一种以栀子为原料制备藏红花酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种以栀子为原料制备藏红花酸的方法，包括以下工艺步骤：1）提取：将栀子原料，用76.9％乙醇提取，合并提取液，将合并的提取液浓缩后喷雾干燥，粉末备用；2）酶解：将所述步骤1）所制得粉末，加入混合酶，在46~48℃，pH5.6~6条件下酶解；所述混合酶为植物精提复合酶SPE‑005、植物精提复合酶SPE‑007A及黑曲霉以1：1：2.5比例混合；3）碱提；4）结晶：将步骤3）得到的藏红花酸，加入16~18倍量无水乙醇，78.9℃回流2小时，放凉结晶，过滤烘干后即得含量96％以上的藏红花酸产品；能够从栀子中提取制备出高含量藏红花酸，解决了藏红花原料短缺、价格昂贵问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物制药
，具体的说，是一种以栀子为原料制备藏红花酸的方法。
技术介绍
栀子（学名：Gardenia jasminoides Ellis）别名：黄栀子、山栀、白蟾，是茜草科植物栀子的果实。栀子的果实是传统中药，属卫生部颁布的第l批药食两用资源，具有护肝、利胆、降压、镇静、止血、消肿等作用。在中医临床常用于治疗黄疸型肝炎、扭挫伤 、高血压、糖尿病等症。栀子为灌木，高0.3-3米；嫩枝常被短毛，枝圆柱形，灰色。叶对生，革质，稀为纸质，少为3枚轮生，叶形多样，通常为长圆状披针形、倒卵状长圆形、倒卵形或椭圆形，长3-25厘米，宽1.5-8厘米，顶端渐尖、骤然长渐尖或短尖而钝，基部楔形或短尖，两面常无毛，上面亮绿，下面色较暗；侧脉8-15对，在下面凸起，在上面平；叶柄长0.2-1厘米；托叶膜质。花芳香，通常单朵生于枝顶，花梗长3-5毫米；萼管倒圆锥形或卵形，长8-25毫米，有纵棱，萼檐管形，膨大，顶部5-8裂，通常6裂，裂片披针形或线状披针形，长10-30毫米，宽1-4毫米，结果时增长，宿存；花冠白色或乳黄色，高脚碟状，喉部有疏柔毛，冠管狭圆筒形，长3-5厘米，宽4-6毫米，顶部5至8裂，通常6裂，裂片广展，倒卵形或倒卵状长圆形，长1.5-4厘米，宽0.6-2.8厘米；花丝极短，花药线形，长1.5-2.2厘米，伸出；花柱粗厚，长约4.5厘米，柱头纺锤形，伸出，长1-1.5厘米，宽3-7毫米，子房直径约3毫米，黄色，平滑。果卵形、近球形、椭圆形或长圆形，黄色或橙红色，长1.5-7厘米，直径1.2-2厘米，有翅状纵棱5-9条，顶部的宿存萼片长达4厘米，宽达6毫米；种子多数，扁，近圆形而稍有棱角，长约3.5毫米，宽约3毫米。花期3-7月，果期5月至翌年2月。功能主治清热，泻火，凉血。治热病虚烦不眠，黄疸，淋病，消渴，目赤，咽痛，吐血，衄血，血痢，尿血，热毒疮疡，扭伤肿痛栀子出自《本草图经》：栀子，今南方及西蜀州郡皆有之。药代动力学栀子甙（Geniposide）是稳定的，在37℃ pH1.8胃液中无变化，但在肠内溶物中可代谢成京尼平（Genipin）。羟异栀子甙（Gardenoside）对酸和热不稳定，在胃液中可转化成脱乙酰基车叶草甙酸甲酯（Deacetylasperulosidic acid metbylester，DAM）和鸡屎藤次甙甲酯（Scan-doside methylester，SSM）。在肠内溶物中DAM转化成DAM-genin，而SSM转化成SSM-genin。药理作用1.对肝脏功能的影响栀子提取物对动物血清和肝匀浆内碱性磷酸酶的活力并无影响，结扎总胆管引起碱性磷酶酶活力增加将近2倍。但栀子提取物对升高了的酶活力并无作用。栀子提取物对大白鼠血清和肝内乳酸脱氢酶活力的影响极小。栀子提取物对正常动物血清GOT无影响。结扎总胆管后，血清GOT增加7倍，栀子提取物可显著降低升高了的酶达40%。 栀子提取物对正常动物的酶活力无影响，但能使结扎总胆管动物升高了的酶活力恢复正常，可认为栀子提取物并不增加UDP一GT的活力。 测定肝脏二磷酸脲苷－葡萄糖脱氢酶表明，结扎总胆管可以降低酶活力，栀子提取物能增加正常动物酶活力，同时也能使降低了的酶活力升高。 栀子提取物能增加正常动物的Y蛋白、Z蛋白的量，但不能使由于结扎总胆管而减少的Y蛋白、Z蛋白量增加。动物给药后静脉注射BSP（2g/100g体重），测定血液中及胆汁中的BSP清除率，发现到达峰值时间均有相应的延长，表明BSP从肝内排出的过程受到阻滞。 栀子能降低血清胆红素含量，但与葡萄糖醛酰转移酶无关。因此可以认为栀子提取物对肝细胞无毒性作用，栀子提取物可降低动物血清胆红素水平，但其退黄机制较为复杂，它不增加UDP－GT的活力，也不增加肝内的Y蛋白和之蛋白，也不像茵陈蒿那样，增加胆汁的分沁量。肝脏的保护作用ICR大鼠预先（24或48小时以前）给于栀子提取物，可防止因半乳糖胺引起的暴发性肝炎。实验大鼠给于异硫氰酸a-萘酯50mg，可使大鼠血清胆红素和血清碱性磷酸酯酶和丙氨酸氨基转移酶升高，如每日给于栀子粗提物（1.5g，口服，3天）可使因异硫氰酸a-萘酯中毒大鼠的血清胆红素、丙氨酸氨基转移酶和碱性磷酸酶下降。栀子中提取的成分栀子甙同样有此作用。对肝脏的影响：大鼠灌胃藏红花素50mg 8天对肝脏功能无影响，但可引起急性肝脏变色。如服用高剂量100mg 2周则可引起肝损害和黑变，但低剂量10mg 40天并不产生上述情况，上述的肝损害和黑变是完全可逆的。因此藏红花素即使很高剂量对大鼠肝脏的毒性极小，在人服用时不可能达到如此高的剂量，所以藏红花素作为食品着色剂是十分安全的。2.对胆汁分泌的影响栀子具利胆作用。其醇提物和栀子甙、藏红花素等均能使胆汁分泌量增加。大鼠口服、静脉注射或十二指肠内给于栀子甙25mg引起胆汁分泌增加，以十二指肠内给药最为显著，几与去氢胆酸钠的效价相当。 3.对胃液分泌及胃肠运动的影响十二指肠给予栀子甙25mg，能使幽门结扎大鼠胃液分泌减少，总酸度下降，pH值升高，作用相当于硫酸阿托品的1/5-1/10。静脉注射栀子甙和其甙元（Genipin），剂量分别为 100mg与25mg，能抑制大鼠自发性胃蠕动和匹罗卡品（Pilocarpine）诱发的胃收缩，但作用短暂。低浓度（1 :25，000）栀子醇提取物能兴奋大鼠、兔小肠运动，高浓度（1 :1，000）则抑制。小鼠和豚鼠离体回肠试验表明栀子甙有较弱的抗乙酰胆碱和抗组胺作用。4.促进胰腺分泌作用杨稚珍等用胆胰插管研究栀子及其不同提取物对大鼠胆胰流量及胰酶活性的影响，结果显示，栀子及其几种提取物有明显的利胰、利胆及降胰酶效应。京尼平甙有最显著的降低胰淀粉酶作用，而其酶解产物京尼平的增加胰胆流量作用最强，持续时间较短。裴德恺的研究认为栀子促进胰腺分泌作用可能与保持胰细胞膜的结构、功能直接有关，从而从细胞水平上论证了栀子治疗胰腺炎的药效基础。初步观察亦发现栀子有使膜脂的过氧化产物减少作用。5.对中枢神经系统的作用小鼠腹腔注射栀子醇提取物（栀子果实粉碎后以乙醇渗漉，渗漉液在50℃减压浓缩去醇，制成300%浓缩液）5.69g，能减少小鼠自发活动（踏板法），与对照组相比较P<0.01，且与环己比妥钠（静脉注射，50mg）有协同作用，能延长睡眠时间近12倍。但如用药组小鼠灌胃 35g栀子醇渗漉液，然后分别在1.2.3小时，静脉注射环己烯巴比妥钠50mg，记录翻正反射消失时间，结果只有于2小时给药的栀子组能显著延长环己烯巴比妥钠睡眠时间（P<0.05）。但栀子对苯丙胺诱发活动无对抗作用。小鼠腹腔注射栀子醇提物5.69g，体温可平均降低3℃，大鼠腹腔注射200mg体温下降可持续7小时以上。6.对心血管系统的作用栀子煎剂和醇提物对麻醉或不麻醉猫、兔、大鼠，不论口服，腹腔注射或静脉注射给药均有降压作用，其降压作用对肾上腺素升压作用及阻断颈动脉血流的加压反射均无影响。也没有加强乙酰胆碱的降压作用。给予抗组胺药如苯海拉明，对栀子的降血压作用无影响。其降压作用不是由于释放组胺所引起。静脉注射普鲁卡因也不改变栀子的降血压效果，说明其降血压作用与传入神经纤维无关。对神经节无阻断作用。当切断两侧迷走本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以栀子为原料制备藏红花酸的方法，其特征在于：包括以下工艺步骤：1）提取：将栀子原料，用8~10倍质量的76.9％乙醇提取1~3次，合并提取液，将合并的提取液浓缩后喷雾干燥，粉末备用；2）酶解：将所述步骤1）所制得粉末，加入6~7倍量水和1.2~1.4％混合酶，在46~48℃，pH5.6~6条件下酶解24小时；所述混合酶为植物精提复合酶SPE‑005、植物精提复合酶SPE‑007A及黑曲霉以1：1：2.5比例混合；所述植物精提复合酶SPE‑005主要含有纤维素酶、果胶酶、兼有木聚糖酶、B‑葡聚糖酶；所述植物精提复合酶SPE‑007A主要含有B‑葡萄糖苷酶,兼有鼠李糖苷酶、木聚糖酶、B‑葡聚糖酶、纤维素酶、半纤维素酶；3）碱提：酶解后，加入反应物5~6倍量、质量浓度为1.2％的氢氧化钠溶液，72.4℃搅拌提取1h，过滤，过滤后碱液用稀酸中和至pH3~4，会有粗产品析出，再次过滤，得到含量55.5％以上的藏红花酸；4）结晶：将步骤3）得到的藏红花酸，加入16~18倍量无水乙醇，78.9℃回流2小时，放凉结晶，过滤烘干后即得含量96％以上的藏红花酸产品。

【技术特征摘要】
1.一种以栀子为原料制备藏红花酸的方法，其特征在于：包括以下工艺步骤：1）提取：将栀子原料，用8~10倍质量的76.9％乙醇提取1~3次，合并提取液，将合并的提取液浓缩后喷雾干燥，粉末备用；2）酶解：将所述步骤1）所制得粉末，加入6~7倍量水和1.2~1.4％混合酶，在46~48℃，pH5.6~6条件下酶解24小时；所述混合酶为植物精提复合酶SPE-005、植物精提复合酶SPE-007A及黑曲霉以1：1：2.5比例混合；所述植物精提复合酶SPE-005主要含有纤维素酶、果胶酶、兼有木聚糖酶、B-葡聚糖酶；所述植物精提复合酶SPE-007A主要含有B-葡萄糖苷酶,兼有鼠李糖苷酶、木聚糖酶、B-葡聚糖酶、纤维素酶、半纤维素酶；3）碱提：酶解后，加入反应物5~6倍量、质量浓度为1.2％的氢氧化钠溶液，72.4℃搅拌提取1h，过...

【专利技术属性】
技术研发人员：张蛟，
申请(专利权)人：成都易胜科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51