【技术实现步骤摘要】
一、
本专利技术涉及一种生物基质凝胶材料的制备方法，尤其是一种用于促进软骨再生修复的生物基质凝胶材料的制备方法、凝胶性能测定方法及应用。二、
技术介绍
由于不存在血管和神经网络，膝关节软骨几乎没有自身修复能力，特别是形成了大的损伤部位时，会导致关节痛以及关节功能的丧失，常进展为骨关节炎。另外，由于老龄或运动导致关节的过度使用，膝关节软骨损伤患者越来越多，严重影响了患者的生活质量，因此用于促进软骨再生修复的生物基质材料的制备方法是一种重要的生物方法，在现有的用于促进软骨再生修复的生物基质材料的制备方法中，骨关节炎的治疗主要着眼于消除患部的疼痛或炎症，通过在患者部位是给予非类固醇性抗炎症药实现，对老年患者肾功能降低，从安全性的角度考虑，难以连续口服给予非类固醇性抗炎症药；也可以将软骨关节液的成分之一透明质酸制成制剂得到的产品通过给予关节腔内，具有改善关节的润滑功能、并且抑制疼痛的作用，但对于软骨损伤进一步进展形成的重度骨关节炎，必须进行人工关节置换进行治疗，现在还没有一种用于促进软骨再生修复的生物基质凝胶材料的制备方法、凝胶性能测定方法及应用。三、
技术实现思路
本专利技术的客体是一种用于促进软骨再生修复的生物基质凝胶材料的制备方法，本专利技术的客体是一种用于促进软骨再生修复的生物基质凝胶材料的凝胶性能测定方法，本专利技术的客体是一种用于促进软骨再生修复的生物基质凝胶材料的应用。为了克服上述技术缺点，本专利技术的目的是提供一种用于促进软骨再生修复的生物基质凝胶材料的制备方法、凝胶性能测定方法及应用，因此提高了软骨损伤进一步进展形成的重度骨关节炎的非手术治疗效果。为...
【技术保护点】
一种用于促进软骨再生修复的生物基质凝胶材料的制备方法，其特征是：其步骤：在人羊膜‑PEI体系的混合液与壳聚糖溶液的混合液中加入GP溶液进行调和处理，得到作为生物基质凝胶材料的基体的壳聚糖/人羊膜‑PEI/GP体系混合液。
【技术特征摘要】
1.一种用于促进软骨再生修复的生物基质凝胶材料的制备方法，其特征是：其步骤：在人羊膜-PEI体系的混合液与壳聚糖溶液的混合液中加入GP溶液进行调和处理，得到作为生物基质凝胶材料的基体的壳聚糖/人羊膜-PEI/GP体系混合液。2.根据权利要求1所述的用于促进软骨再生修复的生物基质凝胶材料的制备方法，其特征是：按照对人羊膜-PEI体系的混合液与壳聚糖溶液的混合液的组合混合液通过GP溶液的反应得到最终生物基质凝胶材料为技术要点。3.根据权利要求1所述的用于促进软骨再生修复的生物基质凝胶材料的制备方法，其特征是：其步骤是：第一步骤、人羊膜-PEI体系的制备：(a)、全溶脱细胞人羊膜制备：把人羊膜用PBS进行血迹清除处理，再用生理盐水进行反复清洗，把人羊膜切成1.8-2.2cm ×2.8-3.2cm，加入0.02% EDTA 溶液后通过振摇方式混合得到中间混合液体Ⅰ，通过离心方式把中间混合液体进行分离，弃除上清液后，加入0.23-0.27 mol 醋酸溶液，在温度为90 ℃的水中缓慢摇动，直至完全溶解中间混合液体Ⅱ，设定参数为转速3800-4200rpm、时间28-32min对中间混合液体Ⅱ进行离心处理， 提取取上清液，把提取的上清液经过压力为65.55-69.55KPa、温度为110.6-119.6℃和时间8-12min的消毒处理装得到中间混合液体Ⅲ，把中间混合液体Ⅲ在-18至-22℃保存；(b)、人羊膜-PEI体系的制备：将PEI溶液稀释到浓度0.8-1.2%，用NaOH稀溶液调节PEI溶液的pH值为4-6，加入中间混合液体Ⅲ使PEI浓度设置为0.4-0.6%得到人羊膜-PEI体系的混合液，冷冻干燥，第二步骤、壳聚糖/人羊膜-PEI/GP体系的制备：(a)、壳聚糖溶液的制备把脱乙酞度大于90%并且重量为0.18-0.22g的壳聚糖粉溶解到浓度为0.5M 的28-32ml的醋酸溶液中，通过磁力搅拌的方式至完全溶解，然后用醋酸溶液定容至88-102ml，得到浓度为2mg/ml的壳聚糖溶液，在室温进行保存，将搅拌均匀的壳聚糖溶液用牛皮纸封口置于120-122℃的灭菌锅中消毒9-11分钟，待灭菌后的壳聚糖溶液温度降至室温后放入3-5℃冰箱保存；(b)、甘油磷酸二钠即GP溶液的制备将GP粉末溶解于三蒸水中，获得质量浓度为54-58%的溶液，通过0.22μm的滤膜过滤除菌后得到GP溶液，在温度为3-5℃保存；(c)、壳聚糖/人羊膜-PEI/GP制备在超净台中，量取配制好的无菌壳聚糖溶液与配制好的人羊膜-PEI溶液，把第二步骤中的(a)步骤得到的壳聚糖溶液与第一步骤中得到的人羊膜-PEI体系的混合液按18-22:1的比例加入无菌烧杯中，把烧杯放到冰上进行0.9-1.1小时的超声处理得到壳聚糖人羊膜溶液，把烧杯中的壳聚糖人羊膜溶液放到冰上进行搅拌并且把把第二步骤中的(b)步骤得到的GP溶液缓慢逐步滴入到壳聚糖人羊膜溶液中，滴入的过程中观察壳聚糖人羊膜溶液是否存在明显絮状物质出现并且当没有明显絮状物质出现得到的中间混合液体Ⅳ，使中间混合液体Ⅳ中的GP的最终浓度为580-620mg/ml并且用饱和磷酸二氢钠调节pH值到6.9-7.2得到壳聚糖/人羊膜-PEI/GP体系混合液，当絮状物质出现就终止GP溶液滴入...
【专利技术属性】
技术研发人员：田丽娜，罗光会，梁峰，朱麟，杨继建，
申请(专利权)人：山东景源生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37
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