本发明专利技术属于菌类提取技术领域，涉及一种竹荪提取液、发酵胞外液和发酵胞内液的制备方法及其应用。制备方法包括步骤A、取竹荪的菌盖和/或菌托，热风烘干至恒重，粉碎过筛，得到待提粉末，密封保存，B、将待提粉末和乙醇水溶液混合，在60‑80℃的恒温下浸提1.5‑3.5hr，C、过滤，取清液，即为竹荪提取液；还包括在抑制食品腐败菌中的应用。本发明专利技术实现了变废为宝，竹荪的附加值便大大提高，同时也避免了对环境造成的污染。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于菌类提取
，涉及一种竹荪提取液、发酵胞外液和发酵胞内液的制备方法及其应用。
技术介绍
竹荪为担子菌亚门(Basidiomycotina)鬼笔科(Phallaceae)竹荪属(Dictyophora)的统称，民间把其常比喻为带有面纱的曼妙女郎、真菌中的宠妻皇后、真菌中的花之仙子。竹荪分布极其广泛，遍布美洲、非洲、亚洲、欧洲等地。竹荪子实体在组成上分为4部分，分别为遍布网络的菌盖，海绵状的菌裙、状如碗形的菌柄以及遍布外周的菌托，多数高为10cm-20cm。菌盖呈钟形，高约3cm，宽2cm-5cm，上面覆有孢体，暗绿色、光滑、透明、粘稠，顶端平整，有孔口存在。菌裙白色，在菌盖边沿呈下垂状，宛如婀娜少女的纱裙，其中竹荪裙子长短因菌种差异存在区别。菌柄呈现白色，中空，酷似纺缍形，直径约为3cm。菌托围绕于菌柄四周，高约5cm，粗约4cm，3个组成部分：内膜、膜间胶质和外膜内外依次分布[3]。据统计，全世界竹荪种类大约为12种，其中在我国发现了7种，具体种类和分布地区如下：皱盖竹荪(Dictyophora merulina)在广东、海南可见；棘托竹荪(Dictyophora echinovlvata)在四川、贵州等地多见。市场上销售的竹荪只是竹荪的可食部分菌裙和菌柄，而菌盖和菌托在采收加工时常被作为废弃部分，不仅是资源浪费，更造成对环境的污染。研究表明：竹荪菌托和菌盖两部分的鲜重占子实体总量60％，可见，变废为宝已经变成了提高竹荪附加值的一种有效途径。目前对于菌盖菌托的研究进展如下：檀东飞等采用水蒸汽蒸馏法和石油醚冷浸提获得棘托竹荪菌盖和菌托的挥发油和石油醚浸提物，通过HP-5MS柱分离和质谱解析，得到主要成分，发现菌盖石油醚提取物与挥发油存在21种相同成分，菌托中有35种成分初次从竹荪属中检测到，抑菌试验表明两个部位的挥发油对供试菌种霉菌、细菌以及酵母菌均存在较强的抑制能力；熊彬等研究了长裙竹荪托盖液剂量差异对大鼠免疫功能方面的的增免作用，经过一定处理后采血测免疫指标，解剖后取胸腺、脾脏进行指数测定，发现辐射损伤大鼠胸腺、脾脏指数相对于对照组显著增加，存在明显扩张作用，两类剂量药物：大剂量与小剂量对Ⅱ-2和NK两种细胞表现出来的激活效应更优；黎璐等研究了长裙竹荪鲜品的菌盖、子实体和菌托石油醚提取物，通过气质分析对3部分的石油醚提取物的成分做了比较，共检出69种成分，其中菌盖、子实体、菌托分别检测出了36、46、31种成分，脂肪酸占检出总量依次为86.15％、84.03％、86.42％，不饱和脂肪酸与脂肪酸总检出量比值则为56.00％、65.79％、63.40％；赵凯等把红托竹荪菌托提取的粗多糖与菌丝体和除去子实体的其他部位进行了对比，发现菌托部位最高，粗多糖经过进一步分离纯化和结构分析并进行体外试验，得出多糖的组分DRVPl是β-型甘露糖苷，这种组分对小鼠S180肉瘤存在一定程度的抑制效果；郭渝南等进行了长裙竹荪托盖液修复大鼠免疫损伤的实验，发现竹荪托盖液对最敏感的具备免疫活性C细胞具有修复辐射损伤作用，提高C淋巴细胞数量和生长因子指数，激活免疫调节细胞(DE)，推测出免疫作用的增强是多糖与微量元素共同作用的结果；吴雪艳等采用Box-Benhnken响应面法对竹荪菌托多糖的提取工艺进行优化实验，获得多糖最佳浸提工艺：提取温度82℃、液料比62:lmL.g-1、提取时间1h、提取1次，提取率达13.016％；庄永亮等对长裙竹荪的菌盖多糖进行提取，评价了其抗氧化能力，发现菌盖多糖还原能力和和羟基自由基抑制能力较强，对于超氧阴离子抑制能力表现较弱。但现有的研究未对涉及到对竹荪的菌盖和/或菌托的提取、发酵胞外液、发酵胞内液的制备及其应用，尤其是没有应用于食品防腐中。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术的不足，提供一种基于竹荪的废弃物的竹荪提取液的制备方法。本专利技术的另一目的是提供一种基于竹荪的废弃物的竹荪发酵胞外液的制备方法。本专利技术的再一目的是提供一种基于竹荪的废弃物的竹荪发酵胞内液的制备方法。本专利技术还有一个目的是提供竹荪提取液在抑制食品腐败菌中的应用。本专利技术还有一个目的是提供竹荪发酵胞外液在抑制食品腐败菌中的应用。本专利技术还有一个目的是提供竹荪发酵胞内液在抑制食品腐败菌中的应用。为达到上述目的，本专利技术采用了下列技术方案：一种竹荪提取液的制备方法，包括以下步骤：A、取竹荪的菌盖和/或菌托，热风烘干至恒重，粉碎过筛，得到待提粉末，密封保存，B、将待提粉末和乙醇水溶液混合，在60-80℃的恒温下浸提1.5-3.5hr，C、过滤，取清液，即为竹荪提取液。在上述的竹荪提取液的制备方法中，包括以下步骤：A、取竹荪的菌盖和/或菌托，60℃热风烘干至恒重，粉碎过80目筛，得到待提粉末，密封保存，B、将待提粉末和浓度为60-95％乙醇水溶液以1:10-30的料液比，在60-80℃的提取温度下浸提1.5-3.5hr，C、过滤，取清液，即为竹荪提取液。在上述的竹荪提取液的制备方法中，所述的乙醇水溶液的浓度为90％，所述的料液比为1:20，所述的浸提温度为75℃，所述的浸提时间为2hr。一种竹荪发酵胞外液的制备方法，包括以下步骤：A、菌种活化将竹荪的菌盖和/或菌托接种于斜面培养基，24℃恒温培养，进行活化，B、准备菌丝把活化后的竹荪菌种接种于PDA平板上，待长出孢子后用无菌水洗下分生孢子，制备成106-108个.mL-1的孢子悬液，把孢子悬液与冷却至45-50℃的PDA培养基混合均匀，倒于各个培养皿中，待菌丝长满后低温保存待用，C、发酵将长满菌丝的PDA培养基用无菌打孔器制成若干菌饼，将其接入液体PDA培养基，于24℃、120r/min摇床培养10d，得发酵培养基，D、发酵胞外液的制备发酵培养基低温离心取上清液，过滤，获得发酵胞外液。在上述的竹荪发酵胞外液的制备方法中，步骤D中，发酵培养基的离心温度为4℃，离心速率为8000r/min，离心时间为10min。一种竹荪发酵胞内液的制备方法，包括以下步骤：A、菌种活化将竹荪的菌盖和/或菌托接种于斜面培养基，24℃恒温培养，进行活化，B、准备菌丝把活化后的竹荪菌种接种于PDA平板上，待长出孢子后用无菌水洗下分生孢子，制备成106-108个.mL-1的孢子悬液，把孢子悬液与冷却至45-50℃的PDA培养基混合均匀，迅速倒于各个培养皿中，待菌丝长满后低温保存待用，C、发酵将长满菌丝的PDA培养基用无菌打孔器制成若干菌饼，将其接入液体PDA培养基，于24℃、120r/min摇床培养10d，得发酵培养基，D、发酵胞内液的制备发酵培养基低温离心，取离心后的沉淀用蒸馏水反复洗涤3次，收集菌丝体，菌丝体加蒸馏水经过超声细胞破碎后，再加入无水乙醇，置于80℃水浴锅中水浴2h，过滤除菌，即为发酵胞内液。在上述的竹荪发酵胞外液的制备方法中，步骤D中，所述的步骤D中，发酵培养基的离心温度为4℃，离心速率为8000r/min，离心时间为10min。根据上述的制备方法制备的竹荪提取液在抑制食品腐败菌中的应用。根据上述的制备方法制备的竹荪发酵胞外液在抑制食品腐败菌中的应用。根据上述的制备方法制备的竹荪发酵胞内液在抑制食品腐败菌中的应用。与现有的技术相比，本专利技术的优点在于：把采摘本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种竹荪提取液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、取竹荪的菌盖和/或菌托，热风烘干至恒重，粉碎过筛，得到待提粉末，密封保存，B、将待提粉末和乙醇水溶液混合，在60‑80℃的恒温下浸提1.5‑3.5hr，C、过滤，取清液，即为竹荪提取液。
【技术特征摘要】
1.一种竹荪提取液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、取竹荪的菌盖和/或菌托，热风烘干至恒重，粉碎过筛，得到待提粉末，密封保存，B、将待提粉末和乙醇水溶液混合，在60-80℃的恒温下浸提1.5-3.5hr，C、过滤，取清液，即为竹荪提取液。2.根据权利要求1所述的竹荪提取液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、取竹荪的菌盖和/或菌托，60℃热风烘干至恒重，粉碎过80目筛，得到待提粉末，密封保存，B、将待提粉末和浓度为60-95％乙醇水溶液以1:10-30的料液比，在60-80℃的提取温度下浸提1.5-3.5hr，C、过滤，取清液，即为竹荪提取液。3.根据权利要求2所述的竹荪提取液的制备方法，其特征在于，所述的乙醇水溶液的浓度为90％，所述的料液比为1:20，所述的浸提温度为75℃，所述的浸提时间为2hr。4.一种竹荪发酵胞外液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、菌种活化将竹荪的菌盖和/或菌托接种于斜面培养基，24℃恒温培养，进行活化，B、准备菌丝把活化后的竹荪菌种接种于PDA平板上，待长出孢子后用无菌水洗下分生孢子，制备成106-108个.mL-1的孢子悬液，把孢子悬液与冷却至45-50℃的PDA培养基混合均匀，倒于各个培养皿中，待菌丝长满后低温保存待用，C、发酵将长满菌丝的PDA培养基用无菌打孔器制成若干菌饼，将其接入液体PDA培养基，于24℃、120r/min摇床培养10d，得发酵培养基，D、发酵胞外液的制备发酵培养基低温离心取上清液，过滤，获得发酵胞...
【专利技术属性】
技术研发人员：林海萍，张爽，张立钦，李南羿，王超，郑剑，
申请(专利权)人：浙江农林大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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