用于自动生成遗传修饰的T细胞的方法技术

本发明专利技术提供了一种用于产生遗传修饰的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞的方法，其包括以下步骤：a)提供包含T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞的细胞样品，b)通过离心制备细胞样品，c)磁性分离该T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞，d)利用调节剂活化富集的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞，e)遗传修饰该T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞，f)遗传修饰的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞在培养室中扩增，g)洗涤培养的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞，其特征在于所有步骤在封闭的和无菌的细胞培养系统中进行。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及修饰的T细胞的自动生成。
技术介绍
目前临床产生基因修饰的T细胞是一个复杂的过程，其一般开始于获得患者的外周血单核细胞(PBMC)。现有方案以白细胞分离步骤为特征，其为了增加的细胞产率而以最初的更麻烦的处理为代价(与较小量的抽血相反)。PBMC常常在用病毒或非病毒载体基因修饰之前进行T细胞富集和激活。然后扩增修饰的T细胞以达到治疗所需的细胞数量，在这之后，细胞在回输前进行最终配制和/或冷冻保存。必须对细胞产物进行多项质量控制检验，并必须满足所有发布的标准和优良制造规范(GMP)指南。迄今为止，利用基因修饰的T细胞的过继细胞转移(ACT)主要由通过现有的装置和基础设施开发了其用于小规模临床试验的生产方法的研究人员实施。这样的个性化治疗是复杂的：该细胞生产方法是费力的，因为它包含许多(开放的)操作步骤(例如，密度梯度细胞加工、基因修饰、洗涤、喂养等等)，其需要来自经历深度训练的专业熟练的操作人员的介入。失败率可能由于生产这些复杂的产物对于清洁室人员的高技能和时间要求而是高的。此外，具有清洁室的专用基础设施和所有必需的仪器必须到位、合格和是功能性的以确保净化和无菌的密闭。这本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于产生遗传修饰的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞的方法，其包括以下步骤：a)提供包含T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞的细胞样品；b)通过离心制备该细胞样品；c)磁性分离该T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞；d)使用调节剂活化该富集的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞；e)遗传修饰该T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞；f)在培养室中扩增该遗传修饰的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞；g)洗涤该培养的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞；其特征在于，所有步骤在封闭的和无菌的细胞培养系统中进行。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.04.24 US 61/983,5431.一种用于产生遗传修饰的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞的方法，其包括以下步骤：a)提供包含T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞的细胞样品；b)通过离心制备该细胞样品；c)磁性分离该T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞；d)使用调节剂活化该富集的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞；e)遗传修饰该T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞；f)在培养室中扩增该遗传修饰的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞；g)洗涤该培养的T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞；其特征在于，所有步骤在封闭的和无菌的细胞培养系统中进行。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述调节剂选自于激动性抗体、细胞因子、重组共刺激分子和小的药物抑制剂。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述调节剂是与珠或纳米结构偶联的抗-CD3和抗-CD28抗体或其片段。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述纳米结构是纳米基质，该纳米基质包含：a)活动的聚合物链的基质，以及b)连接到所述活动的聚合物链的基质的抗-CD3和抗-CD28抗体或其片段，其中该纳米基质的尺寸是1至500纳米。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中通过用慢病毒、γ-逆转录病毒、α-逆转录病毒或腺病毒转导所述细胞，或通过电穿孔或通过核酸、蛋白质、位点特异性核酸酶、自复制RNA病毒或整合缺陷型慢病毒载体的转染进行所述T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞的遗传修饰。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中通过用慢病毒载体转导所述细胞进行所述T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞的遗传修饰。7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述T细胞、T细胞亚群和/或T细胞祖细胞的磁性分离是通过使用对于T细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·凯泽，M·阿森马赫尔，I·约翰斯顿，
申请(专利权)人：美天旎生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE