HIV抗原和抗体及其组合物、方法和用途技术

本说明书公开了HIV抗原、包含此类HIV抗原的免疫原性组合物和药物、此类HIV抗原和免疫原性组合物和药物用于制备α‑HIV抗体的方法和用途、以及α‑HIV抗体、包含此类α‑HIV抗体的治疗性组合物和药物、以及此类α‑HIV抗体和治疗性组合物和药物用于治疗基于HIV的疾病的方法和用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本申请要求2013年12月8日提交的美国临时专利申请61/913,363和2014年8月18日提交的美国临时专利申请62/038,824的优先权和申请日的权益，其各自的内容通过引用以其全文特此被并入。人免疫缺陷病毒(HIV)是慢病毒属(Lentivirus，缓慢复制的逆转录病毒)的成员，所述慢病毒属是逆转录病毒科的一部分。HIV在人类中引起一种状况，获得性免疫缺陷综合征(AIDS)，其中免疫系统的逐渐衰退使得威胁生命的机会性感染和癌症发展。HIV感染通过血液、精液、阴道液、预射精液(pre-ejaculate)或母乳的转移发生。在这些体液中，HIV以游离病毒颗粒和受感染的免疫细胞内的病毒二者存在。HIV可以感染在人免疫系统中至关重要的多种免疫细胞，诸如例如，辅助性T细胞(特别是CD4+T细胞)、巨噬细胞、树突细胞和小胶质细胞。HIV进入巨噬细胞以及CD4+T细胞是通过病毒体包膜糖蛋白(gp120)与靶细胞上的CD4分子以及与趋化因子辅助受体(co-receptor)的相互作用介导的。HIV感染通过许多机制导致低水平的CD4+T细胞，所述机制包括未受感染的旁邻细胞的细胞凋亡、受感染的细胞直接被病毒杀死和受感染的CD4+T细胞被识别受感染的细胞的CD8细胞毒性淋巴细胞杀死。当CD4+T细胞数下降低于临界水平时，细胞介导的免疫力丧失，并且身体逐渐地变得对机会性感染更敏感。多年以来，HIV感染不是一种治疗敏感的状况。在1981年该疾病被鉴定出时，存在的抗病毒疗法在控制病毒会对患者的免疫系统造成的损害方面是无效的。病毒引起CD4+T细胞的直接和间接的破坏，所述CD4+T细胞对充分发挥功能的免疫系统是重要的。随着患者的CD4+T细胞计数减少，疾病逐渐地变得更严重。当CD4+T细胞计数下降低于某个水平时，患者被认为已经恶化到患有完全型AIDS(full-blown AIDS)的点。这藉以发生的点的定义不同，但通常认为在具有少于200个/ml血液的CD4+T细胞计数的健康HIV阳性的人中，到达了该点。最近，抗病毒疗法已经改进，并且疾病的进展已经被大幅度地减缓。现代组合疗法可以(在一些患者中)无限期地延迟完全型AIDS的发作。但是，这些疗法昂贵，并且对患者造成负担，要求他或她每天服用相当数量的片剂(许多患者发现难以记得服用要求的药物)并且在许多情况中导致令人不快的副作用(当服用包含许多不同药物的混合药时并不意外，该混合药必须终身服用)。目前的疗法不仅具有这些问题，它们还不是治愈性的，仅仅延迟完全型AIDS的发作。此外，近年来，存在表明药物耐受性HIV药物的出现和传播的增加的数目的报道。因此，对能预防和/或治愈免疫缺陷病毒诸如HIV，并且还预防和/或治愈AIDS的疫苗存在现实且迫切的需求。以前，通过鉴定现存的HIV毒株并且然后制备对该病毒特异性的疫苗，已经进行过开发HIV疫苗的尝试。通常，疫苗基于B细胞(抗体)应答，该抗体对针对其所述抗体被开发的特定HIV毒株的表面抗原是反应性的。一般地，因为产生新病毒的病毒的突变倾向于在表面蛋白中发生，所以包含抗原的表面蛋白从一个HIV毒株到下一个HIV毒株是可变的。这样的结果是，传统的HIV疫苗，如果它们最终是有功能的，通常只会针对一种特定的病毒毒株进行保护，并且不针对由突变得到的新毒株进行保护。因此，将需要新的疫苗，用于针对新出现的毒株进行保护。通过突变出现新病毒毒株之间的时间段非常短。在被感染的个体中，由于该个体的免疫系统施加的选择压力，不断出现新的毒株。结果，由于高突变率，在被感染的个体中发现的病毒群体随着时间(数周、数月以及数年期间)变化，而对再次感染无任何需要。因此，靶向个体中的免疫缺陷病毒感染或靶向个体中的可能感染或发展的潜在的新病毒毒株的唯一可能的方法是靶向蛋白质组的保守区。这种方法固有地存在问题，因为由于(a)免疫压力和(b)病毒的复制机制的低保真率，对HIV的主要免疫应答针对其自身具有高突变率的部分。概述因此，在本说明书中公开的方面提供了一种HIV抗原。本文公开的HIV抗原可以触发产生α-HIV1抗体的免疫应答，所述α-HIV1抗体能够结合存在于HIV病毒体上的表位、源自HIV病毒的表位、由HIV病毒产生或改变的表位和/或由被HIV病毒感染或表达HIV病毒遗传密码的全部或部分的细胞产生或改变的表位。