其结合配偶在CNS神经元中表达。新近的遗传和分子研究聚焦于CNS I类MHC的生理学功能，而且初始结果提示I类MHC分子可能牵涉活性依赖性 突触可塑性，即现有突触连接的强度应答神经元活性而增强或减弱，接着是 对回路的长期结构改变的过程。此外，也已在遗传上将I类MHC编码区与极 其多种具有神经学症状的病症连锁，而且认为I类MHC分子的异常功能有助 于对正常脑发育和可塑性的破坏。免疫背景中已知的I类MHC受体之一是PirB,即由Kubagawa等，Proc. Nat. Acad. Sci. USA 94:5261-6 (1997)首先记载的一种鼠多肽。小鼠PirB具有数种 人直向同系物，它们是白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B (LILRB)的成员，也称为"免疫球蛋白样转录物"(ILT)。人直向同系物显示出与鼠序列的显著 同源性，从最高到最低的次序如下LILRB3/ILT5, LILRB1/ILT2, LILRB5/ILT3, LILRB2/ILT4,而且正如PirB —样，都是抑制性受体。 LILRB3/ILT5 (NP—006855)和LILRB1/ILT2 (NP—006660)最初记载于Samaridis 和Colonna, Eur. J. Immunol. 27(3):660-665 (1997)。 LILRB5/ILT3 (NP—006831) 已记载于Borges等，J. Immunol. 159(11):5192-5196 (1997)。 LILRB2/ILT4 (也 称为MIRIO )是由Colonna等，J. Exp. Med. 186:1809-18 (1997)鉴定的。PirB及 其人直向同系物显示出极大程度的结构可变性。各种可变剪接形式的序列可 以自EMBL/GenBank获得，包括但不限于人ILT4 cDNA的以下登录号 ILT4-cl1 AF009634; ILT4-cl17 AF11566; ILT4-cl26 AF11565。如上所述， PirB/LILRB多肽是I类MHC (MHCI)抑制性受体，而且已知它们在调控免疫细 胞激活中的作用(Kubagawa等，见上文；Hayami等，J. Biol. Chem. 272:7320 (1997); Takai等，Immunology 115:433 (2005); Takai等，Immunol. Rev. 181:215 (2001); Nakamura等，Nat. Immunol. 5:623 (2004); Liang等，Eur. J. Immunol, 32:2418 (2002))。Syken等(Science 313:1795-800 (2006))的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于鉴定ＰｉｒＢ／ＬＩＬＲＢ拮抗剂的方法，包括使候选药剂与包含ＰｉｒＢ／ＬＩＬＲＢ和髓磷脂或髓磷脂相关蛋白或其片段的复合物接触，并检测所述候选药剂抑制ＰｉｒＢ／ＬＩＬＲＢ与所述髓磷脂或髓磷脂相关蛋白或其片段之间相互作用的能力，其中若该相互作用受到抑制，则该候选药剂鉴定为拮抗剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾斯文德阿特瓦尔，马克特西尔拉维格尼，
申请(专利权)人：健泰科生物技术公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]