在本说明书中公开的其他方面提供了免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包含本文公开的一种或更多种HIV抗原。组合物还可以包含佐剂。在本说明书中公开的其他方面提供了使用本文公开的一种或更多种HIV抗原和/或本文公开的一种或更多种免疫原性组合物产生α-HIV1抗体的方法。此方法的方面可以包括以下步骤：(a)向动物施用在本说明书中公开的免疫原性组合物；(b)从所述动物收集包含α-HIV抗体或产生α-HIV抗体的细胞的样品；和(c)从所述样品分离α-HIV抗体。公开的方法可用于制备α-HIV单克隆抗体或α-HIV多克隆抗体。在本说明书中公开的其他方面提供了α-HIV抗体。本文公开的α-HIV抗体能够结合存在于HIV病毒体上的表位。此类α-HIV抗体包括天然存在的抗体和非天然存在的抗体二者，以及单克隆α-HIV抗体或多克隆α-HIV抗体。在本说明书中公开的其他方面提供了检测HIV感染的方法。此方法的方面可以包括以下步骤：(a)使样品与本文公开的α-HIV抗体接触；和(b)检测包含α-HIV抗体的抗体-抗原复合物的存在或不存在；其中通过抗体-抗原复合物的检测指示HIV感染的存在。在步骤(a)的与α-HIV抗体接触之前，样品可以经历一个或更多个纯化步骤。另外，步骤(c)的α-HIV抗体可以任选地与固相支持物连接。该方法可以检测HIV病毒体、源自HIV病毒的组分、由HIV病毒产生或改变的组分和/或由被HIV病毒感染或表达HIV病毒遗传密码的全部或部分的细胞产生或改变的组分。在本说明书中公开的其他方面提供了治疗感染HIV病毒或患有基于HIV的疾病的个体的方法。在本说明书中公开的其他方面提供了本文公开的α-HIV抗体用于制备药物的用途。在本说明书中公开的其他方面提供了本文公开的α-HIV抗体用于治疗感染HIV病毒的个体的用途。附图简述图1示出了HIV肽抗体免疫原性的结果。图1B示出了对VIF肽的总Ig应答；图1D示出了对NEF肽的总Ig应答；图1E示出了对VIF肽和NEF肽的IgG2c应答；和图1F示出了对VIF肽和NEF肽的IgG1应答。图2示出了对HIV-v的多克隆应答。图3示出了来自流式细胞术分析的结果。图3A示出了未感染HIV、未用小鼠血清处理的细胞的FACs数据；图3B示出了来自未感染HIV、用疫苗接种后的小鼠血清处理的细胞的FACs数据；图3C示出了来自HIV感染并用小鼠血清处理的细胞的FACs数据；图3D示出了来自HIV感染的细胞和同种型对照的FACs数据；图3E示出了来自用疫苗接种前的小鼠血清处理的HIV感染的细胞的FACs数据；和图3F示出了来自用疫苗接种后的小鼠血清处理的HIV感染的细胞的FACs数据。图4示出了对HIV-v的IgG应答。图5示出了HIV抗体产生的结果。图5A示出了来自安慰剂动物的结果；图5B示出了来自HAD动物的结果。图6示出本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的α‑HIV抗体，其中所述分离的α‑HIV抗体选择性地结合存在于HIV病毒体上的表位、源自HIV病毒的表位、由HIV病毒产生或改变的表位和/或由被HIV病毒感染或表达全部或部分HIV病毒遗传密码的细胞产生或改变的表位。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.12.08 US 61/913,363;2014.08.18 US 62/038,8241.一种分离的α-HIV抗体，其中所述分离的α-HIV抗体选择性地结合存在于HIV病毒体上的表位、源自HIV病毒的表位、由HIV病毒产生或改变的表位和/或由被HIV病毒感染或表达全部或部分HIV病毒遗传密码的细胞产生或改变的表位。2.根据权利要求1所述的分离的α-HIV抗体，其中所述分离的α-HIV抗体包含重链可变结构域(VH)和/或轻链可变结构域(VL)。3.根据权利要求1或2所述的分离的α-HIV抗体，其中所述分离的α-HIV抗体包含重链可变结构域(VH)CDR1区、CDR2区、CDR3区或其任何组合。4.根据权利要求1-3中任一项所述的分离的α-HIV抗体，其中所述分离的α-HIV抗体包含轻链可变结构域(VL)CDR1区、CDR2区、CDR3区或其任何组合。5.根据权利要求1-4中任一项所述的分离的α-HIV抗体，其中所述表位是SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和/或SEQ ID NO:4，或相对于SEQ ID NO:1-4具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约86％、至少约87％、至少约88％、至少约89％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％的氨基酸同一性的序列，或相对于SEQ ID NO:1-4具有在约75％至约100％、约80％至约100％、约85％至约100％、约90％至约100％、约95％至约100％、约75％至约99％、约80％至约99％、约85％至约99％、约90％至约99％、约95％至约99％、约75％至约97％、约80％至约97％、约85％至约97％、约90％至约97％或约95％至约97％的范围内的氨基酸同一性的序列，或相对于SEQ ID NO:1-4具有至少1个、至少2个、至少3个或至少4个连续和/或非连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列，或相对于SEQ ID NO:1-4具有至多1个、至多2个、至多3个、至多4个连续和/或非连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列，或相对于SEQ ID NO:1-4具有约1个至约2个、约1个至约3个、约1个至约4个、约2个至约3个、约2个至约4个或约3个至约4个连续和/或非连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列。6.根据权利要求1-5中任一项所述的分离的α-HIV抗体，其中所述分离的α-HIV抗体具有可变重链(VH)区，所述可变重链(VH)区包含SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26或SEQ ID NO:27，或相对于SEQ ID NO:5-27中任一个具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约86％、至少约87％、至少约88％、至少约89％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％的氨基酸同一性的序列，或相对于SEQ ID NO:5-27中任一个具有在约75％至约100％、约80％至约100％、约85％至约100％、约90％至约100％、约95％至约100％、约75％至约99％、约80％至约99％、约85％至约99％、约90％至约99％、约95％至约99％、约75％至约97％、约80％至约97％、约85％至约97％、约90％至约97％或约95％至约97％的范围内的氨基酸同一性的序列，或相对于SEQ ID NO:5-27中任一个具有至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个、至少10个、至少11个、至少12个、至少13个、至少14个或至少15个连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列，或相对于SEQ ID NO:5-27中任一个具有至多1个、至多2个、至多3个、至多4个、至多5个、至多6个、至多7个、至多8个、至多9个、至多10个、至多11个、至多12个、至多13个、至多14个或至多15个连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列，或相对于SEQ ID NO:5-27中任一个具有至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个、至少10个、至少11个、至少12个、至少13个、至少14个或至少15个非连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列，或相对于SEQ ID NO:5-27中任一个具有至多1个、至多2个、至多3个、至多4个、至多5个、至多6个、至多7个、至多8个、至多9个、至多10个、至多11个、至多12个、至多13个、至多14个或至多15个非连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列。7.根据权利要求1-6中任一项所述的分离的α-HIV抗体，其中所述分离的α-HIV抗体具有可变轻链(VL)区，所述可变轻链(VL)区包含SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:41或SEQ ID NO:42，或相对于SEQ ID NO:31-42中任一个具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约86％、至少约87％、至少约88％、至少约89％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％的氨基酸同一性的序列，或相对于SEQ ID NO:31-42中任一个具有在约75％至约100％、约80％至约100％、约85％至约100％、约90％至约100％、约95％至约100％、约75％至约99％、约80％至约99％、约85％至约99％、约90％至约99％、约95％至约99％、约75％至约97％、约80％至约97％、约85％至约97％、约90％至约97％或约95％至约97％的范围内的氨基酸同一性的序列，或相对于SEQ ID NO:31-42中任一个具有至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个、至少10个、至少11个、至少12个、至少13个、至少14个或至少15个连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列，或相对于SEQ ID NO:31-42中任一个具有至多1个、至多2个、至多3个、至多4个、至多5个、至多6个、至多7个、至多8个、至多9个、至多10个、至多11个、至多12个、至多13个、至多14个或至多15个连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列，或相对于SEQ ID NO:31-42中任一个具有至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个、至少10个、至少11个、至少12个、至少13个、至少14个或至少15个非连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列，或相对于SEQ ID NO:31-42中任一个具有至多1个、至多2个、至多3个、至多4个、至多5个、至多6个、至多7个、至多8个、至多9个、至多10个、至多11个、至多12个、至多13个、至多14个或至多15个非连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列。8.根据权利要求1-7中任一项所述的分离的α-HIV抗体，其中所述分离的α-HIV抗体至少包含VH CDR1，所述VH CDR1具有SEQ ID NO:27的氨基酸序列，或相对于SEQ ID NO:27具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约86％、至少约87％、至少约88％、至少约89％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％的氨基酸同一性的序列，或相对于SEQ ID NO:27具有在约75％至约100％、约80％至约100％、约85％至约100％、约90％至约100％、约95％至约100％、约75％至约99％、约80％至约99％、约85％至约99％、约90％至约99％、约95％至约99％、约75％至约97％、约80％至约97％、约85％至约97％、约90％至约97％或约95％至约97％的范围内的氨基酸同一性的序列，或相对于SEQ ID NO:27具有至少1个、至少2个、至少3个或至少4个连续和/或非连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列，或相对于SEQ ID NO:27具有至多1个、至多2个、至多3个或至多4个连续和/或非连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列，或相对于SEQ ID NO:27具有约1个至约2个、约1个至约3个、约1个至约4个、约2个至约3个、约2个至约4个或约3个至约4个连续和/或非连续的氨基酸缺失、添加和/或置换的序列。9.根据权利要求1-8中任一项所述的分离的α-HIV抗体，其中所述分离的α-HIV抗体至少包含VH CDR2，所述VH CDR2具有SEQ ID NO:28的氨基酸序列，或相对于SEQ ID NO:28具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约86％、至少约87％、至少约88％、至少约89％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％的氨基酸同一性的序列，或相对于SEQ ID NO:28具有在约75％至约100％、约80％至约100％、约85％至约100％、约90％至约100％、约95％至约100％、约75％至约99％、约80％至约99％、约85％...

【专利技术属性】
技术研发人员：威尔逊·卡帕罗斯万德雷，格雷戈里·A·斯特洛夫，
申请(专利权)人：派特塞尔有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB